一种牡蒿叶肉原生质体的分离和转化方法

    公开(公告)号:CN112391333B

    公开(公告)日:2022-10-04

    申请号:CN202011334948.2

    申请日:2020-11-25

    Abstract: 本发明公开了一种牡蒿叶肉原生质体分离及瞬时转化的方法,包括以下步骤:1)选取幼嫩牡蒿叶片去除下表皮,将除去下表皮的叶片置于甘露醇溶液中浸泡;2)将于甘露醇溶液浸泡后的叶片放入牡蒿酶解液,在黑暗中抽真空,避光酶解,得到含叶肉原生质体的酶解混合液;3)洗涤酶解混合液、过滤离心得到原生质体沉淀,重悬后获得原生质体悬浮液;4)利用瞬时转化方法将携带绿色荧光蛋白GFP标签的质粒转入上述原生质体中,经过培养,使其在牡蒿原生质体中表达。本发明得到的原生质体产量为1.93×106个/g FW,活力为87.5%,获得的原生质体产量高,状态良好。该技术为开展蛋白间相互作用、亚细胞定位等研究奠定实验基础。

    一种收集植物叶片活体腺毛的方法

    公开(公告)号:CN113758739A

    公开(公告)日:2021-12-07

    申请号:CN202110818695.4

    申请日:2021-07-20

    Abstract: 本发明提供一种收集植物叶片活体腺毛的方法,包括如下步骤:选取成熟植物叶片,得到植物单层表皮组织,在激光显微切割系统下,切割所述植物单层表皮组织中的活体腺毛,收集得到所述活体腺毛。本发明提供一种收集植物叶片活体腺毛的方法,通过在成熟植物叶片上分离并切割活体腺毛结构,在不损伤细胞结构和不添加外源化学试剂的条件下,完整的保留并收集得到植物叶片活体腺毛,很大程度保留了活体腺毛的完整性和特异性;同时,本发明提供的方法适用于多种植物,为探索植物腺毛中次生代谢产物及其相关合成路径等研究提供了实验条件。

    一种牡蒿叶肉原生质体的分离和转化方法

    公开(公告)号:CN112391333A

    公开(公告)日:2021-02-23

    申请号:CN202011334948.2

    申请日:2020-11-25

    Abstract: 本发明公开了一种牡蒿叶肉原生质体分离及瞬时转化的方法,包括以下步骤:1)选取幼嫩牡蒿叶片去除下表皮,将除去下表皮的叶片置于甘露醇溶液中浸泡;2)将于甘露醇溶液浸泡后的叶片放入牡蒿酶解液,在黑暗中抽真空,避光酶解,得到含叶肉原生质体的酶解混合液;3)洗涤酶解混合液、过滤离心得到原生质体沉淀,重悬后获得原生质体悬浮液;4)利用瞬时转化方法将携带绿色荧光蛋白GFP标签的质粒转入上述原生质体中,经过培养,使其在牡蒿原生质体中表达。本发明得到的原生质体产量为1.93×106个/g FW,活力为87.5%,获得的原生质体产量高,状态良好。该技术为开展蛋白间相互作用、亚细胞定位等研究奠定实验基础。

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