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公开(公告)号：CN110257434A
公开(公告)日：2019-09-20
申请号：CN201910531285.4
申请日：2019-06-19
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 利用Crispr/Cas9技术制备MyoG基因敲入和MSTN基因敲除的细胞克隆，属于基因工程技术领域，其特征在于：细胞克隆被分离纯化且经过2％马血清诱导分化后可以形成肌纤维；该骨骼肌卫星细胞具有融合为肌管的能力；MSTN基因敲除载体靶位点已成功连接，未发生碱基突变；实验组细胞经分化能够形成一定数目的肌管，表明干扰MyoG基因后，细胞依然能够分化成为肌管，但总体肌管融合率降低，形态和数目较对照组有极显著差异。
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公开(公告)号：CN103160510A
公开(公告)日：2013-06-19
申请号：CN201310113027.7
申请日：2013-04-02
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N15/113
Abstract: 一种肌细胞生成素（MyoG）基因的增强子，属于遗传工程技术领域，由调控元件E-box、SRE、KLF3、E-box、Sp1、E-box、Sp1、TEF-1组成，其特征在于MyoG基因增强子调控元件顺序为：E-box、SRE、KLF3、E-box、Sp1、E-box、Sp1、TEF-1；MyoG基因增强子“SE”的核酸序列如SeqIDNo:1所示，长度为147bp。在成肌细胞增殖和分化阶段均能促进MyoG基因表达的人工合成的增强子序列，且能够显著提高MyoG基因的表达活性。
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公开(公告)号：CN103146578A
公开(公告)日：2013-06-12
申请号：CN201310106352.0
申请日：2013-03-29
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 转基因细胞培养装置，属于医疗和实验室设备技术领域，由瓶盖、瓶口、瓶头、瓶颈、瓶上面、瓶下面、瓶体、瓶腔、支撑柱、生长板、透液板、液盒上腔、生长板插孔、液盒、瓶底、瓶侧壁、透液板体、板间支撑、支撑轴、生长板卡槽、托层立壁、托层、吸液层、生长透液贴壁层、透液孔、支撑轴孔、挑拣装置组成，其特征在于：生长板由托层立壁、生长透液贴壁层、吸液层、托层、透液孔、支撑轴孔组成，生长透液贴壁层是一层纤维膜，上面有很多透液孔，以利接种在膜外表面上细胞的生长；吸液层可以吸附培养液；托层塑料前缘和两侧缘向上折起，形成托层立壁，以免培养液向外渗出。转基因细胞培养装置制作简单，功能多样，可操作性强，成本低廉，效果明显。
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公开(公告)号：CN111363718A
公开(公告)日：2020-07-03
申请号：CN202010218745.0
申请日：2020-03-25
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N5/077
Abstract: 通过外源添加能显著促进小鼠C2C12成肌细胞分化的促分化试剂YYQ1，属于细胞生物学技术领域，其特征在于：所述的促分化试剂YYQ1的成分为10μM的视黄醇，通过将促分化试剂YYQ1添加于体外培养的C2C12细胞，能够获得较好的分化效率，促进C2C12细胞分化，最终达到外源添加后能显著促进小鼠C2C12成肌细胞的分化的目的，促分化试剂YYQ1为促进动物肌肉分化提供依据，以视黄醇促进肌肉分化，具有较大的实际应用价值。本发明制作简单，可操作性强，成本低廉，效果明显。
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公开(公告)号：CN104877960B
公开(公告)日：2017-09-19
申请号：CN201510292005.0
申请日：2015-06-01
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N5/077
Abstract: miR‑2400显著促进牛骨骼肌卫星细胞增殖的生物功能，属于细胞生物学技术领域，其特征在于：通过对牛骨骼肌卫星细胞进行体外分离培养，采用含2％马血清的分化培养基诱导牛骨骼肌卫星细胞分化，在诱导分化3天后，荧光显微镜下观察到MHC和Desmin在牛骨骼肌卫星细胞中的表达情况；采用茎环荧光定量RT‑PCR检测miR‑2400的表达量，采用EdU、PCNA免疫荧光、CCK‑8以及CCND2和CDK6表达量的荧光定量RT‑PCR检测miR‑2400对骨骼肌卫星细胞增殖的影响；以上结果表明miR‑2400在调节牛骨骼肌卫星细胞增殖和分化过程中具有一定的作用，能够显著促进牛骨骼肌卫星细胞增殖。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN104877960A
公开(公告)日：2015-09-02
申请号：CN201510292005.0
申请日：2015-06-01
