公开(公告)号：CN115896150A

公开(公告)日：2023-04-04

申请号：CN202211148027.6

申请日：2022-09-20

Applicant: 吉林农业大学

Inventor： 曹欣 ,  曾艳 ,  李晓旭 ,  王军闳 ,  鲁逸远 ,  程明扬 ,  孙钰 ,  石春卫 ,  杨桂连 ,  王春凤

IPC: C12N15/74 ,  C12N15/70 ,  C12N15/62

Abstract: 本发明属于生物技术领域，提供了无抗性植物乳杆菌锚定表达载体pCXa‑vp6‑pfc‑S及其制备方法和应用，所述表达载体的碱基序列如SEQ ID NO.1所示。本发明构建了以表面(S‑anchoring)蛋白为锚定模型的营养互补筛选标记大肠杆菌‑植物乳杆菌无抗锚定表达载体，解决了植物乳杆菌细胞壁厚，外源质粒电转化宿主菌及植物乳杆菌连接产物筛选阳性重组子困难的问题，构建的表达载体pCXa‑vp6‑pfc‑S既能在E.coli6212/Δalr中复制表达，又能在L.plantarumNC8/Δalr中表达，同时将VP6抗原与pfc融合表达，增强其免疫反应。

公开(公告)号：CN114426981A

公开(公告)日：2022-05-03

申请号：CN202210157630.4

申请日：2022-02-21

Applicant: 吉林农业大学

Inventor： 王春凤 ,  杨桂连 ,  邹博识 ,  牛天明 ,  杨文涛 ,  石春卫

IPC: C12N15/74 ,  C12N15/62 ,  C12N1/21 ,  A61K39/12 ,  A61K39/39 ,  A61P31/20 ,  A23K10/18 ,  C12R1/25

Abstract: 本发明涉及微生物技术领域，具体涉及一种非洲猪瘟病毒抗原蛋白重组表达载体、重组植物乳酸菌及其制备方法与应用，所述非洲猪瘟病毒抗原蛋白重组表达载体包含P54、Fc、P30和EGP基因片段；其中，P54与P30为非洲猪瘟病毒基因II型SY‑18毒株中编码参与对宿主吸附和内化作用相关的胞膜结构蛋白基因序列；所述Fc为猪源IgG3Fc基因序列，EGP为肠道细胞HSPGs受体靶向配体多肽序列。本发明获得的重组植物乳杆菌能高效表达P54/P30抗原蛋白，具有良好的免疫原性。同时与原始菌株L.Plantarum NC8相比，能诱导黏膜免疫、细胞免疫和体液免疫应答，具有良好的实际应用价值。

公开(公告)号：CN113943376A

公开(公告)日：2022-01-18

申请号：CN202111277331.6

申请日：2021-10-29

Applicant: 吉林农业大学

Inventor： 王春凤 ,  杨桂连 ,  牛天明 ,  杨文涛 ,  石春卫 ,  包军付 ,  李楠 ,  王丹 ,  陈晓雷 ,  江雨鑫 ,  王红 ,  谷巍 ,  单宝龙

IPC: C07K19/00 ,  C12N15/34 ,  C12N15/74 ,  C12N1/21 ,  A61K39/12 ,  A61K39/39 ,  A61P31/20 ,  A23K50/30 ,  A23K10/18 ,  C12R1/25

Abstract: 本申请提供一种融合基因及其编码蛋白和其在抗非洲猪瘟中的应用。所述融合基因包含非洲猪瘟病毒核衣壳外膜蛋白CD2V基因和病毒包膜蛋白P17基因与选自结核分枝杆菌的表面蛋白HBHA基因和轮状病毒的毒力基因NSP4基因中的至少一种。同时本发明还提供了能够表达表达保护性抗原CD2V‑P17‑HBHA‑NSP4的重组植物乳杆菌，该重组菌具有相较于出发菌株更优的生长性能，稳定期后的活菌衰减速度更慢，并且具有良好的免疫效果，攻毒后可促进血清中产生高水平CD8+T细胞，可明显降低血清、口、肛、粪便中病毒粒子拷贝数，有效的减轻实验各脏器的病理损伤，对非洲猪瘟病毒具有良好的阻断作用，可用于防治非洲猪瘟。

