含不饱和脂肪酸链的神经节苷脂衍生物的制备方法及其应用

    公开(公告)号:CN108498523B

    公开(公告)日:2023-06-20

    申请号:CN201710102185.0

    申请日:2017-02-24

    Abstract: 本发明涉及到一组含有不饱和脂肪酸链的神经节苷脂衍生物在促进神经突起生长中的应用。通过鞘脂神经酰胺N‑去酰基化酶酶法合成带有不饱和脂肪酸链的神经节苷脂衍生物库,结合经典的促神经突起生长的细胞模型,发现带有不饱和脂肪酸链的神经节苷脂衍生物具有显著提高的促神经突起生长的生物学活性,且神经节苷脂鞘氨醇碱基的碳链数量的不同也对其促神经突起生长的生物学活性有显著影响。

    一种实时监测体外转录合成RNA的检测方法

    公开(公告)号:CN115896213A

    公开(公告)日:2023-04-04

    申请号:CN202211274914.8

    申请日:2022-10-18

    Abstract: 本发明公开了一种实时监测体外转录合成RNA的检测方法,属于分子生物学和转录技术领域。本发明开发了适用于体外转录的DNA模板、实时荧光转录体系,并建立一个高通量、简单、灵敏的RNA合成监测和量化系统。本发明的DNA模板/实时荧光转录体系/监测体系可以应用于合成mRNA疫苗、筛选RNA聚合酶、分析启动子强度、筛选抑制转录的药物、mRNA药物生产工艺优化,mRNA药物序列AI设计软件训练等,以及体外转录体系的优化、RNA聚合酶活性的量化、序列的优化。

    一种高效提高酶热动力学稳定性的通用策略

    公开(公告)号:CN106085975B

    公开(公告)日:2019-11-12

    申请号:CN201610428122.X

    申请日:2016-06-16

    Abstract: 本发明公开了一种高效提高酶热动力学稳定性的通用策略;该策略的具体实施路线为:以酶活性部位的催化残基为中心,根据该酶晶体结构中的B‑factor值来选择周围以内的高柔性残基为靶标位点,通过突变筛选,获得酶热动力学稳定性提高的突变体。在该策略的指导下,显著提高了结构高度复杂的褶皱假丝酵母脂肪酶1的热稳定性。结合结构上最小蛋白(LipA)和中度复杂的蛋白(CalB)的稳定性变化结果,发现距离催化残基附近的高B‑factor残基的突可以显著提高酶突变的成功率。同时,借助突变体结构‑功能关系的系统分析将为深入研究酶区域稳定化规律、发展酶稳定化技术奠定了基础。

    一组新型酯酶及其应用
    8.
    发明公开

    公开(公告)号:CN109706133A

    公开(公告)日:2019-05-03

    申请号:CN201711009481.2

    申请日:2017-10-25

    Abstract: 本发明涉及一组新型酯酶及其应用,具体地,涉及一组对布洛芬类药物具有立体选择性嗜热酯酶及其应用。本发明利用布洛芬的酯化衍生物作为筛选底物,利用微流控双色荧光筛选体系对嗜热酯酶进行多轮定向进化改造,获得了一组立体选择性显著提升的酯酶。本发明还涉及了所述酯酶在制备以布洛芬为代表的芳基丙酸类分子衍生物中的应用。

    褶皱假丝酵母脂肪酶1突变体及其基因

    公开(公告)号:CN104498450A

    公开(公告)日:2015-04-08

    申请号:CN201410804515.7

    申请日:2014-12-18

    CPC classification number: C12N9/18 C12Y301/01003

    Abstract: 本发明属于蛋白质工程技术领域,具体涉及从褶皱徦丝酵母脂肪酶1(Candida rugosa lipase1:LIP1)基因出发,选择活性中心414位点进行定点饱和突变,获得一系列突变体。本发明所述提高热稳定性的LIP1突变体能够在高温下发挥有效的催化活力,提高了在工业中的应用潜力;并且突变体在底物选择性偏向短链酰基酯,这样的LIP1突变体,结构上揭示了变化机制。

    一种高效水解鞘脂制备溶血鞘脂的方法

    公开(公告)号:CN104293843A

    公开(公告)日:2015-01-21

    申请号:CN201410508221.X

    申请日:2014-09-28

    Abstract: 本发明公开了一种高效水解鞘脂制备溶血鞘脂的方法。首先,本发明对于鞘脂神经酰胺N-去酰基化酶SCDase G8进行了改造,去除了N末端信号肽并截短了C末端,得到了高活力的SCDase G8的突变体SCDase G8-del,并针对宿主细胞对编码基因进行了密码子优化;通过蛋白表达条件的优化,提高了SCDase G8-del的可溶性表达量。在此基础上建立了一种利用SCDase G8-del高效水解鞘脂制备溶血鞘脂的方法。该方法优化了高活力的SCDase G8-del的可溶性表达条件,优化了反应体系中金属离子浓度,优化了表面活性剂的种类和浓度,提高了溶血鞘脂产率,并且优化后的反应体系对高浓度的鞘脂和不同种类的鞘脂都有较好的水解作用。

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