公开(公告)号：CN113265431B

公开(公告)日：2022-05-20

申请号：CN202110496791.1

申请日：2021-05-07

Applicant: 三峡大学

Inventor： 龚大春 ,  张书银 ,  肖开兴 ,  万里 ,  宋婷 ,  杨潇 ,  任立伟 ,  郭金玲

IPC: C12P7/42

Abstract: 本发明提供了一种多酶级联催化合成对香豆酸的方法。以对羟基苯丙酮酸为原料，经过羰基还原酶还原为对羟基苯基乳酸，然后通过脱水酶制备对香豆酸。本方法可以在管式反应器‑膜分离耦合装置中进行连续化生产，也可以在间歇反应釜法，羰基还原酶所需要的辅酶NAD(P)H通过葡萄糖脱氢酶和葡萄糖反应再生。每批羰基还原酶、葡萄糖脱氢酶、脱水酶均可回收利用5次以上，生产效率最高可达到50 g/L.h。本发明生产成本低、效率高、产品纯度好。

公开(公告)号：CN113355366A

公开(公告)日：2021-09-07

申请号：CN202110496774.8

申请日：2021-05-07

Applicant: 三峡大学

Inventor： 龚大春 ,  万里 ,  张书银 ,  王德林 ,  叶顺 ,  陈孟军 ,  宋婷 ,  吕育财 ,  任立伟

IPC: C12P7/22 ,  C12N9/04

Abstract: 本发明涉及属于基因工程和酶工程领域，本发明利用基因工程和定点突变的方法，将来源于近平滑假丝酵母（保藏号ATCC7330）的羰基还原酶进行表达，并开展定点突变，获得羰基还原酶的酶活力提高6倍的突变体A121N，为利用羰基还原酶或其突变体酶还原苯乙醛制备2‑苯乙醇提供了酶源。在此基础上，本发明以苯乙醛为原料，利用葡萄糖脱氢酶与羰基还原酶耦合，原位再生辅酶NADPH，催化反应后采用超滤设备分离浓缩回收酶，可以实现酶回收5次以上，极大降低2‑苯乙醇的制备成本，在优化工艺下，管式反应转化率达到90%以上，间歇式反应转化率可达到80%以上。

公开(公告)号：CN113355366B

公开(公告)日：2022-12-20

申请号：CN202110496774.8

申请日：2021-05-07

Applicant: 三峡大学

Inventor： 龚大春 ,  万里 ,  张书银 ,  王德林 ,  叶顺 ,  陈孟军 ,  宋婷 ,  吕育财 ,  任立伟

IPC: C12P7/22 ,  C12N9/04

Abstract: 本发明涉及属于基因工程和酶工程领域，本发明利用基因工程和定点突变的方法，将来源于近平滑假丝酵母（保藏号ATCC7330）的羰基还原酶进行表达，并开展定点突变，获得羰基还原酶的酶活力提高6倍的突变体A121N，为利用羰基还原酶或其突变体酶还原苯乙醛制备2‑苯乙醇提供了酶源。在此基础上，本发明以苯乙醛为原料，利用葡萄糖脱氢酶与羰基还原酶耦合，原位再生辅酶NADPH，催化反应后采用超滤设备分离浓缩回收酶，可以实现酶回收5次以上，极大降低2‑苯乙醇的制备成本，在优化工艺下，管式反应转化率达到90%以上，间歇式反应转化率可达到80%以上。

公开(公告)号：CN113265431A

公开(公告)日：2021-08-17

申请号：CN202110496791.1

申请日：2021-05-07

Applicant: 三峡大学

Inventor： 龚大春 ,  张书银 ,  肖开兴 ,  万里 ,  宋婷 ,  杨潇 ,  任立伟 ,  郭金玲

IPC: C12P7/42

Abstract: 本发明提供了一种多酶级联催化合成对香豆酸的方法。以对羟基苯丙酮酸为原料，经过羰基还原酶还原为对羟基苯基乳酸，然后通过脱水酶制备对香豆酸。本方法可以在管式反应器‑膜分离耦合装置中进行连续化生产，也可以在间歇反应釜法，羰基还原酶所需要的辅酶NAD(P)H通过葡萄糖脱氢酶和葡萄糖反应再生。每批羰基还原酶、葡萄糖脱氢酶、脱水酶均可回收利用5次以上，生产效率最高可达到50 g/L.h。本发明生产成本低、效率高、产品纯度好。

公开(公告)号：CN113088443A

公开(公告)日：2021-07-09

申请号：CN202110264566.5

申请日：2021-03-11

Applicant: 三峡大学

Inventor： 龚大春 ,  王德林 ,  张书银 ,  饶振辉 ,  杨潇

IPC: C12M1/40 ,  C12M1/38 ,  C12M1/12 ,  C12M1/02 ,  C12M1/00 ,  C12P17/02 ,  C12P13/00

Abstract: 一种多酶级联反应分离耦合系统，包括反应器，反应器上设有输入管道，输入管道上设有文丘里预混合器，输入管道的输入端连接原料罐与酶液罐上，反应器一端设有输出管道，输出管道连接至超滤系统上，超滤系统中设有超透膜，超透膜与输出管道之间的超滤系统上设有回收酶总管，回收酶总管连接至文丘里预混合器上；超透膜与远离输出管道的超滤系统一端之间上设有透过液输出管，透过液输出管连接至另一反应器上，透过液输出管上也设有文丘里预混合器，透过液输出管上的文丘里预混合器上还通过管道与二次反应酶液罐连接。本发明专利采用上述结构及方法，依靠多级管式反应、酶分离纯化浓缩回用系统，实现目标产物手性化合物的低成本高纯度的连续化生产。

公开(公告)号：CN215209478U

公开(公告)日：2021-12-17

申请号：CN202120520527.2

申请日：2021-03-11

Applicant: 三峡大学

Inventor： 龚大春 ,  王德林 ,  张书银 ,  饶振辉 ,  杨潇

IPC: C12M1/40 ,  C12M1/24 ,  C12M1/38 ,  C12M1/36 ,  C12M1/34 ,  C12M1/02 ,  C12M1/00

Abstract: 一种用于多酶级联的管式反应器，包括反应器，所述的反应器包括内部的反应腔，反应腔外围设有密闭的环形腔，环形腔内设有加热盘管，加热盘管的进水端与出水端均延伸至反应器外，反应器内设有多个折流板，反应器内还设有一根穿过多个折流板的转轴，转轴一端与反应器一端外的电机之间轴连接；反应器一端设有进料管，另一端设有出料管；进料管连接至混料系统上；反应器上还设有温度控制系统。本实用新型专利采用上述结构，能够实现精确温度、PH控制目的，反应器采用管式结构，属于平推流反应器的一种，有利于大分子量酶和小分子底物的充分反应，避免产物抑制，通过多管拼接，可以避免多酶元件“交叉反应”和“辅酶干扰反应”发生。