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公开(公告)号：CN115772495A
公开(公告)日：2023-03-10
申请号：CN202211544916.4
申请日：2022-12-02
Applicant: 上海交通大学医学院附属第九人民医院 , 中国人民解放军海军军医大学
IPC: C12N5/077 , C12N5/0735 , A61L27/38
Abstract: 本申请涉及干细胞技术领域，特别涉及一种诱导胚胎干细胞定向分化为外胚层软骨祖细胞的培养基、方法及用途。本发明通过在不同培养基中分步诱导，能够高效的定向分化得到外胚层软骨祖细胞，并且所得到的外胚层软骨祖细胞具备良好的稳定性、增殖能力及自发分化为软骨细胞的潜能；与传统的中胚层来源的软骨细胞相比，本发明所分化得到的外胚层软骨祖细胞与颞下颌关节髁突软骨细胞在整个表达谱上更为接近，对起源于外胚层的软骨具有极高的研究价值。
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公开(公告)号：CN115772495B
公开(公告)日：2025-05-16
申请号：CN202211544916.4
申请日：2022-12-02
Applicant: 上海交通大学医学院附属第九人民医院 , 中国人民解放军海军军医大学
IPC: C12N5/077 , C12N5/0735 , A61L27/38
Abstract: 本申请涉及干细胞技术领域，特别涉及一种诱导胚胎干细胞定向分化为外胚层软骨祖细胞的培养基、方法及用途。本发明通过在不同培养基中分步诱导，能够高效的定向分化得到外胚层软骨祖细胞，并且所得到的外胚层软骨祖细胞具备良好的稳定性、增殖能力及自发分化为软骨细胞的潜能；与传统的中胚层来源的软骨细胞相比，本发明所分化得到的外胚层软骨祖细胞与颞下颌关节髁突软骨细胞在整个表达谱上更为接近，对起源于外胚层的软骨具有极高的研究价值。
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公开(公告)号：CN119410573A
公开(公告)日：2025-02-11
申请号：CN202411349906.4
申请日：2024-09-26
Applicant: 中国人民解放军海军军医大学
Abstract: 本发明涉及一种将神经中胚层祖细胞定向分化为骨骼肌细胞的培养体系、诱导方法及应用。该体系包括两种分化培养基，基础培养体系均包括液体基础培养基、0.01‑5×B27添加剂、0.01‑5×N2添加剂、0.01‑10％青霉素/链霉素、0.01‑500μg/mL 2‑磷酸‑维生素C；分化培养基一还包括0.01‑50μM GSK3抑制剂、0.01‑500ng/mLFGF家族生长因子；分化培养基二还包括0.01‑500ng/mLHGF蛋白、0.01‑500ng/mL IGF家族生长因子。诱导方法步骤如下：利用分化培养基一将神经中胚层祖细胞分化为轴旁中胚层；利用分化培养基二将轴旁中胚层诱导分化为骨骼肌细胞。本方法获得的骨骼肌细胞可用于治疗肌肉疾病细胞的制备、肌肉组织工程、肌肉疾病模型的建立、肌肉疾病的体外药物筛选等。
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公开(公告)号：CN119060937A
公开(公告)日：2024-12-03
申请号：CN202410844143.4
申请日：2024-06-27
Applicant: 中国人民解放军海军军医大学
Abstract: 本发明提供了体外长期维持成熟肝细胞功能的培养体系和方法及应用。其中，该培养体系包含基础培养基以及与该基础培养基组合使用的培养因子，培养因子为BET抑制剂或者BET抑制剂和TEAD抑制剂的组合，BET抑制剂的浓度为0.001～5μM，TEAD抑制剂的浓度为0.01～10μM。培养方法如下：分离获得原代肝细胞后，将原代肝细胞悬液离心收集细胞沉淀，并将其悬浮于无血清的基础培养基中，而后均匀接种于Matrigel包被的培养皿中，培养基中添加上述培养因子。使用本发明的研究方法可以在体外长期维持成熟肝细胞功能的功能达7天以上，表明本研究在肝脏疾病治疗方面具有重要的应用潜能和优势。
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公开(公告)号：CN118979007A
公开(公告)日：2024-11-19
申请号：CN202410844140.0
申请日：2024-06-27
Applicant: 中国人民解放军海军军医大学
Abstract: 本发明提供了一种体外长期维持肝脏祖细胞稳定的自我更新培养体系及培养方法和应用，该培养体系包含基础培养基以及与该基础培养基组合使用的体外维持因子，其中，所述体外维持因子包括0.01‑20μM PI3K激动剂、0.1‑50μM TGFβ抑制剂、0.1‑10μMGSK‑3抑制剂、0.1‑20μM LPA、0.01‑5μM S1P。通过实验，使用本发明的研究方法可在体外维持小鼠胚胎肝脏肝脏祖细胞的稳定自我更新，小鼠肝脏祖细胞至少可以传代二十代，且培养的小鼠肝脏祖细胞具有向肝细胞和胆管上皮细胞分化的双向潜能；也可以在体外维持人胚胎干细胞来源的肝脏祖细胞的自我更新。表明本研究在肝脏疾病治疗方面具有重要的应用潜能和优势。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN118453877A
公开(公告)日：2024-08-09
申请号：CN202410505115.X
申请日：2023-08-04
Applicant: 中国人民解放军海军军医大学
IPC: A61K45/06 , A61K31/5575 , A61K31/506 , A61K31/404 , A61K31/5517 , A61K31/519 , A61K31/433 , A61P1/16
