共转orca3/g10h基因提高长春花中长春花类生物碱含量的方法

    公开(公告)号:CN102703501A

    公开(公告)日:2012-10-03

    申请号:CN201210166532.3

    申请日:2012-05-24

    Abstract: 本发明涉及一种共转orca3/g10h基因提高长春花中长春花类生物碱含量的方法,所述方法包括如下步骤:克隆orca3基因和g10h基因;分别构建orca3基因和g10h基因的表达盒,然后依次将表达盒置于双元表达载体pCAMBIA2300中,构建含orca3和g10h基因的植物双元表达载体;通过冻融法转化根癌农杆菌获得工程菌;通过农杆菌介导法转化长春花并再生出植株;PCR检测基因orca3/g10h的整合情况测定转基因长春花中长春花类生物碱的含量,筛选获得生物碱类含量提高的转基因长春花植株。本发明提供了一种高产、稳定的长春花生物碱药源,有利于大规模、低成本生产长春花类生物碱。

    一种镁氢复合包衣剂、包衣种子和包衣方法

    公开(公告)号:CN117658714B

    公开(公告)日:2024-06-28

    申请号:CN202311659858.4

    申请日:2023-12-06

    Abstract: 本发明涉及一种镁氢复合包衣剂、包衣种子和包衣方法,以重量份计,镁氢复合包衣剂包括以下原料:镁基储氢材料包覆物1‑10份、包衣溶液1‑500份;镁基储氢材料包覆物为核壳结构,其内核包括镁基储氢材料,外壳包括非水溶性成膜剂;包衣溶液为包衣材料水溶液,浓度1‑5wt%;所述镁氢复合包衣剂通过将镁基储氢材料包覆物分散在包衣溶液中,蒸发水分而制得。本发明通过包覆手段、多孔负载手段,将镁、氢及多种微量元素等营养物质稳定、有效的运用到包衣技术和产品中,得到肥力集中、利用率高、成本低且可控缓释的高性能复合包衣剂,并利用所述包衣剂制备得到高质量高活性包衣种子。

    从甜叶菊中提取甜菊苷和莱鲍迪苷A的天然低共熔溶剂

    公开(公告)号:CN111777652B

    公开(公告)日:2023-07-28

    申请号:CN202010567274.4

    申请日:2020-06-19

    Abstract: 本发明公开了一种从甜叶菊中提取甜菊苷和莱鲍迪苷A的天然低共熔溶剂及其制备方法和提取方法。本发明第一方面提供了一种从甜叶菊中提取甜菊苷和莱鲍迪苷A的天然低共熔溶剂,所述溶剂由1,2‑丙二醇、甘油和水组成。本发明提供的天然低共熔溶剂与传统水提或醇提法相比,可有效提高甜叶菊中甜菊苷和莱鲍迪苷A的提取率,其中,甜菊苷的提取浓度比水提法高16.4%,比醇提法(甲醇)高25.7%;莱鲍迪苷A的提取浓度比水提法高12.6%,比醇提法(甲醇)高15.6%,对提高甜菊苷和莱鲍迪苷A的工业生产具有重要的意义。

    共转orca3/g10h基因提高长春花中长春花类生物碱含量的方法

    公开(公告)号:CN102703501B

    公开(公告)日:2015-04-01

    申请号:CN201210166532.3

    申请日:2012-05-24

    Abstract: 本发明涉及一种共转orca3/g10h基因提高长春花中长春花类生物碱含量的方法,所述方法包括如下步骤:克隆orca3基因和g10h基因;分别构建orca3基因和g10h基因的表达盒,然后依次将表达盒置于双元表达载体pCAMBIA2300中,构建含orca3和g10h基因的植物双元表达载体;通过冻融法转化根癌农杆菌获得工程菌;通过农杆菌介导法转化长春花并再生出植株;PCR检测基因orca3/g10h的整合情况测定转基因长春花中长春花类生物碱的含量,筛选获得生物碱类含量提高的转基因长春花植株。本发明提供了一种高产、稳定的长春花生物碱药源,有利于大规模、低成本生产长春花类生物碱。

    培育根癌农杆菌介导的长春花转基因植株的方法

    公开(公告)号:CN101665804B

    公开(公告)日:2012-10-17

    申请号:CN200910195775.8

    申请日:2009-09-17

    Abstract: 一种生物技术领域的培育根癌农杆菌介导的长春花转基因植株的方法,包括如下步骤:取长春花无菌苗,获取无菌苗的下胚轴;制备根癌农杆菌菌液,利用根癌农杆菌介导长春花下胚轴的转化;取下胚轴,置于愈伤组织诱导培养基上进行培养,得愈伤组织;将愈伤组织接种到分化培养基上进行培养,得绿色愈伤组织;将绿色愈伤组织接种到不定芽诱导培养基上进行培养,得不定芽;取不定芽,置入生根培养基中进行培养,得长春花转基因植株。本发明建立了稳定的根癌农杆菌介导的长春花遗传转化体系,为进一步研究代谢途径调控网络和提高TIAs的含量奠定了基础,能进一步应用到生产TIAs代谢产物的基因工程育种中。

    一种天然低共熔溶剂及其制备方法和应用于提取叶黄素

    公开(公告)号:CN114225472B

    公开(公告)日:2023-04-21

    申请号:CN202210037268.7

    申请日:2022-01-13

    Abstract: 本发明公开了一种天然低共熔溶剂及其制备方法和应用于提取叶黄素,涉及天然产物的提取领域;该天然低共熔溶剂的成分包括1,2‑丙二醇和乳酸;其制备方法为:将1,2‑丙二醇和乳酸混合,并在80℃下加热10min后得到所述天然低共熔溶剂;该天然低共熔溶剂应用于从万寿菊中提取叶黄素。本发明提供的天然低共熔溶剂来提取万寿菊中的叶黄素,与传统乙醇提取相比,可有效提高万寿菊中叶黄素的提取率,而且缓解了传统溶剂不环保的缺陷,具有无毒、易合成、生产成本低廉、生物可降解、环境友好等特点;同时,还避免了醇提法需要回收溶剂造成的工艺繁琐、用时长、不环保的缺陷。

    一种牡蒿叶肉原生质体的分离和转化方法

    公开(公告)号:CN112391333A

    公开(公告)日:2021-02-23

    申请号:CN202011334948.2

    申请日:2020-11-25

    Abstract: 本发明公开了一种牡蒿叶肉原生质体分离及瞬时转化的方法,包括以下步骤:1)选取幼嫩牡蒿叶片去除下表皮,将除去下表皮的叶片置于甘露醇溶液中浸泡;2)将于甘露醇溶液浸泡后的叶片放入牡蒿酶解液,在黑暗中抽真空,避光酶解,得到含叶肉原生质体的酶解混合液;3)洗涤酶解混合液、过滤离心得到原生质体沉淀,重悬后获得原生质体悬浮液;4)利用瞬时转化方法将携带绿色荧光蛋白GFP标签的质粒转入上述原生质体中,经过培养,使其在牡蒿原生质体中表达。本发明得到的原生质体产量为1.93×106个/g FW,活力为87.5%,获得的原生质体产量高,状态良好。该技术为开展蛋白间相互作用、亚细胞定位等研究奠定实验基础。

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