公开(公告)号：CN119060937A

公开(公告)日：2024-12-03

申请号：CN202410844143.4

申请日：2024-06-27

Applicant: 中国人民解放军海军军医大学

Inventor： 李文林 ,  陆俊宇 ,  张吉芊竹 ,  梁书龙 ,  朱江波 ,  孙平新 ,  虞欣璐 ,  汪超 ,  吕竺蔓 ,  王春艳

IPC: C12N5/071 ,  C12Q1/02

Abstract: 本发明提供了体外长期维持成熟肝细胞功能的培养体系和方法及应用。其中，该培养体系包含基础培养基以及与该基础培养基组合使用的培养因子，培养因子为BET抑制剂或者BET抑制剂和TEAD抑制剂的组合，BET抑制剂的浓度为0.001～5μM，TEAD抑制剂的浓度为0.01～10μM。培养方法如下：分离获得原代肝细胞后，将原代肝细胞悬液离心收集细胞沉淀，并将其悬浮于无血清的基础培养基中，而后均匀接种于Matrigel包被的培养皿中，培养基中添加上述培养因子。使用本发明的研究方法可以在体外长期维持成熟肝细胞功能的功能达7天以上，表明本研究在肝脏疾病治疗方面具有重要的应用潜能和优势。

公开(公告)号：CN118979007A

公开(公告)日：2024-11-19

申请号：CN202410844140.0

申请日：2024-06-27

Applicant: 中国人民解放军海军军医大学

Inventor： 李文林 ,  孙平新 ,  梁书龙 ,  陆俊宇 ,  虞欣璐 ,  吕竺蔓 ,  汪超 ,  王春艳

IPC: C12N5/071 ,  C12Q1/02

Abstract: 本发明提供了一种体外长期维持肝脏祖细胞稳定的自我更新培养体系及培养方法和应用，该培养体系包含基础培养基以及与该基础培养基组合使用的体外维持因子，其中，所述体外维持因子包括0.01‑20μM PI3K激动剂、0.1‑50μM TGFβ抑制剂、0.1‑10μMGSK‑3抑制剂、0.1‑20μM LPA、0.01‑5μM S1P。通过实验，使用本发明的研究方法可在体外维持小鼠胚胎肝脏肝脏祖细胞的稳定自我更新，小鼠肝脏祖细胞至少可以传代二十代，且培养的小鼠肝脏祖细胞具有向肝细胞和胆管上皮细胞分化的双向潜能；也可以在体外维持人胚胎干细胞来源的肝脏祖细胞的自我更新。表明本研究在肝脏疾病治疗方面具有重要的应用潜能和优势。