公开(公告)号：CN113355366A

公开(公告)日：2021-09-07

申请号：CN202110496774.8

申请日：2021-05-07

Applicant: 三峡大学

Inventor： 龚大春 ,  万里 ,  张书银 ,  王德林 ,  叶顺 ,  陈孟军 ,  宋婷 ,  吕育财 ,  任立伟

IPC: C12P7/22 ,  C12N9/04

Abstract: 本发明涉及属于基因工程和酶工程领域，本发明利用基因工程和定点突变的方法，将来源于近平滑假丝酵母（保藏号ATCC7330）的羰基还原酶进行表达，并开展定点突变，获得羰基还原酶的酶活力提高6倍的突变体A121N，为利用羰基还原酶或其突变体酶还原苯乙醛制备2‑苯乙醇提供了酶源。在此基础上，本发明以苯乙醛为原料，利用葡萄糖脱氢酶与羰基还原酶耦合，原位再生辅酶NADPH，催化反应后采用超滤设备分离浓缩回收酶，可以实现酶回收5次以上，极大降低2‑苯乙醇的制备成本，在优化工艺下，管式反应转化率达到90%以上，间歇式反应转化率可达到80%以上。

公开(公告)号：CN113355366B

公开(公告)日：2022-12-20

申请号：CN202110496774.8

申请日：2021-05-07

Applicant: 三峡大学

Inventor： 龚大春 ,  万里 ,  张书银 ,  王德林 ,  叶顺 ,  陈孟军 ,  宋婷 ,  吕育财 ,  任立伟

IPC: C12P7/22 ,  C12N9/04

Abstract: 本发明涉及属于基因工程和酶工程领域，本发明利用基因工程和定点突变的方法，将来源于近平滑假丝酵母（保藏号ATCC7330）的羰基还原酶进行表达，并开展定点突变，获得羰基还原酶的酶活力提高6倍的突变体A121N，为利用羰基还原酶或其突变体酶还原苯乙醛制备2‑苯乙醇提供了酶源。在此基础上，本发明以苯乙醛为原料，利用葡萄糖脱氢酶与羰基还原酶耦合，原位再生辅酶NADPH，催化反应后采用超滤设备分离浓缩回收酶，可以实现酶回收5次以上，极大降低2‑苯乙醇的制备成本，在优化工艺下，管式反应转化率达到90%以上，间歇式反应转化率可达到80%以上。