公开(公告)号：CN112300976B

公开(公告)日：2021-09-21

申请号：CN202011185965.4

申请日：2020-10-29

Applicant: 吉林农业大学 ,  山东宝来利来生物工程股份有限公司

Inventor： 王春凤 ,  单宝龙 ,  刘乃芝 ,  亓秀晔 ,  郭杨丽 ,  姜延龙 ,  陈雷 ,  谷巍 ,  徐海燕 ,  张建梅 ,  程福亮 ,  李丹 ,  王红 ,  宋翔 ,  宁扬 ,  侯玉凤 ,  李鹏 ,  陈晓雯

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/74 ,  C07K19/00 ,  C12N9/24 ,  A23K10/16 ,  A61K39/17 ,  A61P31/14 ,  C12R1/25

Abstract: 本发明提供一株表达新城疫病毒抗原基因的重组植物乳杆菌及其发酵工艺和应用，属于微生物技术领域。本发明成功构建一株重组植物乳杆菌NC8‑pSIP409‑pgsA’(ata)‑HN‑DCpep。经试验证明，本发明获得的重组植物乳杆菌不仅能够高效表达HN抗原蛋白，且该蛋白具有免疫原性。同时与原始出发菌株NC8相比，其具有更佳的生长、发酵及贮藏性能等，同时，采用该重组植物乳杆菌冻干菌粉免疫SPF雏鸡，安全性能好，大剂量免疫对鸡只无异常反应。采用低剂量免疫即可显著提升机体黏膜免疫性能，具有抗NDV‑VII毒株的效果，攻毒后鸡只存活率为71.6％，因此具有良好的实际应用之价值。

公开(公告)号：CN109182184B

公开(公告)日：2021-07-20

申请号：CN201811081904.6

申请日：2018-09-17

Applicant: 吉林农业大学

Inventor： 王春凤 ,  王建忠 ,  杨桂连 ,  石春卫 ,  李宁 ,  单宝龙 ,  谷巍 ,  王红

IPC: C12N1/20 ,  A61K35/744 ,  A61P1/12 ,  A61P1/14 ,  C12R1/01

Abstract: 本公开涉及一株犬源乳酸片球菌及其应用，该菌株的分类命名为乳酸片球菌(Pediococcus acidilactici)，编号为JLAPCC‑P76，已于2018年7月28日保藏于中国典型培养物保藏中心，地址为：中国.武汉.武汉大学，其保藏编号为CCTCC M 2018500。本公开以幼犬新鲜粪便为样品，从中筛选出特性优良的乳酸菌菌株，通过给断奶幼犬连续饲喂8周后，对其肠道形态结构、菌群和血液指标进行测定，评价其对幼犬消化吸收、肠道菌群和抗氧化性等方面的影响，同时，为评价所筛选乳酸菌对宠物幼犬应激症状的治疗效果，本公开给予长途运输后出现食欲不振、腹泻的应激幼犬灌服乳酸菌，观察其腹泻恢复和饮食恢复情况，以缓解宠物犬交易过程中常见的运输应激症状。

公开(公告)号：CN108410901A

公开(公告)日：2018-08-17

申请号：CN201810148987.X

申请日：2018-02-13

Applicant: 吉林农业大学

Inventor： 王春凤 ,  刘琼 ,  姜延龙

IPC: C12N15/74 ,  C12N15/66

Abstract: 本发明公开了无抗性植物乳杆菌锚定表达载体pLQ2a，其碱基序列如SEQ ID NO.1所示；它是生物安全外源蛋白表达系统，以asd缺失株E.coli 6212/Δasd和alr缺失L.plantarum NC8/Δalr为宿主菌，将来源于乳酸乳球菌（Lactococcus lactis subsp. cremoris strain JM4）基因组上P23启动子作为alr基因表达的启动子，以pYA4545，pYA4545-Mcherry，pLP-1261 Inv，pSIP409PgsA’，pSIP409PgsA’-IL-10，pSIP409PgsA’-EGFP为基础载体，构建以PgsA’和LP-1261为双锚定模型的营养互补筛选标记大肠杆菌-乳酸菌无抗锚定表达载体pLQ2a，并以EGFP及Mcherry作为报告基因进行筛选及锚定表达验证；解决了植物乳杆菌连接转化效率低，很难筛选到阳性重组子的问题，构建表达载体pLQ2既能在E.coli 6212/Δalr中复制表达，又能在L.plantarum NC8/Δalr中表达。

