再生小分子miRNA-XU2及其应用

    公开(公告)号:CN114807139B

    公开(公告)日:2023-11-24

    申请号:CN202210509065.3

    申请日:2022-05-11

    Abstract: 本发明提供了一种再生小分子miRNA‑XU2及其应用,该miRNA‑XU2的序列如SEQ ID NO.1所示,且该miRNA‑XU2在制备受损心脏的心肌细胞再生药物中得以应用,具体制备促进受损心脏的心肌细胞再生药物;将小鼠麻醉,注射标记细胞增殖药物,细胞增殖药物为5‑乙炔基‑2'‑脱氧尿苷,小鼠心脏造模成功,向造模小鼠的受损心脏注射miRNA‑XU2,进行石蜡包埋切片,最后通过荧光染色,观察细胞增殖信号;通过向小鼠受损心脏注射本发明的miRNA‑XU2,可以实现受损心脏心肌细胞的增殖,然后石蜡切片内出现明显细胞增殖信号,因此miRNA‑XU2具有促进小鼠受损心脏的心肌再生的作用。

    低温下南极磷虾胰蛋白酶的酶活评价方法

    公开(公告)号:CN110724701B

    公开(公告)日:2023-07-25

    申请号:CN201911097975.X

    申请日:2019-11-12

    Abstract: 本发明提供了一种低温下南极磷虾胰蛋白酶的酶活评价方法,其包括如下步骤:分别获得南极磷虾胰蛋白酶的2个亚型和对照组南美白对虾胰蛋白酶;分别构建南极磷虾胰蛋白酶亚型和南美白对虾胰蛋白酶的原核表达载体;将南极磷虾胰蛋白酶亚型的原核表达载体和南美白对虾胰蛋白酶的原核表达载体分别进行提取、纯化和复性;分别对纯化后的南极磷虾胰蛋白酶和南美白对虾胰蛋白酶进行酶活测定;预测南极磷虾胰蛋白酶亚型基因的正选择位点并进行突变,然后进行酶活测定;本发明通过定点突变技术对南极磷虾胰蛋白酶功能位点进行突变,验证了南极磷虾胰蛋白酶在低温下发挥稳定催化活性的位点所在,阐释了南极磷虾胰蛋白酶在低温下发挥较高催化活性的特点。

    低温下南极磷虾胰蛋白酶的酶活评价方法

    公开(公告)号:CN110724701A

    公开(公告)日:2020-01-24

    申请号:CN201911097975.X

    申请日:2019-11-12

    Abstract: 本发明提供了一种低温下南极磷虾胰蛋白酶的酶活评价方法,其包括如下步骤:分别获得南极磷虾胰蛋白酶的2个亚型和对照组南美白对虾胰蛋白酶;分别构建南极磷虾胰蛋白酶亚型和南美白对虾胰蛋白酶的原核表达载体;将南极磷虾胰蛋白酶亚型的原核表达载体和南美白对虾胰蛋白酶的原核表达载体分别进行提取、纯化和复性;分别对纯化后的南极磷虾胰蛋白酶和南美白对虾胰蛋白酶进行酶活测定;预测南极磷虾胰蛋白酶亚型基因的正选择位点并进行突变,然后进行酶活测定;本发明通过定点突变技术对南极磷虾胰蛋白酶功能位点进行突变,验证了南极磷虾胰蛋白酶在低温下发挥稳定催化活性的位点所在,阐释了南极磷虾胰蛋白酶在低温下发挥较高催化活性的特点。

    一种基于kdm6bb基因敲降技术构建无基因编辑全雄鱼的方法

    公开(公告)号:CN119791068A

    公开(公告)日:2025-04-11

    申请号:CN202510047206.8

    申请日:2025-01-13

    Abstract: 本发明公开了一种基于kdm6bb基因敲降技术构建无基因编辑全雄鱼的方法,包括:利用CRISPR/Cas9基因编辑技术对鱼类kdm6bb基因进行敲降处理,通过基因型鉴定获得kdm6bb杂合子(kdm6bb+/‑);通过杂合子鱼的自交,获得有效降低kdm6bb蛋白表达的kdm6bb杂合突变体;通过性别分子标记筛选具有XY性别遗传型的伪雌鱼,与野生型XY雄鱼交配,筛选不含kdm6bb突变的YY性别遗传型超雄鱼,与野生型XX雌鱼杂交,获得不携带kdm6bb突变的全雄鱼群体,实现鱼类单性养殖,提高性别控制育种的效率,在以XX/XY性别决定为基础的水产经济鱼类中表现广泛的适应性。

    一种鉴定长江流域长颌鲚和短颌鲚的SNP位点和方法

    公开(公告)号:CN116926205A

    公开(公告)日:2023-10-24

    申请号:CN202310932856.1

    申请日:2023-07-27

    Abstract: 本发明为一种鉴定长江流域长颌鲚和短颌鲚的SNP位点和方法,涉及分子生物学、基因组学的领域,具体公开了用于鉴别长江流域长颌鲚与短颌鲚的引物组合及其扩增产物中的SNP位点组合。并公开了一种鉴别长颌鲚和短颌鲚的方法,包括以下步骤:(1)提取刀鲚样本DNA,采用上述引物组合中的任意一个或者多个引物对进行扩增;(2)分析扩增产物序列SNP标记的碱基,判断刀鲚样本为长颌鲚或短颌鲚。本发明获得了3个主要序列的6个SNP位点,这6个SNP在长颌鲚和短颌鲚之间存在显著差异,可以从分子层面对刀鲚类型进行有效分类,通过对组织DNA提取、PCR扩增和测序,就能快速准确地鉴别长颌鲚、短颌刀鲚类型。该方法操作简便、处理时间短且准确率高,适合不同实验环境需要。

    一种南极鱼鳍细胞系及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN119081989A

    公开(公告)日:2024-12-06

    申请号:CN202410858627.4

    申请日:2024-06-28

    Abstract: 本发明公开了一种南极鱼鳍细胞系及其构建方法和应用,其中,构建方法包括以下步骤:步骤S1:采集南极鱼鳍组织,清洁灭菌,剪碎,获得组织块;步骤S2:将组织块放入培养瓶中进行培养,获得原代培养细胞;步骤S3:当原代培养细胞贴壁生长至一定程度,加入胰蛋白酶‑ED TA进行消化,待原代培养细胞变圆脱落后,加入完全培养基,使细胞继续生长;步骤S4:当原代培养细胞生长到一定程度,用PBS冲洗细胞,加入胰蛋白酶‑EDTA消化液消化,当消化完毕后,细胞重悬,进行传代培养,由此构建完成南极鱼鳍细胞系。在所述的技术方案中,南极鱼鳍细胞系生长状态良好,细胞增殖稳定,可连续传代,并可用于表达外源基因进行基因功能研究。

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