一种青蒿WRKY类转录因子编码序列及克隆方法与应用

    公开(公告)号:CN106086038A

    公开(公告)日:2016-11-09

    申请号:CN201610682275.7

    申请日:2016-08-17

    Abstract: 本发明公开了一种青蒿WRKY基因编码序列的克隆及其应用。具体包括基因AaWRKY2的克隆、含有该基因的植物表达载体的构建、该基因对青蒿素生物合成途径特有基因启动子的激活作用。上述青蒿AaWRKY2基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,其所编码的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明还公开了AaWRKY2基因具有能够激活青蒿素生物合成途径特异的ADS和DBR2这2个基因启动子表达的特性。本发明中AaWRKY2基因可通过过量表达等应用于青蒿品质改良,可提高青蒿中青蒿素的含量。

    转AaWRKY1基因提高青蒿中青蒿素含量的方法

    公开(公告)号:CN102776225A

    公开(公告)日:2012-11-14

    申请号:CN201210249469.X

    申请日:2012-07-18

    CPC classification number: Y02A50/58

    Abstract: 本发明公开了一种转AaWRKY1基因提高青蒿中青蒿素含量的方法,包括以下步骤:从青蒿中克隆青蒿中WRKY类转录因子AaWRKY1基因;构建含AaWRKY1基因的植物表达载体;用根癌农杆菌介导,将AaWRKY1基因转入青蒿并再生出植株;PCR检测外源目的基因AaWRKY1的整合情况;高效液相色谱法及蒸发光散射检测器测定转基因青蒿中青蒿素的含量,筛选获得青蒿素含量提高的转基因青蒿植株。本发明提供的转AaWRKY1基因青蒿中青蒿素的含量达到24.59mg/g DW,其含量是非转化青蒿含量的4.44倍,从而提供了一种提高青蒿中青蒿素含量的方法,为青蒿素的规模化生产提供了高产、稳定的新药源。

    高青蒿素含量转基因青蒿植株的生产方法

    公开(公告)号:CN102776212A

    公开(公告)日:2012-11-14

    申请号:CN201110430810.7

    申请日:2011-12-20

    Abstract: 本发明涉及一种生物技术领域的高青蒿素含量转基因青蒿植株的生产方法,包括如下步骤:从青蒿中克隆ADS,CYP71AV1和CPR三个基因,构建含ADS,CYP71AV1和CPR三基因的植物表达载体,用根癌农杆菌介导,将ADS,CYP71AV1和CPR三基因转入青蒿并再生出植株,筛选,获得青蒿素含量提高的转基因青蒿植株。在非转化普通青蒿含量为6.43mg/g DW时,本发明得到的转基因青蒿株系中青蒿素的含量最高达到15.09mg/g DW,其含量是非转化青蒿含量的2.35倍,本发明的方法对于为青蒿素的规模化生产提供高产、稳定新药源具有重要意义。

    AaORA基因启动子及其用途

    公开(公告)号:CN102925441B

    公开(公告)日:2014-06-18

    申请号:CN201210384850.7

    申请日:2012-10-11

    Abstract: 本发明涉及一种AaORA基因启动子,所述启动子的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.1所示;同时本发明还涉及前述AaORA基因启动子在利用植物腺毛组织表达和生产代谢产物的基因工程育种中的用途。本发明提供的启动子能引导基因在植物腺毛中特异表达,由于腺毛特异表达的启动子对植物的腺毛系统进行遗传操作,不会对植物的生长发育造成危害,本发明对利用植物腺毛组织表达和生产代谢产物的基因工程育种具有重要意义。

    转AOC基因提高青蒿中青蒿素含量的方法

    公开(公告)号:CN102242145A

    公开(公告)日:2011-11-16

    申请号:CN201110099411.7

    申请日:2011-04-20

    Abstract: 本发明是一种生物技术领域的转AOC基因提高青蒿中青蒿素含量的方法。本发明从青蒿中克隆丙二烯氧化环化酶AOC基因,构建含AOC基因的植物表达载体,用根癌农杆菌介导,将AOC基因转入青蒿并再生出植株,PCR检测外源目的基因AOC的整合情况,高效液相色谱法及蒸发光散射检测器测定转基因青蒿中青蒿素的含量,筛选获得青蒿素含量提高的转基因青蒿植株。本发明获得的转基因青蒿中青蒿素的含量显著提高,在非转化普通青蒿含量为1.53mg/g DW时,同时期转AOC基因青蒿中青蒿素的含量最高达到10.17mg/g DW,其含量是非转化青蒿含量的6.65倍,从而提供了一种提高青蒿中青蒿素含量的方法,为利用转基因青蒿大规模生产青蒿素打下了基础。

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