一种检测特定位点5-羟甲基化胞嘧啶的方法

    公开(公告)号:CN119125276A

    公开(公告)日:2024-12-13

    申请号:CN202411322509.8

    申请日:2024-09-23

    Applicant: 上海大学

    Abstract: 本发明提出了一种检测特定位点5‑羟甲基化胞嘧啶(5‑hydroxymethylcytosine,5hmC)的方法。该方法利用电化学生物传感平台,通过设计半标记引物并特异性扩增生成杂交双链DNA,其中双标记双链DNA能够被捕获并产生电流信号。T7核酸内切酶I能够识别并切割经过氧化+亚硫酸氢盐处理和亚硫酸氢盐处理后产生的DNA杂交中的A‑C错配,从而引起电流信号的减少。电流信号的变化与5hmC的含量正相关。本发明具有高灵敏度,能够在存在10万倍甲基化DNA或未甲基化DNA的情况下检测到10pg的羟甲基化DNA;检测周期短,可在24小时内完成,并且具备单碱基分辨率。

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