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公开(公告)号:CN103396983A
公开(公告)日:2013-11-20
申请号:CN201310303792.5
申请日:2013-07-18
Applicant: 上海交通大学医学院附属瑞金医院
IPC: C12N5/071
Abstract: 本发明属于细胞技术领域,特别涉及一种小鼠肝脏原代细胞分离方法,以进一步培养,用于模拟肥胖和非肥胖状态下的NAFLD,来检测BBR的治疗效果。本发明提供了一种简单、经济、快速的小鼠原代肝脏细胞分离方法,适用于一般实验室的小鼠原代肝脏细胞分离以及进一步培养,为后续实验提供基础。以本发明所获得的小鼠原代肝脏细胞进行进一步培养,建立体外细胞模型,进行验证BBR在治疗非肥胖小鼠的脂肪肝方面的功效,获得了良好的效果,为验证BBR在治疗肥胖与非肥胖NAFLD方面的功效起到了积极作用,为治疗NAFLD的药物的研制提供了基础条件。
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公开(公告)号:CN103393680A
公开(公告)日:2013-11-20
申请号:CN201310303806.3
申请日:2013-07-18
Applicant: 上海交通大学医学院附属瑞金医院
IPC: A61K31/4375 , A61P1/16
Abstract: 本发明属于医药制备领域,特别涉及小檗碱在治疗非酒精性脂肪肝病药物中的应用。本发明应用了糖尿病肥胖兼NAFLD的db/db小鼠以模拟肥胖的NAFLD患者;同时应用蛋氨酸-胆碱缺乏(methionine-choline deficient,MCD)饮食造成的非肥胖脂肪肝小鼠作为模型,以模拟非肥胖的NAFLD患者,来观察BBR的功效。通过各项测试结果显示,BBR不仅能减轻肥胖小鼠的体重、改善其糖代谢与脂代谢,而且能治疗肥胖小鼠在所并发的脂肪肝,BBR在治疗非肥胖小鼠的脂肪肝方面也有显著功效,这些结果在体外模拟的细胞模型中亦得到验证,说明BBR确实在治疗肥胖与非肥胖NAFLD方面存在显著功效,可用在制备治疗NAFLD的药物中。
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公开(公告)号:CN103382454A
公开(公告)日:2013-11-06
申请号:CN201310306918.4
申请日:2013-07-18
Applicant: 上海交通大学医学院附属瑞金医院
Abstract: 本发明属于细胞技术领域,特别涉及诱导体外肝脏细胞脂肪堆积的方法,其特征在于,肝脏原代细胞、HepG2细胞系和FAO细胞系均使用含10%胎牛血清的DMEM高糖培养液培养,细胞融合至70-80%时,改用含0.02%BSA的DMEM脱血清24小时,再分别加入浓度为0.5和1mM含有5%BSA螯合的油酸/棕榈酸(oleate acid/palmitate acid,OA/PA)混合物;AML12细胞系培养:用含10%胎牛血清的1:1混合DMEM和F12培养液,并加入40ng/mL的地塞米松刺激生长,当细胞密度达到70-80%时脱血清24小时,再用MCD培养液培养24小时。本发明用一系列体外肝脏细胞模型模拟了肝脏发生脂质沉积的情形,并用BBR干预,观察其治疗效果。结果证明BBR在模拟肥胖与非肥胖NAFLD的体外实验中具有缓解脂肪肝的显著功效。
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