公开(公告)号：CN104267192B

公开(公告)日：2016-05-25

申请号：CN201410462190.9

申请日：2014-09-11

Applicant: 上海大学

Inventor： 李根喜 ,  赵婧 ,  吴吉光 ,  仲卫冬 ,  辛美玲

IPC: G01N33/68

Abstract: 本发明涉及一种检测凝血酶用生物电化学传感器其制备方法及应用。该传感器为三电极体系传感器，其中对电极为铂电极，参比电极为饱和甘汞电极，工作电极为功能化修饰的热解石墨电极，该功能化修饰的热解石墨电极是在热解石墨电极表面依次修饰有聚（二烯丙基二甲基氯化铵）、金纳米颗粒、葫芦[7]脲和循环混合液；所述的循环混合液中含有：100 nM MB标记的探针DNA链、1 nM延伸DNA链、1 nM的凝血酶适体链、1.6 unit/μL的T4 DNA连接酶和0.4 unit/μL的Exo III。本发明利用凝血酶与适体的特异性结合能力，同时，借助连接酶辅助作用引发Exo III的循环切割反应，并结合电化学快速灵敏的检测优势实现对凝血酶的高灵敏性检测。

公开(公告)号：CN104232618A

公开(公告)日：2014-12-24

申请号：CN201410460134.1

申请日：2014-09-11

Applicant: 上海大学

Inventor： 李根喜 ,  赵婧 ,  胡随随 ,  陈稀娴 ,  王乔

IPC: C12N15/10 ,  G01N21/33

Abstract: 本发明涉及一种检测小分子配体靶蛋白用RCA产物及其检测方法。该RCA产物以小分子修饰的寡聚核苷酸链作为探针分子，该核酸探针分子的序列为5’-AAATTGAGCTGCAGAATGGGATCGGTACACTGCG-NH-folate-3’。利用了小分子与靶蛋白的高亲和性高特异性结合产生的末端保护效果，保证了检测的高度特异性，同时借助级联信号放大技术，提高了检测的灵敏性。通过紫外-可见光谱技术捕捉G-催化产生的颜色变化，本发明方法简单、快速、无需信号标记；灵敏度高，可以在1ng/mL到500ng/mL范围内线性检测叶酸受体蛋白，检测限为0.46ng/mL；特异性强，可以有效地区分靶蛋白与其他对照蛋白。

公开(公告)号：CN109682875A

公开(公告)日：2019-04-26

申请号：CN201810554314.4

申请日：2018-06-01

Applicant: 上海大学

Inventor： 曹亚 ,  朱小立 ,  王美文 ,  张娟 ,  赵婧 ,  陈桂芳

IPC: G01N27/327

CPC classification number: G01N27/3277

Abstract: 本发明公开了一种用于肝细胞癌筛查的核酸电化学检测体系及检测方法。该方法依赖于催化发夹环组装过程实现对于目标miRNA-500的特异性识别和信号放大，进而借助点击化学技术促发电化学信号报告分子从溶液到电极界面的转移，实现对于miRNA-500的电化学检测。本发明检测miRNA-500的线性范围是5~10000 pM，检出限是3.4 pM。另外，该发明具有灵敏度高、特异性强、操作简单等优点，因此在肝细胞癌筛查领域中具有巨大的潜在应用价值。

