公开(公告)号：CN101886060A

公开(公告)日：2010-11-17

申请号：CN201010231364.2

申请日：2010-07-20

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 严云勤 ,  佟慧丽 ,  李树峰 ,  兴孝友 ,  高学军 ,  陆黎敏 ,  李光鹏 ,  金慧然

IPC: C12N5/0775 ,  C12N5/10

Abstract: 牛肌卫星细胞的体外分离培养及诱导分化的方法，它涉及细胞的体外分离培养及诱导分化的方法。它解决了现有牛肌卫星细胞的分离培养存在成本高，传代稳定性不好，且诱导分化存在所获肌管数量少及不具有收缩功能的问题。方法：清洗组织，用胰蛋白酶和胶原酶液消化；过滤后离心，重悬细胞，接种后用差速贴壁法培养细胞；培养至汇合率为95%，用胰酶进行传代即完成。方法：获得PEI-质粒复合物；牛肌卫星细胞培养至汇合率为75%，清洗后加DMEM高糖培养液，将PEI-质粒复合物加到细胞表面，更换培养液A培养，再更换培养B诱导分化即完成。本发明牛肌卫星细胞的分离培养成本低，传代稳定性好，诱导分化所获肌管数量大且具有收缩功能。