公开(公告)号：CN112626022B

公开(公告)日：2023-08-04

申请号：CN202110035057.5

申请日：2021-01-12

Applicant: 中国人民解放军海军军医大学

Inventor： 李文林 ,  袁媛 ,  李铁军 ,  章越凡 ,  虞欣璐

IPC: C12N5/0797 ,  C12N5/071 ,  C12N5/0793 ,  C12Q1/02 ,  A61K35/30 ,  A61P25/00

Abstract: 本发明提供了前脑神经干细胞体外诱导及长期培养体系、诱导培养方法及应用，包含基础培养基以及与其分别组合使用的诱导分化因子和体外培养因子。其中，基础培养基包括DMEM/F12液体基础培养基、0‑5×B27添加剂、0‑5×N2添加剂、1％青霉素/链霉素、0.01‑500μg/mL 2‑磷酸‑维生素C；诱导分化因子包括0.01‑500μM TGFβ抑制剂、0.01‑10000μM BMP抑制剂、0.01‑50μM Porcupine抑制剂；体外培养因子包括0.01‑10000nM Src激酶抑制剂、0.01‑500μM TGFβ抑制剂、0.01‑50μM GSK3抑制剂、0.01‑500ng/mL EGF家族生长因子、0.01‑500ng/mL FGF家族生长因子。使用该培养体系，可以在体体外诱导多能干细胞分化为前脑神经干细胞及体外长期培养，并维持稳定的前脑神经干细胞的分子表型和分化潜能。

公开(公告)号：CN112626022A

公开(公告)日：2021-04-09

申请号：CN202110035057.5

申请日：2021-01-12

Applicant: 中国人民解放军海军军医大学

Inventor： 李文林 ,  袁媛 ,  李铁军 ,  章越凡 ,  虞欣璐

IPC: C12N5/0797 ,  C12N5/071 ,  C12N5/0793 ,  C12Q1/02 ,  A61K35/30 ,  A61P25/00

Abstract: 本发明提供了前脑神经干细胞体外诱导及长期培养体系、诱导培养方法及应用，包含基础培养基以及与其分别组合使用的诱导分化因子和体外培养因子。其中，基础培养基包括DMEM/F12液体基础培养基、0‑5×B27添加剂、0‑5×N2添加剂、1％青霉素/链霉素、0.01‑500μg/mL 2‑磷酸‑维生素C；诱导分化因子包括0.01‑500μM TGFβ抑制剂、0.01‑10000μM BMP抑制剂、0.01‑50μM Porcupine抑制剂；体外培养因子包括0.01‑10000nM Src激酶抑制剂、0.01‑500μM TGFβ抑制剂、0.01‑50μM GSK3抑制剂、0.01‑500ng/mL EGF家族生长因子、0.01‑500ng/mL FGF家族生长因子。使用该培养体系，可以在体体外诱导多能干细胞分化为前脑神经干细胞及体外长期培养，并维持稳定的前脑神经干细胞的分子表型和分化潜能。