公开(公告)号：CN107271511A

公开(公告)日：2017-10-20

申请号：CN201710367164.1

申请日：2017-05-23

Applicant: 上海大学

Inventor： 李根喜 ,  赵婧 ,  杨莉莉 ,  吕赟

IPC: G01N27/327

CPC classification number: G01N27/3271

Abstract: 本发明涉及一种检测肽酰基精氨酸脱亚氨酶用生物传感器及其制备方法和应用。该传感器是在金电极表面修饰多肽链1 ( FGGGRGAC )，该肽链C端的半胱氨酸的巯基通过金硫键把多肽链1固定在电极表面，多肽链2 ( FGGGGC ) 功能化银纳米颗粒通过多肽链2的半胱氨酸的巯基与银纳米颗粒连接。在超分子葫芦脲8 ( CB[8] ) 辅助的主-客体相互作用帮助下，功能化的银纳米颗粒由于CB[8]可以与多肽链1 N端FGG和多肽链2 N端的FGG识别固定在电极表面。本发明的传感器利用超分子化学辅助的信号标记方法提高该实验的灵敏性，可以检测到PAD4的线性范围为0.005 nM至200 nM，检测限为0.79 nM，特异性也特别强，可以有效地区分靶标与其他对照蛋白，也可以做到在HL-60细胞裂解物中检测到内源性PAD4的活性。

公开(公告)号：CN102608180B

公开(公告)日：2014-08-13

申请号：CN201210075052.6

申请日：2012-03-21

Applicant: 上海大学

Inventor： 李根喜 ,  赵婧 ,  陈桂芳 ,  刘丽丽 ,  邱焕焕 ,  闫雅琳

IPC: G01N27/26 ,  G01N27/327

Abstract: 本发明涉及一种检测银离子的生物电化学传感器及其制备方法。该传感器为三电极体系传感器，其中对电极是铂电极，参比电极是饱和甘汞电极，工作电极为金电极，其特征在于所述的金电极上修饰有模板DNA，模板DNA的序列为：5’-CCTACGACTGGATGACGATCCCTACGACTGAAAAAAAAAAAA-C6-SH-3’。本发明利用银离子与胞嘧啶亲和力强的特点，又结合了电化学检测灵敏、方便的优势，巧妙地检测了银离子，线性范围在10pM～100nM之间，检出限约为3.3pM。

公开(公告)号：CN102262118A

公开(公告)日：2011-11-30

申请号：CN201110106060.8

申请日：2011-04-27

Applicant: 上海大学

Inventor： 李根喜 ,  赵婧 ,  郭超 ,  赵洪喜 ,  吴瑶 ,  陈阳阳

IPC: G01N27/406 ,  G01N27/327 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明涉及一种检测肿瘤标志物的生物电化学传感器及其制备方法。为三电极体系传感器，其特征在于所述的三电极中的对电极是铂电极，参比电极是饱和甘汞电极，工作电极为金电极，在该金电极上修饰有与两种肿瘤标志物的DNA适体互补的DNA链，即cDNA链，并在该cDNA链末端标记上电化学探针二茂铁分子。本发明的检测肿瘤标志物的新型生物电化学传感器结合了DNA适体高特异性结合靶蛋白以及电化学检测方法高灵敏度的特点，使癌症的早期诊断成为可能。

公开(公告)号：CN106093158B

公开(公告)日：2018-10-23

申请号：CN201610295960.4

申请日：2016-05-07

Applicant: 上海大学

Inventor： 李根喜 ,  赵婧 ,  吕赟 ,  鲁蒙佳

IPC: G01N27/327 ,  G01N27/30

Abstract: 本发明涉及一种谷胱甘肽检测用生物传感器、其制备方法及其检测方法。该传感器是在金电极的表面修饰有DNA双链探针，该双链探针中的第一探针是5’端修饰有巯基的Probe DNA1通过金金巯键固定在金电极表面，第二探针是3’端修饰亚甲基蓝信号分子的Probe DNA 2，所述的第二探针与第一探针部分杂交互补配对，从而形成DNA双链探针；所述的第一探针的碱基序列为：5’‑SH‑CCCCCTCTATACCGTACCTTTTTT‑3’；所述的第二探针的碱基序列为：5’‑GGTACGGTATAGAG‑MB‑3’。本发明的传感器可以灵敏地检测到谷胱甘肽的线性范围为0.5 nM至50μM，检测限为0.14 nM，且特异性强，可以有效地区分靶标与其他对照氨基酸和蛋白，也可在缓冲液和血清样本中高特异性的区分靶标分子，而且我们将体系运用到细胞中谷胱甘肽的检测。

