公开(公告)号：CN106928315B

公开(公告)日：2020-09-25

申请号：CN201710223110.8

申请日：2017-04-07

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 肖华 ,  尚志 ,  曹成喜 ,  樊柳荫 ,  张岩

IPC: C07K1/14

Abstract: 一种基于氧化石墨烯的核酸结合蛋白提取方法，属于新型蛋白富集技术领域。本发明通过将待测细胞加入含有氧化石墨烯的细胞裂解液中进行裂解，核酸以及核酸结合蛋白会被氧化石墨烯所吸附，形成氧化石墨烯‑核酸‑核酸结合蛋白复合物。离心收集复合物并将其重悬于蛋白变性液中并超声处理，最后收集上清液中的核酸结合蛋白即可。本发明成本低，操作简单，提取过程不到1分钟，可以简单高效的提取核酸结合蛋白，对于核酸结合蛋白质谱研究具有重要意义。

公开(公告)号：CN106928315A

公开(公告)日：2017-07-07

申请号：CN201710223110.8

申请日：2017-04-07

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 肖华 ,  尚志 ,  曹成喜 ,  樊柳荫 ,  张岩

IPC: C07K1/14

Abstract: 一种基于氧化石墨烯的核酸结合蛋白提取方法，属于新型蛋白富集技术领域。本发明通过将待测细胞加入含有氧化石墨烯的细胞裂解液中进行裂解，核酸以及核酸结合蛋白会被氧化石墨烯所吸附，形成氧化石墨烯‑核酸‑核酸结合蛋白复合物。离心收集复合物并将其重悬于蛋白变性液中并超声处理，最后收集上清液中的核酸结合蛋白即可。本发明成本低，操作简单，提取过程不到1分钟，可以简单高效的提取核酸结合蛋白，对于核酸结合蛋白质谱研究具有重要意义。

公开(公告)号：CN105675774B

公开(公告)日：2018-10-23

申请号：CN201610035433.X

申请日：2016-01-19

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 肖华 ,  孙妍 ,  夏志军 ,  尚志 ,  孙凯博 ,  曹成喜 ,  樊柳荫

IPC: G01N30/14

Abstract: 本发明公开了一种唾液外泌体的制备方法及其在分子诊断中的应用；包括以下步骤：从唾液样品中去除高丰度蛋白，滤去黏蛋白，分离提取外泌体，对所得外泌体进行表征，提取外泌体蛋白，对蛋白进行鉴定，并应用与肺癌生物标志物的发现。目前尚没有规范化的唾液外泌体制备技术，现有制备技术存在高丰度蛋白干扰和背景杂质干扰，导致外泌体回收率低、鉴定蛋白少等不足，难以反映真实的外泌体蛋白组学信息。本发明以成人健康志愿者和肺癌患者的唾液为样本，采用亲和层析色谱和膜分离结合技术，在去除了唾液的高丰度蛋白和黏蛋白后，通过离心提取唾液中的外泌体，并对其蛋白组进行分析，鉴定到了更多的外泌体蛋白。

公开(公告)号：CN105675774A

公开(公告)日：2016-06-15

申请号：CN201610035433.X

申请日：2016-01-19

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 肖华 ,  孙妍 ,  夏志军 ,  尚志 ,  孙凯博 ,  曹成喜 ,  樊柳荫

IPC: G01N30/14

CPC classification number: G01N30/14 ,  G01N2030/146

Abstract: 本发明公开了一种唾液外泌体的制备方法及其在分子诊断中的应用；包括以下步骤：从唾液样品中去除高丰度蛋白，滤去黏蛋白，分离提取外泌体，对所得外泌体进行表征，提取外泌体蛋白，对蛋白进行鉴定，并应用与肺癌生物标志物的发现。目前尚没有规范化的唾液外泌体制备技术，现有制备技术存在高丰度蛋白干扰和背景杂质干扰，导致外泌体回收率低、鉴定蛋白少等不足，难以反映真实的外泌体蛋白组学信息。本发明以成人健康志愿者和肺癌患者的唾液为样本，采用亲和层析色谱和膜分离结合技术，在去除了唾液的高丰度蛋白和黏蛋白后，通过离心提取唾液中的外泌体，并对其蛋白组进行分析，鉴定到了更多的外泌体蛋白。