公开(公告)号：CN101942478A

公开(公告)日：2011-01-12

申请号：CN201010266983.5

申请日：2010-08-31

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 张大兵 ,  申慧峰 ,  梁婉琪 ,  袁政

IPC: C12N15/70 ,  C12N15/64 ,  C12N15/67

CPC classification number: C12N15/67 ,  C12N15/72

Abstract: 一种生物工程技术领域的用于外源蛋白可溶性表达的质粒及其制备和应用方法，该质粒为pET30e，其DNA序列如Seq ID No.1所示；通过将质粒模板与引物组进行PCR扩增后获得的扩增产物与pMD18-T载体连接，经转化大肠杆菌DH5α后获得大肠杆菌克隆体，将大肠杆菌克隆体作为底物进行酶切连接后将得到的产物转化大肠杆菌DH5α，获得可溶性表达质粒分子；应用方法：将获得的表达质粒分子，用热激法转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞得到重组大肠杆菌菌落，经接种培养得到菌体细胞后实现可溶性表达的提高。本发明对于帮助外源蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达具有促进作用，对进一步的分析这些蛋白的功能具有重要的意义。

公开(公告)号：CN102533835A

公开(公告)日：2012-07-04

申请号：CN201110446386.5

申请日：2010-08-31

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 张大兵 ,  梁婉琪 ,  袁政 ,  申慧峰

IPC: C12N15/70 ,  C12N15/67 ,  C12N15/64 ,  C12R1/19

Abstract: 一种生物工程技术领域的用于外源蛋白可溶性表达的质粒及其制备和应用方法，该质粒为pET30e，其DNA序列如Seq ID No.1所示；通过将质粒模板与引物组进行PCR扩增后获得的扩增产物与pMD18-T载体连接，经转化大肠杆菌DH5α后获得大肠杆菌克隆体，将大肠杆菌克隆体作为底物进行酶切连接后将得到的产物转化大肠杆菌DH5α，获得可溶性表达质粒分子；应用方法：将获得的表达质粒分子，用热激法转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞得到重组大肠杆菌菌落，经接种培养得到菌体细胞后实现可溶性表达的提高。本发明对于帮助外源蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达具有促进作用，对进一步的分析这些蛋白的功能具有重要的意义。

公开(公告)号：CN1793377A

公开(公告)日：2006-06-28

申请号：CN200510111228.9

申请日：2005-12-08

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 张大兵 ,  申慧峰 ,  梁婉琪 ,  钱炳俊 ,  袁政

IPC: C12N15/82 ,  C12N15/09

Abstract: 本发明涉及一种基因工程技术领域的在叶绿体中同时表达7个外源基因的载体构建方法。构建了一种叶绿体表达载体含有组成K88ac鞭毛蛋白基因簇的faeC、faeD、faeE、faeF、faeG、faeH、faeI七个基因序列，提取编码K88ac野生菌C83907的质粒，用核苷酸序列与SEQ ID NO：1相同的引物1和核苷酸序列与SEQ ID NO：2相同的引物2进行PCR扩增，核苷酸序列3018bp与SEQ ID NO.5相同；用核苷酸序列与SEQ ID NO：3相同的引物3和核苷酸序列与SEQ ID NO：4相同的引物4进行PCR扩增，核苷酸序列与SEQ ID NO.6相同，将其与pMD18－T载体连接，转化大肠杆菌DH5α，获得含faeCD序列的大肠杆菌克隆pTEI。对克服传统的植物遗传改良的多基因操作技术的关键缺陷，同时为生产诱导仔猪产生更为有效的抗体的植物疫苗提出了一种方法。

公开(公告)号：CN102399737B

公开(公告)日：2015-04-08

申请号：CN201110347790.7

申请日：2011-11-07

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 许煜泉 ,  申慧峰 ,  何亚文 ,  周万平

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/54 ,  C12N15/78 ,  C12P17/12 ,  A01N43/60 ,  A01P3/00 ,  C12R1/38

CPC classification number: A01N43/60 ,  C12N1/20 ,  C12N9/93 ,  C12N15/63 ,  C12P17/12 ,  C12Y603/05004 ,  Y02P20/52

Abstract: 本发明涉及一种用于生产新型微生物源杀菌剂的生物工程菌株及其应用。本发明的用于生产微生物源杀菌剂的生物工程菌株，为将phzH基因重组表达质粒转化入产吩嗪-1-羧酸的菌株后获得，所述生物工程菌株产吩嗪-1-羧酸酰胺。本发明利用现有的生产吩嗪-1-羧酸的菌株携带phzH基因重组表达质粒，实现phzH基因的高效表达,并将吩嗪-1-羧酸转化为吩嗪-1-羧酸酰胺。本发明还进一步公开了所述生物工程菌株的用途，包括由所述生物工程菌株发酵生产的微生物源杀菌剂及该微生物源杀菌剂的制备与应用。吩嗪-1-羧酸酰胺的抗菌活性不受其使用条件的酸度值影响，从而稳定其抗菌活性，能更加有效地防治作物病害。

公开(公告)号：CN102399737A

公开(公告)日：2012-04-04

申请号：CN201110347790.7

申请日：2011-11-07

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 许煜泉 ,  申慧峰 ,  何亚文 ,  周万平

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/54 ,  C12N15/78 ,  C12P17/12 ,  A01N43/60 ,  A01P3/00 ,  C12R1/38

CPC classification number: A01N43/60 ,  C12N1/20 ,  C12N9/93 ,  C12N15/63 ,  C12P17/12 ,  C12Y603/05004 ,  Y02P20/52

Abstract: 本发明涉及一种用于生产新型微生物源杀菌剂的生物工程菌株及其应用。本发明的用于生产微生物源杀菌剂的生物工程菌株，为将phzH基因重组表达质粒转化入产吩嗪-1-羧酸的菌株后获得，所述生物工程菌株产吩嗪-1-羧酸酰胺。本发明利用现有的生产吩嗪-1-羧酸的菌株携带phzH基因重组表达质粒，实现phzH基因的高效表达,并将吩嗪-1-羧酸转化为吩嗪-1-羧酸酰胺。本发明还进一步公开了所述生物工程菌株的用途，包括由所述生物工程菌株发酵生产的微生物源杀菌剂及该微生物源杀菌剂的制备与应用。吩嗪-1-羧酸酰胺的抗菌活性不受其使用条件的酸度值影响，从而稳定其抗菌活性，能更加有效地防治作物病害。