公开(公告)号：CN103233023A

公开(公告)日：2013-08-07

申请号：CN201310127799.6

申请日：2013-04-15

Applicant: 上海大学

Inventor： 朱晨光 ,  宋任涛 ,  王佩佩 ,  徐腾蛟 ,  王伟 ,  陆定 ,  唐远平 ,  梅冰

IPC: C12N15/52 ,  C12N9/00 ,  C12N15/63 ,  C12N15/10

Abstract: 本发明涉及一种节杆菌谷氨酰胺合成酶基因、其编码蛋白及其克隆方法。本发明的基因来源于不动杆菌属细菌，为SEQ ID NO1所示的碱基序列。该基因编码谷氨酰胺合成酶，能够在大肠杆菌中发挥谷氨酰胺合成酶的功能，能恢复大肠杆菌突变体合成谷氨酰胺的能力，同时也预示了它在其他生物氮高效利用方面的应用价值。

公开(公告)号：CN103205442A

公开(公告)日：2013-07-17

申请号：CN201310130523.3

申请日：2013-04-16

Applicant: 上海大学

Inventor： 朱晨光 ,  王佩佩 ,  王伟 ,  吴悄 ,  沈春磊 ,  唐远平 ,  梅冰 ,  宋任涛

IPC: C12N15/52 ,  C12N9/00 ,  C12N15/63 ,  C12N1/21 ,  C12N15/10 ,  C12R1/265

Abstract: 本发明涉及一种微球菌谷氨酰胺合成酶基因、其编码蛋白及其克隆方法。本发明的基因来源于微球菌属细菌，为SEQ ID NO.1所示的碱基序列。该基因编码谷氨酰胺合成酶，能够显著提高模式生物大肠杆菌合成谷氨酰胺的能力。这预示了所公开的全长基因及氨基酸序列，在提高生物体的氮利用效率和增加生物体氮元素含量的基因工程方面具有应用价值。

公开(公告)号：CN102787127A

公开(公告)日：2012-11-21

申请号：CN201210184123.6

申请日：2012-09-07

Applicant: 上海大学

Inventor： 朱晨光 ,  宋任涛 ,  王佩佩 ,  沈春磊 ,  唐远平 ,  许政暟

IPC: C12N15/52 ,  C12N15/10 ,  C12R1/38 ,  C12R1/085 ,  C12R1/41

Abstract: 本发明涉及一种快速克隆细菌谷氨酰胺合成酶（GS）基因的方法。该方法的主要内容包括：（1）针对细菌类群的GS基因序列设计嵌套式兼并引物；（2）使用嵌套引物中的外引物和内引物下游引物对土壤DNA进行第一轮扩增，扩增产物纯化后作为模版，用内引物上下游引物进行第二轮PCR扩增；（3）对第二轮扩增后的特异片段进行纯化，连接pMD18-T载体，转化大肠杆菌Top10，挑取正确的阳性克隆；（4）对阳性克隆的插入片段进行测序和序列分析，确定基因的正确性；（5）用大肠杆菌GS缺陷型ET6017的功能互补实验来验证所克隆基因的功能。本发明所描述的基因克隆方法具有很高的成功率和较好的准确性。