一种Cas9核酸酶ΔF916及其用途

    公开(公告)号:CN106957830B

    公开(公告)日:2020-12-25

    申请号:CN201710343377.0

    申请日:2017-05-16

    Inventor: 吴强 李金环 寿佳

    Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种Cas9核酸酶及用途。本发明的Cas9核酸酶(Cas9‑∆F916),具有Cas9核酸酶活性,适用于CRISPR/Cas9系统,所述Cas9核酸酶(Cas9‑∆F916)是将野生型Cas9核酸酶第916位的苯丙氨酸删除后获得。采用所述Cas9核酸酶(Cas9‑∆F916)对DNA双链进行切割可产生突出断裂末端,以补平连接的方式可加入与突出断裂末端互补的碱基,能够实现对基因组DNA片段的特定位置的精准编辑。

    一种适用于CRISPR/Cas9系统的基因组DNA片段编辑精准度的分析方法及应用

    公开(公告)号:CN107012250A

    公开(公告)日:2017-08-04

    申请号:CN201710344514.2

    申请日:2017-05-16

    Inventor: 吴强 李金环 寿佳

    Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种适用于CRISPR/Cas9系统的基因组DNA片段编辑精准度的分析方法及其应用。本发明所述分析方法将Cas9核酸酶对基因组DNA双链进行切割的方式区分为钝末端切割与突出末端切割,钝末端切割方式对应的切割末端占比为钝断裂末端占比,突出末端切割方式对应的切割末端占比为突出断裂末端占比,通过预测候选sgRNA组合在每种切割方式下对应的断裂末端序列,并结合所述钝断裂末端占比与突出断裂末端占比,来预测采用候选sgRNA组合及选用的Cas9核酸酶对基因组DNA片段编辑的精准度。采用所述分析法可先对编辑方法进行精准度预测,能够略去繁杂的实验,从而提高实验效率。

    一种Cas9核酸酶G915F及其用途

    公开(公告)号:CN106967697B

    公开(公告)日:2021-03-26

    申请号:CN201710344429.6

    申请日:2017-05-16

    Inventor: 吴强 李金环 寿佳

    Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种Cas9核酸酶及用途。本发明的Cas9核酸酶(Cas9‑G915F),具有Cas9核酸酶活性,适用于CRISPR/Cas9系统,所述Cas9核酸酶(Cas9‑G915F)是将野生型Cas9核酸酶第915位的甘氨酸突变成苯丙氨酸获得。采用所述Cas9核酸酶(Cas9‑G915F)对DNA双链进行切割可产生突出断裂末端,以补平连接的方式可加入与突出断裂末端互补的碱基,能够实现对基因组DNA片段的特定位置的精准编辑。

    一种Cas9核酸酶R780A及其用途
    5.
    发明公开

    公开(公告)号:CN106987570A

    公开(公告)日:2017-07-28

    申请号:CN201710343400.6

    申请日:2017-05-16

    Inventor: 吴强 李金环 寿佳

    Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种Cas9核酸酶及用途。本发明的Cas9核酸酶(Cas9‑R780A),具有Cas9核酸酶活性,适用于CRISPR/Cas9系统,所述Cas9核酸酶(Cas9‑R780A)是将野生型Cas9核酸酶第780位精氨酸突变成丙氨酸获得。采用所述Cas9核酸酶(Cas9‑R780A)对DNA双链进行切割可产生突出断裂末端,以补平连接的方式可加入与突出断裂末端互补的碱基,能够实现对基因组DNA片段的特定位置的精准编辑。

    一种Cas9核酸酶K918A及其用途

    公开(公告)号:CN106957831B

    公开(公告)日:2021-03-12

    申请号:CN201710343397.8

    申请日:2017-05-16

    Inventor: 吴强 李金环 寿佳

    Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种Cas9核酸酶及用途。本发明的Cas9核酸酶(Cas9‑K918A),具有Cas9核酸酶活性,适用于CRISPR/Cas9系统,所述Cas9核酸酶(Cas9‑K918A)是将野生型Cas9核酸酶第918位赖氨酸突变成丙氨酸获得。采用所述Cas9核酸酶(Cas9‑K918A)对DNA双链进行切割可产生突出断裂末端,以补平连接的方式可加入与突出断裂末端互补的碱基,能够实现对基因组DNA片段的特定位置的精准编辑。

    一种Cas9核酸酶F916P及其用途
    7.
    发明公开

    公开(公告)号:CN106987571A

    公开(公告)日:2017-07-28

    申请号:CN201710344461.4

    申请日:2017-05-16

    Inventor: 吴强 李金环 寿佳

    Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种Cas9核酸酶及用途。本发明的Cas9核酸酶(Cas9‑F916P),具有Cas9核酸酶活性,适用于CRISPR/Cas9系统,所述Cas9核酸酶(Cas9‑F916P)是将野生型Cas9核酸酶第第916位苯丙氨酸突变成脯氨酸获得。采用所述Cas9核酸酶(Cas9‑F916P)对DNA双链进行切割可产生突出断裂末端,以补平连接的方式可加入与突出断裂末端互补的碱基,能够实现对基因组DNA片段的特定位置的精准编辑。

    一种Cas9核酸酶ΔF916及其用途

    公开(公告)号:CN106957830A

    公开(公告)日:2017-07-18

    申请号:CN201710343377.0

    申请日:2017-05-16

    Inventor: 吴强 李金环 寿佳

    Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种Cas9核酸酶及用途。本发明的Cas9核酸酶(Cas9‑∆F916),具有Cas9核酸酶活性,适用于CRISPR/Cas9系统,所述Cas9核酸酶(Cas9‑∆F916)是将野生型Cas9核酸酶第916位的苯丙氨酸删除后获得。采用所述Cas9核酸酶(Cas9‑∆F916)对DNA双链进行切割可产生突出断裂末端,以补平连接的方式可加入与突出断裂末端互补的碱基,能够实现对基因组DNA片段的特定位置的精准编辑。

    一种Cas9核酸酶Q920P及其用途

    公开(公告)号:CN106947750A

    公开(公告)日:2017-07-14

    申请号:CN201710347002.1

    申请日:2017-05-16

    Inventor: 吴强 李金环 寿佳

    Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种Cas9核酸酶及用途。本发明的Cas9核酸酶(Cas9‑Q920P),具有Cas9核酸酶活性,适用于CRISPR/Cas9系统,所述Cas9核酸酶(Cas9‑Q920P)是将野生型Cas9核酸酶第920位谷氨酰胺突变成脯氨酸获得。采用所述Cas9核酸酶(Cas9‑Q920P)对DNA双链进行切割可产生突出断裂末端,以补平连接的方式可加入与突出断裂末端互补的碱基,能够实现对基因组DNA片段的特定位置的精准编辑。

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