公开(公告)号：CN106093158A

公开(公告)日：2016-11-09

申请号：CN201610295960.4

申请日：2016-05-07

Applicant: 上海大学

Inventor： 李根喜 ,  赵婧 ,  吕赟 ,  鲁蒙佳

IPC: G01N27/327 ,  G01N27/30

CPC classification number: G01N27/327 ,  G01N27/30

Abstract: 本发明涉及一种谷胱甘肽检测用生物传感器、其制备方法及其检测方法。该传感器是在金电极的表面修饰有DNA双链探针，该双链探针中的第一探针是5’端修饰有巯基的Probe DNA1通过金金巯键固定在金电极表面，第二探针是3’端修饰亚甲基蓝信号分子的Probe DNA 2，所述的第二探针与第一探针部分杂交互补配对，从而形成DNA双链探针；所述的第一探针的碱基序列为：5’‑SH‑CCCCCTCTATACCGTACCTTTTTT‑3’；所述的第二探针的碱基序列为：5’‑GGTACGGTATAGAG‑MB‑3’。本发明的传感器可以灵敏地检测到谷胱甘肽的线性范围为0.5 nM至50μM，检测限为0.14 nM，且特异性强，可以有效地区分靶标与其他对照氨基酸和蛋白，也可在缓冲液和血清样本中高特异性的区分靶标分子，而且我们将体系运用到细胞中谷胱甘肽的检测。

公开(公告)号：CN105445349A

公开(公告)日：2016-03-30

申请号：CN201510659916.2

申请日：2015-10-14

Applicant: 上海大学

Inventor： 李根喜 ,  赵婧 ,  陈稀娴 ,  吕赟

IPC: G01N27/327 ,  G01N27/48

Abstract: 本发明涉及一种特异性多肽探针修饰的金电极、其制备方法及应用。该金电极的表面通过金-巯共价键的作用自组装修饰有末端带有半胱氨酸中段含有肽酰精氨酸脱亚胺酶底物的多肽序列，该多肽的序列为：GRGAGRGAC。该生物传感器利用功能化的多肽探针修饰的金电极与目标蛋白酶反应前后引起的电荷微环境变化，借助具有良好导电性的电信号分子[Ru(NH3)5Cl]2+为探针，实现了肽酰精氨酸脱亚胺酶4活性的灵敏检测，可以有效地区分靶蛋白与其他对照蛋白。同时，本实验体系为PAD4的抑制剂筛选提供了支持，可以用于分析以CL-amidine为例的靶蛋白酶抑制剂的抑制活性，验证了本发明的抑制剂筛选应用能力。

公开(公告)号：CN105203618A

公开(公告)日：2015-12-30

申请号：CN201510612814.5

申请日：2015-09-24

Applicant: 上海大学

Inventor： 李根喜 ,  赵婧 ,  吕赟 ,  康铭扬

IPC: G01N27/48

Abstract: 本发明涉及一种检测叶酸靶蛋白用检测体系及其检测方法。每100μL该传感体系含有70 uL Mops-Buffer、25μL 4×Exo III Buffer、1uL 10uM的Probe链和1uL 10uM 该链的互补cDNA链，在90℃～95℃的恒温下加热5～10min，冷却至室温；所述的Probe链为：5'-folate-NH-GCGTCACATGGCTAGGGTAAAGTCTACGGCCGGGTAGA-3'；所述的互补cDNA链为：5'-CTAGCCATGTG ACGC -3'。我们的方法可以灵敏地检测到蛋白的线性范围为0.01ng/mL至100ng/mL，检测限为7.8pg/mL，且特异性强，可以有效地区分靶蛋白与其他对照蛋白，也可在缓冲液和血清样本中高特异性的区分靶蛋白。