一种制备长单链DNA的方法
    1.
    发明公开

    公开(公告)号:CN118879682A

    公开(公告)日:2024-11-01

    申请号:CN202410948069.0

    申请日:2024-07-16

    Abstract: 本发明属于生物技术领域,涉及一种制备长单链DNA的方法,该方法以双链线型DNA分子作为模板,在其中一条单链上设计特异性切割位点,Cas9n ickase蛋白对特异性切割位点进行识别并造成其中一条单链上的切刻,与变性剂进行尿素热变性并立即进行琼脂糖凝胶电泳分离长单链DNA,电洗脱凝胶中的长单链DNA,正丁醇浓缩电洗脱液,透析浓缩液回收得到指定长度的长单链DNA;本发明通过任意序列和长度的线型双链DNA获得长度可定制的单链DNA,无序列和长度限制,无需PCR,无需核酸外切酶反应或逆转录不会产生内部或末端的变异和缺失,可以获得含有正确序列的大于10kb长片段单链DNA,方法简单高效,具有广泛应用前景。

    基于DNA凝聚体的可编程双连续材料及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN119709731A

    公开(公告)日:2025-03-28

    申请号:CN202411777422.X

    申请日:2024-12-05

    Abstract: 本发明属于纳米材料技术领域,涉及基于DNA凝聚体的可编程双连续材料及其制备方法和应用,所述可编程双连续材料是由双链DNA结构桥接DNA液滴A和DNA液滴B形成的;双链DNA结构的中间具有18bp的双链结构,两端具有粘性末端;DNA液滴A和DNA液滴B均具有Y型DNA纳米结构,且Y型DNA纳米结构具有双链茎结构和粘性末端;DNA液滴A和DNA液滴B均是由三条单链DNA互补杂交形成的,且每条单链DNA的中间具有两个未配对的间隔碱基,两端为粘性末端;本发明提供的可编程双连续材料具有良好的热稳定性,流动性、渗透性、均匀性以及高度可控性,且能在一个小时内完成所有反应步骤。

    一种快速组装金纳米棒和聚腺嘌呤DNA的方法

    公开(公告)号:CN118064423A

    公开(公告)日:2024-05-24

    申请号:CN202410160744.3

    申请日:2024-02-04

    Inventor: 张欢 张宏陆 陈旭

    Abstract: 本发明涉及一种快速组装金纳米棒和聚腺嘌呤DNA的方法,所述方法包括以下步骤:在CTAB存在下,通过一步还原的方法合成有CTAB双分子层稳定的金纳米棒;准备聚腺嘌呤DNA溶液;将DNA溶液与CTAB修饰的金纳米棒混合,加入盐溶液后丁醇脱水;加入0.5xTBE将底部固溶体重悬,去除上清液;加入超纯水后通过离心洗涤,去除游离的DNA,从而获得金纳米棒与聚腺嘌呤DNA的组装体DNA‑AuNR;本发明通过正丁醇快速去除金纳米棒和DNA混合物中的水分子,促进金纳米棒与核酸分子亲和基团的吸附,实现了金纳米棒和聚腺嘌呤DNA的快速组装,是一种简单、快速、成本效益和普适性更佳的组装策略。

    一种制备金属液滴的方法

    公开(公告)号:CN118045997A

    公开(公告)日:2024-05-17

    申请号:CN202410184438.3

    申请日:2024-02-19

    Abstract: 本发明涉及一种制备金属液滴的方法,所述的制备方法通过在金纳米颗粒上组装的具有回文序列的十字形DNA纳米结构,在盐溶液中回文序列的粘性末端自缔合,将金纳米颗粒组装成微米尺寸的金属液滴,并且所制备的金属液滴表现出类似液相的性质,具有优异的流动性。

    一种基于CRISPR技术的eccDNA快速检测方法

    公开(公告)号:CN118792388B

    公开(公告)日:2025-04-01

    申请号:CN202411108406.1

    申请日:2024-08-13

    Abstract: 本发明属于生物技术领域,涉及一种基于CRISPR技术的eccDNA快速检测方法,所述方法使用CRISPR‑Cas9系统靶向包含目标序列的eccDNA,在靶位点的切口处进行单链DNA探针辅助的酶修饰之后,直接在恒温下对目标eccDNA开启滚环扩增,再使用CRISPR‑Cas14系统靶向结合单链状态的滚环扩增产物,激发Cas14的反式切割活性,实现对信号的二次放大;本发明由于在检测过程中存在多步特异性识别与信号放大过程,在对eccDNA进行检测前,不需要对基因组内存在的线性DNA进行消化,显著缩短了染色体外环状DNA的检测时间,降低了检测成本,能实现1fM水平的检测限,能成功在肿瘤细胞中检测到携带肿瘤疾病相关基因片段的eccDNA。

    一种制备金属液滴的方法

    公开(公告)号:CN118045997B

    公开(公告)日:2025-01-21

    申请号:CN202410184438.3

    申请日:2024-02-19

    Abstract: 本发明涉及一种制备金属液滴的方法,所述的制备方法通过在金纳米颗粒上组装的具有回文序列的十字形DNA纳米结构,在盐溶液中回文序列的粘性末端自缔合,将金纳米颗粒组装成微米尺寸的金属液滴,并且所制备的金属液滴表现出类似液相的性质,具有优异的流动性。

    一种基于CRISPR技术的eccDNA快速检测方法

    公开(公告)号:CN118792388A

    公开(公告)日:2024-10-18

    申请号:CN202411108406.1

    申请日:2024-08-13

    Abstract: 本发明属于生物技术领域,涉及一种基于CRISPR技术的eccDNA快速检测方法,所述方法使用CRISPR‑Cas9系统靶向包含目标序列的eccDNA,在靶位点的切口处进行单链DNA探针辅助的酶修饰之后,直接在恒温下对目标eccDNA开启滚环扩增,再使用CRISPR‑Cas14系统靶向结合单链状态的滚环扩增产物,激发Cas14的反式切割活性,实现对信号的二次放大;本发明由于在检测过程中存在多步特异性识别与信号放大过程,在对eccDNA进行检测前,不需要对基因组内存在的线性DNA进行消化,显著缩短了染色体外环状DNA的检测时间,降低了检测成本,能实现1fM水平的检测限,能成功在肿瘤细胞中检测到携带肿瘤疾病相关基因片段的eccDNA。

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