Abstract: 本发明涉及医药技术领域，提供了小分子化合物组合在制备启动肝脏原位再生药物中的应用，其中该组合为前列腺素E2的衍生物和GSK3抑制剂形成。上述方法可以有效启动正常肝脏原位细胞增殖；动物疾病模型实验结果显示，在非酒精性脂肪肝模型小鼠中，小分子化合物组合处理促进了非酒精性脂肪肝小鼠模型肝脏中原位细胞的增殖，显著提升了模型小鼠的肝重比，降低了脂肪变性和活化的肝星状细胞的比例，显著改善了肝脏的组织结构。
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公开(公告)号：CN117018195B
公开(公告)日：2024-05-21
申请号：CN202310975771.1
申请日：2023-08-04
Applicant: 中国人民解放军海军军医大学
IPC: A61K45/00 , A61K45/06 , A61K31/5575 , A61P1/16
Abstract: 本发明涉及医药技术领域，提供了小分子化合物或组合在制备启动肝脏原位再生药物中的应用，其中该小分子化合物为TLR4激动剂，组合为前列腺素E2的衍生物和GSK3抑制剂形成的第一组合或TLR4激动剂与该第一组合形成的第二组合。上述方法可以有效启动正常肝脏原位细胞增殖，其Ki67阳性的增殖细胞比例分别为11.05％±1.65％和17.41％±2.53％；动物疾病模型实验结果显示，在非酒精性脂肪肝模型小鼠中，小分子化合物组合以及TLR4激动剂的处理促进了非酒精性脂肪肝小鼠模型肝脏中原位细胞的增殖，显著提升了模型小鼠的肝重比，降低了脂肪变性和活化的肝星状细胞的比例，显著改善了肝脏的组织结构。
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公开(公告)号：CN112626023B
公开(公告)日：2023-08-04
申请号：CN202110035777.1
申请日：2021-01-12
Applicant: 中国人民解放军海军军医大学
IPC: C12N5/0797 , A61K35/30 , A61P25/00 , C12Q1/02
Abstract: 本发明涉及脊髓OLIG2+神经祖细胞诱导及自我更新培养体系、诱导方法及应用，培养体系包含基础培养基以及与之分别组合使用的诱导分化因子和体外维持因子，其中，诱导分化因子至少包括0.01‑50μM GSK3抑制剂、0.01‑500μMTGFβ抑制剂以及0.01‑500μMBMP抑制剂；体外维持因子包括0.01‑50μMGSK3抑制剂、0.01‑500μMTGFβ抑制剂、0.01‑5000ng/mL Sonic Hedgehog、0.01‑20μMSmoothened激动剂、0.01‑500ng/mLEGF家族生长因子、0.01‑500ng/mL FGF家族生长因子、0.01‑500μMBMP抑制剂、0.01‑50μMJAK1/2抑制剂、0.01‑10000nMSrc激酶抑制剂和0.01‑50μMRetinoicAcid。
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公开(公告)号：CN112626022B
公开(公告)日：2023-08-04
申请号：CN202110035057.5
申请日：2021-01-12
Applicant: 中国人民解放军海军军医大学
IPC: C12N5/0797 , C12N5/071 , C12N5/0793 , C12Q1/02 , A61K35/30 , A61P25/00
Abstract: 本发明提供了前脑神经干细胞体外诱导及长期培养体系、诱导培养方法及应用，包含基础培养基以及与其分别组合使用的诱导分化因子和体外培养因子。其中，基础培养基包括DMEM/F12液体基础培养基、0‑5×B27添加剂、0‑5×N2添加剂、1％青霉素/链霉素、0.01‑500μg/mL 2‑磷酸‑维生素C；诱导分化因子包括0.01‑500μM TGFβ抑制剂、0.01‑10000μM BMP抑制剂、0.01‑50μM Porcupine抑制剂；体外培养因子包括0.01‑10000nM Src激酶抑制剂、0.01‑500μM TGFβ抑制剂、0.01‑50μM GSK3抑制剂、0.01‑500ng/mL EGF家族生长因子、0.01‑500ng/mL FGF家族生长因子。使用该培养体系，可以在体体外诱导多能干细胞分化为前脑神经干细胞及体外长期培养，并维持稳定的前脑神经干细胞的分子表型和分化潜能。
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公开(公告)号：CN112746057A
公开(公告)日：2021-05-04
申请号：CN202110035731.X
申请日：2021-01-12
Applicant: 中国人民解放军海军军医大学
IPC: C12N5/0797 , C12N5/0735 , C12N5/10 , C12N5/0793 , C12N5/077
Abstract: 本发明涉及生物医药工程技术领域，提供了一种于体外将人多能干细胞诱导为神经中胚层祖细胞并维持自我更新的培养体系，该培养体系包括基础培养基以及添加在该基础培养基内的诱导分化因子，包括0.01‑500μMTGFβ抑制剂、0.01‑500μMBMP抑制剂、0.01‑50μMGSK3抑制剂、0.01‑500ng/mLFGF家族生长因子、0.01‑500ng/mLEGF家族生长因子。其中基础培养基包括液体基础培养基、0‑5×B27添加剂、0‑5×N2添加剂、1％青霉素/链霉素、0‑500μg/mL2‑磷酸‑维生素C。诱导方法如下：A、采用hPSCs培养基将hPSCs培养至细胞密度为50％‑70％；B、使用上述培养体系进行细胞诱导，每天半量换液，在细胞密度达到90％时按1:6进行细胞传代，传代培养时向培养体系内添加Blebbistatin，连续诱导10天以上。
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