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公开(公告)号：CN118879682A
公开(公告)日：2024-11-01
申请号：CN202410948069.0
申请日：2024-07-16
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域，涉及一种制备长单链DNA的方法，该方法以双链线型DNA分子作为模板，在其中一条单链上设计特异性切割位点，Cas9n ickase蛋白对特异性切割位点进行识别并造成其中一条单链上的切刻，与变性剂进行尿素热变性并立即进行琼脂糖凝胶电泳分离长单链DNA，电洗脱凝胶中的长单链DNA，正丁醇浓缩电洗脱液，透析浓缩液回收得到指定长度的长单链DNA；本发明通过任意序列和长度的线型双链DNA获得长度可定制的单链DNA，无序列和长度限制，无需PCR，无需核酸外切酶反应或逆转录不会产生内部或末端的变异和缺失，可以获得含有正确序列的大于10kb长片段单链DNA，方法简单高效，具有广泛应用前景。
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