公开(公告)号：CN108410900A

公开(公告)日：2018-08-17

申请号：CN201810148983.1

申请日：2018-02-13

Applicant: 吉林农业大学

Inventor： 王春凤 ,  刘琼 ,  姜延龙 ,  刘永仕 ,  杨桂连 ,  刘晶

IPC: C12N15/74 ,  C12N15/66

Abstract: 本发明公开了无抗性植物乳杆菌锚定表达载体pLPSa，它是生物安全外源蛋白表达系统，以asd缺失株E.coli 6212/Δasd和alr缺失L. plantarum NC8/Δalr为宿主菌，将来源于乳酸乳球菌（Lactococcus lactis subsp. cremoris strain JM4）基因组上P23启动子作为alr基因表达的启动子，以pYA4545，pLP-1261 Inv，pSIP409PgsA’-IL-10，pSIP409PgsA’-EGFP为基础载体，构建以表面蛋白（S_achoring）为锚定模型的营养互补筛选标记大肠杆菌-乳酸菌无抗锚定表达载体pLPSa，并以EGFP作为报告基因进行筛选及锚定表达验证。

公开(公告)号：CN108354936A

公开(公告)日：2018-08-03

申请号：CN201810251448.9

申请日：2018-03-26

Applicant: 吉林农业大学

Inventor： 杨桂连 ,  黄海斌 ,  王春凤 ,  刘可

IPC: A61K31/4741 ,  A61P33/10

Abstract: 本发明公开了一种血根碱在制备治疗动物旋毛虫病药物的应用，治疗动物旋毛虫病药物为血根碱的二甲基亚砜溶液；血根碱对体内外成虫期、迁移期和成囊期旋毛虫具有较强的杀灭作用，降低旋毛虫引起的肠道和肌肉的病理损伤；旋毛虫潜伏期一般为5～15天，治疗时主要针对迁移期新生幼虫引起的肌型旋毛虫病；体内迁移期，连续三天口服100ppm血根碱减虫率为47.2%，减虫效果与阿苯达唑相近；因此，血根碱能较好的治疗旋毛虫病，其效果显著，使用方法简单具有广阔的应用和推广价值。

公开(公告)号：CN106520803A

公开(公告)日：2017-03-22

申请号：CN201610128953.5

申请日：2016-03-08

Applicant: 吉林农业大学

Inventor： 王春凤 ,  姜延龙 ,  刘琼 ,  蔡若鹏 ,  杨桂连

IPC: C12N15/62 ,  C12N15/74 ,  C12N1/21 ,  C12R1/25 ,  C12R1/23

CPC classification number: C12N15/74 ,  C07K2319/03 ,  C07K2319/43 ,  C12N9/93 ,  C12Y603/02

Abstract: 本发明公开了一种融合基因pgsA，-mRck-FLAG，其中mRck-FLAG来源于鼠伤寒沙门氏菌χ3761，将pgsA，-mRck-FLAG插入大肠杆菌-乳酸菌穿梭质粒载体 pW425et中，获得了侵入型乳酸重组质粒pW425et-pgsA，-mRck-FLAG，将其转染至嗜酸乳杆菌中，获得了一种侵入型乳酸菌，侵入性实验表明，一种侵入型乳酸菌成功地侵入了RAW细胞，为今后以重组的侵入型乳酸菌作为口服DNA疫苗的细胞载体奠定基础。

公开(公告)号：CN105734072A

公开(公告)日：2016-07-06

申请号：CN201610128954.X

申请日：2016-03-08

Applicant: 吉林农业大学

Inventor： 王春凤 ,  姜延龙 ,  杨桂连 ,  刘琼 ,  蔡若鹏

IPC: C12N15/61 ,  C12N15/10 ,  C12N15/75 ,  C12N1/21 ,  C12N15/65 ,  C12R1/25

CPC classification number: C12N9/90 ,  C12N15/10 ,  C12N15/65 ,  C12N15/75 ,  C12N2800/101 ,  C12Y501/01001

Abstract: 本发明公开了一种alr缺陷植物乳杆菌NC8及alr标记表达载体pCJ2，alr缺陷植物乳杆菌NC8是将alr缺失自杀性质粒pNZ5319?Δalr转染植物乳杆菌NC8后，获得了缺失alr基因的植物乳杆菌NC8，同时构建了alr标记表达载体pCJ2，是食品级乳酸菌表达系统，安全可靠。