公开(公告)号：CN107271511A

公开(公告)日：2017-10-20

申请号：CN201710367164.1

申请日：2017-05-23

Applicant: 上海大学

Inventor： 李根喜 ,  赵婧 ,  杨莉莉 ,  吕赟

IPC: G01N27/327

CPC classification number: G01N27/3271

Abstract: 本发明涉及一种检测肽酰基精氨酸脱亚氨酶用生物传感器及其制备方法和应用。该传感器是在金电极表面修饰多肽链1 ( FGGGRGAC )，该肽链C端的半胱氨酸的巯基通过金硫键把多肽链1固定在电极表面，多肽链2 ( FGGGGC ) 功能化银纳米颗粒通过多肽链2的半胱氨酸的巯基与银纳米颗粒连接。在超分子葫芦脲8 ( CB[8] ) 辅助的主-客体相互作用帮助下，功能化的银纳米颗粒由于CB[8]可以与多肽链1 N端FGG和多肽链2 N端的FGG识别固定在电极表面。本发明的传感器利用超分子化学辅助的信号标记方法提高该实验的灵敏性，可以检测到PAD4的线性范围为0.005 nM至200 nM，检测限为0.79 nM，特异性也特别强，可以有效地区分靶标与其他对照蛋白，也可以做到在HL-60细胞裂解物中检测到内源性PAD4的活性。

公开(公告)号：CN106093158B

公开(公告)日：2018-10-23

申请号：CN201610295960.4

申请日：2016-05-07

Applicant: 上海大学

Inventor： 李根喜 ,  赵婧 ,  吕赟 ,  鲁蒙佳

IPC: G01N27/327 ,  G01N27/30

Abstract: 本发明涉及一种谷胱甘肽检测用生物传感器、其制备方法及其检测方法。该传感器是在金电极的表面修饰有DNA双链探针，该双链探针中的第一探针是5’端修饰有巯基的Probe DNA1通过金金巯键固定在金电极表面，第二探针是3’端修饰亚甲基蓝信号分子的Probe DNA 2，所述的第二探针与第一探针部分杂交互补配对，从而形成DNA双链探针；所述的第一探针的碱基序列为：5’‑SH‑CCCCCTCTATACCGTACCTTTTTT‑3’；所述的第二探针的碱基序列为：5’‑GGTACGGTATAGAG‑MB‑3’。本发明的传感器可以灵敏地检测到谷胱甘肽的线性范围为0.5 nM至50μM，检测限为0.14 nM，且特异性强，可以有效地区分靶标与其他对照氨基酸和蛋白，也可在缓冲液和血清样本中高特异性的区分靶标分子，而且我们将体系运用到细胞中谷胱甘肽的检测。

公开(公告)号：CN106093158A

公开(公告)日：2016-11-09

申请号：CN201610295960.4

申请日：2016-05-07

Applicant: 上海大学

Inventor： 李根喜 ,  赵婧 ,  吕赟 ,  鲁蒙佳

IPC: G01N27/327 ,  G01N27/30

CPC classification number: G01N27/327 ,  G01N27/30

Abstract: 本发明涉及一种谷胱甘肽检测用生物传感器、其制备方法及其检测方法。该传感器是在金电极的表面修饰有DNA双链探针，该双链探针中的第一探针是5’端修饰有巯基的Probe DNA1通过金金巯键固定在金电极表面，第二探针是3’端修饰亚甲基蓝信号分子的Probe DNA 2，所述的第二探针与第一探针部分杂交互补配对，从而形成DNA双链探针；所述的第一探针的碱基序列为：5’‑SH‑CCCCCTCTATACCGTACCTTTTTT‑3’；所述的第二探针的碱基序列为：5’‑GGTACGGTATAGAG‑MB‑3’。本发明的传感器可以灵敏地检测到谷胱甘肽的线性范围为0.5 nM至50μM，检测限为0.14 nM，且特异性强，可以有效地区分靶标与其他对照氨基酸和蛋白，也可在缓冲液和血清样本中高特异性的区分靶标分子，而且我们将体系运用到细胞中谷胱甘肽的检测。

公开(公告)号：CN105445349A

公开(公告)日：2016-03-30

申请号：CN201510659916.2

申请日：2015-10-14

Applicant: 上海大学

Inventor： 李根喜 ,  赵婧 ,  陈稀娴 ,  吕赟

IPC: G01N27/327 ,  G01N27/48

Abstract: 本发明涉及一种特异性多肽探针修饰的金电极、其制备方法及应用。该金电极的表面通过金-巯共价键的作用自组装修饰有末端带有半胱氨酸中段含有肽酰精氨酸脱亚胺酶底物的多肽序列，该多肽的序列为：GRGAGRGAC。该生物传感器利用功能化的多肽探针修饰的金电极与目标蛋白酶反应前后引起的电荷微环境变化，借助具有良好导电性的电信号分子[Ru(NH3)5Cl]2+为探针，实现了肽酰精氨酸脱亚胺酶4活性的灵敏检测，可以有效地区分靶蛋白与其他对照蛋白。同时，本实验体系为PAD4的抑制剂筛选提供了支持，可以用于分析以CL-amidine为例的靶蛋白酶抑制剂的抑制活性，验证了本发明的抑制剂筛选应用能力。

公开(公告)号：CN105203618A

公开(公告)日：2015-12-30

申请号：CN201510612814.5

申请日：2015-09-24

Applicant: 上海大学

Inventor： 李根喜 ,  赵婧 ,  吕赟 ,  康铭扬

IPC: G01N27/48

Abstract: 本发明涉及一种检测叶酸靶蛋白用检测体系及其检测方法。每100μL该传感体系含有70 uL Mops-Buffer、25μL 4×Exo III Buffer、1uL 10uM的Probe链和1uL 10uM 该链的互补cDNA链，在90℃～95℃的恒温下加热5～10min，冷却至室温；所述的Probe链为：5'-folate-NH-GCGTCACATGGCTAGGGTAAAGTCTACGGCCGGGTAGA-3'；所述的互补cDNA链为：5'-CTAGCCATGTG ACGC -3'。我们的方法可以灵敏地检测到蛋白的线性范围为0.01ng/mL至100ng/mL，检测限为7.8pg/mL，且特异性强，可以有效地区分靶蛋白与其他对照蛋白，也可在缓冲液和血清样本中高特异性的区分靶蛋白。