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N5/077
Abstract: miR-2400显著促进牛骨骼肌卫星细胞增殖的生物功能，属于细胞生物学技术领域，其特征在于：通过对牛骨骼肌卫星细胞进行体外分离培养，采用含2％马血清的分化培养基诱导牛骨骼肌卫星细胞分化，在诱导分化3天后，荧光显微镜下观察到MHC和Desmin在牛骨骼肌卫星细胞中的表达情况；采用茎环荧光定量RT-PCR检测miR-2400的表达量，采用EdU、PCNA免疫荧光、CCK-8以及CCND2和CDK6表达量的荧光定量RT-PCR检测miR-2400对骨骼肌卫星细胞增殖的影响；以上结果表明miR-2400在调节牛骨骼肌卫星细胞增殖和分化过程中具有一定的作用，能够显著促进牛骨骼肌卫星细胞增殖。
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公开(公告)号：CN104651365A
公开(公告)日：2015-05-27
申请号：CN201510063159.2
申请日：2015-01-29
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/85
Abstract: 一个牛α-actin基因的启动子及其应用，属于遗传工程技术领域，其特征在于牛α-actin基因262bp启动子片段内部一段含有3个SRE正调控元件的170bp的核酸序列，将其使用不同引物进行PCR扩增，得到2个170bp的核酸序列，将2个170bp的核酸序列串联于262bp启动子片段的上游，即170bp-170bp-262bp，构建成一个α-actin基因的启动子片段，其核苷酸序列如Seq ID No：1所示。该启动子具有较强的启动活性和骨胳肌特异性，同时，在牛骨胳肌卫星细胞中能够显著提高α-actin基因的表达活性，可以作为高效特异性的骨骼肌启动子应用于提高肌肉产量的转基因肉牛生产。
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公开(公告)号：CN104862316A
公开(公告)日：2015-08-26
申请号：CN201510334716.X
申请日：2015-06-17
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N15/113
Abstract: 具有显著促进牛前脂肪细胞增殖生物功能的miRNA-2400，属于细胞生物学技术领域，通过对牛前脂肪细胞进行体外分离培养，采用免疫荧光染色法鉴定牛脂肪前体细胞，采用茎环荧光定量RT-PCR检测miRNA-2400的表达量，采用EdU检测miRNA-2400对前脂肪细胞增殖的影响；其特征在于在牛前脂肪细胞分化为脂肪细胞的过程中，随着分化天数和分化程度的增加，miRNA-2400表达量明显下降；miRNA-2400过表达后，前脂肪细胞增殖率明显提高，与增殖相关的基因CCND1表达量明显上升；结果表明：miRNA-2400是一种在调解脂肪细胞发育过程中具有显著促进前脂肪细胞增殖作用的小RNA。
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公开(公告)号：CN103146578B
公开(公告)日：2014-11-05
申请号：CN201310106352.0
申请日：2013-03-29
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 转基因细胞培养装置，属于医疗和实验室设备技术领域，由瓶盖、瓶口、瓶头、瓶颈、瓶上面、瓶下面、瓶体、瓶腔、支撑柱、生长板、透液板、液盒上腔、生长板插孔、液盒、瓶底、瓶侧壁、透液板体、板间支撑、支撑轴、生长板卡槽、托层立壁、托层、吸液层、生长透液贴壁层、透液孔、支撑轴孔、挑拣装置组成，其特征在于：生长板由托层立壁、生长透液贴壁层、吸液层、托层、透液孔、支撑轴孔组成，生长透液贴壁层是一层纤维膜，上面有很多透液孔，以利接种在膜外表面上细胞的生长；吸液层可以吸附培养液；托层塑料前缘和两侧缘向上折起，形成托层立壁，以免培养液向外渗出。转基因细胞培养装置制作简单，功能多样，可操作性强，成本低廉，效果明显。
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公开(公告)号：CN101886060A
公开(公告)日：2010-11-17
申请号：CN201010231364.2
申请日：2010-07-20
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N5/0775 , C12N5/10
Abstract: 牛肌卫星细胞的体外分离培养及诱导分化的方法，它涉及细胞的体外分离培养及诱导分化的方法。它解决了现有牛肌卫星细胞的分离培养存在成本高，传代稳定性不好，且诱导分化存在所获肌管数量少及不具有收缩功能的问题。方法：清洗组织，用胰蛋白酶和胶原酶液消化；过滤后离心，重悬细胞，接种后用差速贴壁法培养细胞；培养至汇合率为95%，用胰酶进行传代即完成。方法：获得PEI-质粒复合物；牛肌卫星细胞培养至汇合率为75%，清洗后加DMEM高糖培养液，将PEI-质粒复合物加到细胞表面，更换培养液A培养，再更换培养B诱导分化即完成。本发明牛肌卫星细胞的分离培养成本低，传代稳定性好，诱导分化所获肌管数量大且具有收缩功能。
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