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公开(公告)号：CN106957830B
公开(公告)日：2020-12-25
申请号：CN201710343377.0
申请日：2017-05-16
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种Cas9核酸酶及用途。本发明的Cas9核酸酶（Cas9‑∆F916），具有Cas9核酸酶活性，适用于CRISPR/Cas9系统，所述Cas9核酸酶（Cas9‑∆F916）是将野生型Cas9核酸酶第916位的苯丙氨酸删除后获得。采用所述Cas9核酸酶（Cas9‑∆F916）对DNA双链进行切割可产生突出断裂末端，以补平连接的方式可加入与突出断裂末端互补的碱基，能够实现对基因组DNA片段的特定位置的精准编辑。
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公开(公告)号：CN107012250A
公开(公告)日：2017-08-04
申请号：CN201710344514.2
申请日：2017-05-16
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种适用于CRISPR/Cas9系统的基因组DNA片段编辑精准度的分析方法及其应用。本发明所述分析方法将Cas9核酸酶对基因组DNA双链进行切割的方式区分为钝末端切割与突出末端切割，钝末端切割方式对应的切割末端占比为钝断裂末端占比，突出末端切割方式对应的切割末端占比为突出断裂末端占比，通过预测候选sgRNA组合在每种切割方式下对应的断裂末端序列，并结合所述钝断裂末端占比与突出断裂末端占比，来预测采用候选sgRNA组合及选用的Cas9核酸酶对基因组DNA片段编辑的精准度。采用所述分析法可先对编辑方法进行精准度预测，能够略去繁杂的实验，从而提高实验效率。
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公开(公告)号：CN118048343A
公开(公告)日：2024-05-17
申请号：CN202410236233.5
申请日：2024-03-01
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明涉及生物技术领域，特别是涉及一种Cas9核酸酶及其制备方法和用途。本发明提供的Cas9核酸酶包含野生型Cas9核酸酶在第915位和/或第976位发生一种或多种氨基酸突变所形成的多肽；所述野生型Cas9核酸酶的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明提供中Cas9核酸酶(DE Cas9)与野生型Cas9核酸酶相比，采用DE Cas9对DNA双链进行切割可产生更大比例的DNA缺失(deletion)，更少比例DNA插入(insertion)，能够改变Cas9核酸酶DNA编辑和修复结果。
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公开(公告)号：CN118048343B
公开(公告)日：2025-01-28
申请号：CN202410236233.5
申请日：2024-03-01
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明涉及生物技术领域，特别是涉及一种Cas9核酸酶及其制备方法和用途。本发明提供的Cas9核酸酶包含野生型Cas9核酸酶在第915位和/或第976位发生一种或多种氨基酸突变所形成的多肽；所述野生型Cas9核酸酶的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明提供中Cas9核酸酶(DE Cas9)与野生型Cas9核酸酶相比，采用DE Cas9对DNA双链进行切割可产生更大比例的DNA缺失(deletion)，更少比例DNA插入(insertion)，能够改变Cas9核酸酶DNA编辑和修复结果。
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公开(公告)号：CN118048344A
公开(公告)日：2024-05-17
申请号：CN202410236261.7
申请日：2024-03-01
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明涉及生物技术领域，特别是涉及一种核酸酶及其制备方法和用途。本发明提供的核酸酶包含野生型Cas9核酸酶在第766位、第915位或第916位发生一种或多种氨基酸突变所形成的多肽；所述野生型Cas9核酸酶的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明中的核酸酶同野生型Cas9核酸酶相比，对目的基因组DNA片段进行切割时产生的突出断裂末端及钝断裂末端的比例相对于野生型Cas9核酸酶不同，以此本发明能实现更高效率且精准的单核苷酸插入。采用本发明中的核酸酶对DNA双链进行切割可产生突出断裂末端，通过细胞自身修复系统以补平连接的方式可加入与突出断裂末端互补的碱基，能够实现对基因组DNA片段的特定位置加入特定碱基的精准编辑。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN106967697B
公开(公告)日：2021-03-26
申请号：CN201710344429.6
申请日：2017-05-16
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种Cas9核酸酶及用途。本发明的Cas9核酸酶（Cas9‑G915F），具有Cas9核酸酶活性，适用于CRISPR/Cas9系统，所述Cas9核酸酶（Cas9‑G915F）是将野生型Cas9核酸酶第915位的甘氨酸突变成苯丙氨酸获得。采用所述Cas9核酸酶（Cas9‑G915F）对DNA双链进行切割可产生突出断裂末端，以补平连接的方式可加入与突出断裂末端互补的碱基，能够实现对基因组DNA片段的特定位置的精准编辑。
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公开(公告)号：CN107119077A
公开(公告)日：2017-09-01
申请号：CN201710345545.X
申请日：2017-05-16
Applicant: 上海交通大学
CPC classification number: C12N15/902 , C12N9/22 , C12N15/102 , C12N15/907
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及CtIP抑制剂的新用途及一种精准的基因组DNA片段编辑方法。本发明经过广泛而深入的研究发现，抑制CtIP的表达，能够提高基因组DNA片段编辑后连接接头的精准连接效率，提高基因组DNA片段编辑后连接接头的精准连接比例，从而实现精准的基因组DNA片段编辑。
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公开(公告)号：CN106987570A
公开(公告)日：2017-07-28
申请号：CN201710343400.6
申请日：2017-05-16
Applicant: 上海交通大学
IPC: C12N9/22 , C12N15/55 , C12N15/113 , C12N15/63
CPC classification number: C12N9/22 , C12N15/113 , C12N15/63 , C12N2310/10 , C12N2800/80
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种Cas9核酸酶及用途。本发明的Cas9核酸酶（Cas9‑R780A），具有Cas9核酸酶活性，适用于CRISPR/Cas9系统，所述Cas9核酸酶（Cas9‑R780A）是将野生型Cas9核酸酶第780位精氨酸突变成丙氨酸获得。采用所述Cas9核酸酶（Cas9‑R780A）对DNA双链进行切割可产生突出断裂末端，以补平连接的方式可加入与突出断裂末端互补的碱基，能够实现对基因组DNA片段的特定位置的精准编辑。
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公开(公告)号：CN106939303B
公开(公告)日：2021-02-23
申请号：CN201710343933.4
申请日：2017-05-16
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种Cas9核酸酶及用途。本发明的Cas9核酸酶（Cas9‑R919P），具有Cas9核酸酶活性，适用于CRISPR/Cas9系统，所述Cas9核酸酶（Cas9‑R919P）是将野生型Cas9核酸酶第919位精氨酸突变成脯氨酸获得。采用所述Cas9核酸酶（Cas9‑R919P）对DNA双链进行切割可产生突出断裂末端，以补平连接的方式可加入与突出断裂末端互补的碱基，能够实现对基因组DNA片段的特定位置的精准编辑。
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