一种体外检测菊花胚胎败育过程中Caspase活性的方法及其应用

    公开(公告)号:CN105510292A

    公开(公告)日:2016-04-20

    申请号:CN201610031066.6

    申请日:2016-01-18

    CPC classification number: G01N21/64

    Abstract: 本发明公开了一种体外检测菊花胚胎败育过程中Caspase活性的方法及其应用,该方法包括:1)获得菊花远缘杂交后不同发育时期的正常与败育胚珠;2)采用TCA/丙酮沉淀法分别提取步骤1)中所取得的胚珠样品的蛋白质;3)将步骤2)中的蛋白质预处理后分别用Bradford法进行蛋白质定量,并分别调整蛋白浓度;4)用Caspase活性荧光检测方法对正常与败育胚珠的蛋白进行Caspase活性检测。本发明针对菊花远缘杂交后胚胎败育的细胞衰老和凋亡现象,提供了一种快速、准确鉴定菊花胚胎败育过程中诱导细胞死亡的关键Caspase酶,为研究菊花胚胎败育的分子机理,挖掘调控胚胎败育的关键基因和蛋白提供了研究基础。

    一种高效率菊花杂交育种效率的方法

    公开(公告)号:CN103828710B

    公开(公告)日:2016-03-23

    申请号:CN201410100386.3

    申请日:2014-03-18

    Abstract: 本发明为一种高效率菊花杂交育种的方法,属于生物技术育种领域,本发明选择杂交后代种子,经75%乙醇消毒1min及5%次氯酸钠消毒50min后,播种于含15g·L-1蔗糖的MS培养基上,并结合组织培养技术,进一步扩繁和继代培养,获得大量的无菌苗。本方法切实提高了杂交种子发芽率和成苗率,并且对于部分存在杂交不亲和性的菊花品种,可将由少量的杂交后代种子获得的无菌苗于当年进行继代扩繁,以获得较大群体的株系,从而缩短育种周期,并进一步丰富了菊花育种手段。

    菊花抗蚜性关联分子标记、筛选方法及应用

    公开(公告)号:CN104313150A

    公开(公告)日:2015-01-28

    申请号:CN201410568698.7

    申请日:2014-10-22

    CPC classification number: C12Q1/686 C12Q1/6895 C12Q2600/124 C12Q2600/156

    Abstract: 本发明属于生物技术领域,提供菊花抗蚜性关联分子标记、分子标记引物、分子标记筛选方法及上述三者在菊花新品种培育上的应用。菊花抗蚜性关联分子标记包括主效QTL位点NoaE2G1、NoaE2G7、NoaE1H3、NoaE2H7、NoaE2H8的分子标记。其筛选方法包括:(1)试验材料及其表型数据的获得;(2)菊花连锁图谱构建;(3)菊花抗蚜性状的QTL定位;(4)菊花抗蚜性状关联分子标记的确定。解决了目前菊花抗蚜性状基因的精确定位和克隆的研究在国内外几乎空白这一现状,筛选出与菊花蚜虫抗性基因紧密关联的分子标记,建立菊花抗蚜性分子标记辅助选择体系,提高菊花抗蚜性选择效率,为菊花新品种的选育奠定基础。

    一种通过叶型特征鉴定菊花品种的方法

    公开(公告)号:CN102860222B

    公开(公告)日:2014-02-26

    申请号:CN201210259784.0

    申请日:2012-07-25

    Abstract: 本发明公开了一种通过叶型特征鉴定菊花品种的方法,属于菊花品种资源鉴别与品种权保护领域,该方法包括:测定菊花植株不同叶位的叶型指标,确定植株叶型保守的叶位;采集菊花品种不同单株间保守的叶位的叶型指标,并将该叶型指标在不同品种间作差异显著性分析,确定在不同品种间存在显著性差异的叶型指标为特异性叶型特征指标;将多个特异性叶型特征指标通过多元判别分析法进行品种判定。本发明鉴定方法通过对品种成熟叶片特征的测定,综合品种的叶型特征指标进行类别(品种)判定,检测成本低廉,易实施,特异性强,准确度高。

    一种鉴定菊花远缘杂交胚胎败育相关蛋白的方法

    公开(公告)号:CN103472182A

    公开(公告)日:2013-12-25

    申请号:CN201310385454.0

    申请日:2013-08-29

    Abstract: 本发明公开了一种鉴定菊花远缘杂交胚胎败育相关蛋白的方法,属于菊花育种与蛋白质组学领域。该方法包括:以栽培小菊作母本,野菊菊花脑作父本开展远缘杂交工作。授粉后不同时间剪下已授粉的花序,分别取形态发育完整、饱满的子房和形态发育异常、不饱满的子房,取样后立即在液氮中速冻后保存于-80℃冰箱中。样品用TCA/丙酮沉淀法提取蛋白质,保存于-80℃。最后运用iTRAQ与质谱技术快速鉴定差异蛋白,并进行生物信息学分析,获得与菊花远缘杂交育种中胚胎败育的相关蛋白。本发明针对菊花及其近缘属野生种,提供了一种快速、准确鉴定菊花胚胎发育过程中不同发育阶段的不同形态的胚胎差异蛋白,为解决菊花远缘杂交胚胎败育提供研究基础。

    一种建立菊花脑高效再生体系的方法

    公开(公告)号:CN103141393A

    公开(公告)日:2013-06-12

    申请号:CN201310091445.0

    申请日:2013-03-21

    Abstract: 本发明涉及一种建立菊花脑高效再生体系的方法,属于生物技术育种领域。以菊花脑幼嫩无菌花蕾为外植体,根据三种激素的组合设计出八种培养基,进行最适分化培养基的筛选。经过1~2次的继代培养,花蕾直接分化出再生苗,而后转入生根培养基中进行生根培养,获得完整植株。本发明首次以菊花脑花蕾建立了其高频再生体系,为菊花脑生物技术育种工作提供了理论基础和实验依据,将有效推动其近缘种菊花的生物技术育种进程。

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