一个茎、茎尖和小穗强表达启动子Pssi的分离及其应用

    公开(公告)号:CN114350666A

    公开(公告)日:2022-04-15

    申请号:CN202210096617.2

    申请日:2022-01-26

    Abstract: 本发明提供了一个茎、茎尖和小穗强表达启动子Pssi的分离及其应用。本发明分离克隆了一个茎、茎尖和小穗强表达启动子Pssi并通过表达分析和组织染色对其启动子活性进行鉴定,进一步利用Pssi控制Cas9核酸酶的表达,开发出CRISPR/Cas9介导同源定向修复的无筛选标记系统。本发明表明,在转基因植物中,Pssi启动子可以驱动Cas9核酸酶在茎、茎尖和小穗高表达,而在愈伤组织、根、叶等器官中低表达或不表达;该系统能在单子叶植物中高效去除筛选标记基因,在T1代中即可获得大量的标记基因纯合删除植株,其筛选标记被完全删除的效率为55.6%,可以在转基因植物的后代中获取大量的无筛选标记基因植株。

    一种多基因组装载体系统及其多基因组装方法

    公开(公告)号:CN107177616B

    公开(公告)日:2021-02-19

    申请号:CN201710384197.7

    申请日:2017-05-26

    Inventor: 刘耀光 祝钦泷

    Abstract: 本发明公开了一种多基因组装载体系统及其多基因组装方法。该系统包括1类接受载体、2类供给载体、以及可选择使用的能发生筛选标记自删除的供给质粒。该系统利用Cre/loxP重组系统和两组突变型loxP的不可逆重组位点,在Cre酶作用下,以野生型loxP位点的重组来实现供给载体整合到接受载体中,然后其一组突变型loxP的不可逆重组自动删除供给载体的骨架,只留下目的基因在接受载体上;重复2类供给载体交替与接受载体的组装,就能实现多基因的快速组装。本发明是目前最简单高效的多基因载体系统。因此本发明对重要的、复杂生物合成途径和重要农艺性状的多基因遗传工程操作提供了可操作的技术平台,具有重要的应用价值。

    一种创建亚洲栽培稻与非洲栽培稻种间杂种亲和系的方法和应用

    公开(公告)号:CN106967726B

    公开(公告)日:2020-12-29

    申请号:CN201710216552.X

    申请日:2017-04-05

    Abstract: 本发明公开了一种基于基因编辑技术创建亚洲栽培稻与非洲栽培稻种间杂种亲和系的方法及其在水稻远缘杂种优势中的应用。即针对水稻种间杂种不育S1座位的非洲稻候选基因OgTPR1选取合适的基因编辑位点,以CRISPR/Cas9等定点编辑技术对OgTPR1进行定点敲除。在证明敲除突变基因ogtpr1不影响亲本花粉和雌配子育性的基础上,以ogtpr1突变系与亚洲栽培稻杂交的杂种F1的花粉和雌配子育性正常,即消除了种间杂种不育的遗传效应。本发明提供的技术方法能有效地打破S1座位介导的种间杂种生殖障碍,对利用水稻种间远缘杂种优势,提高粮食产量具有重要的应用价值。

    一种在作物种子胚乳合成花青素的转基因育种方法

    公开(公告)号:CN107142276B

    公开(公告)日:2020-11-13

    申请号:CN201710368951.8

    申请日:2017-05-23

    Abstract: 本发明公开了一种在作物种子胚乳合成花青素的转基因育种方法。本发明通过在作物中转入包含6个表达结构蛋白的基因和2个表达转录因子的基因的基因组合,获得种子胚乳为紫色的、合成花青素的转基因作物;6个结构蛋白为CHS、CHI、F3H、F3’H、DFR和ANS;2个转录因子为转录因子Pl和转录因子Lc。本发明是基于发明人发现2个调节基因和6个结构基因是在胚乳中高水平合成花青素所必需的,得到的研究成果。本发明首次在作物水稻的胚乳中实现了花青素的合成,并获得了无筛选标记的转基因“紫米”产品,可以直接用于食用,也可以作为原材料用于生产花青素的原料。本发明对于新的功能性作物育种具有重要的指导意义和生产应用价值。

    OsPSE1基因在调节植物衰老中的应用

    公开(公告)号:CN104611361B

    公开(公告)日:2020-08-07

    申请号:CN201510020028.6

    申请日:2015-01-15

    Abstract: 本发明属于基因工程技术领域,具体公开了OsPSE1基因在调节植物衰老中的应用。本发明利用一个水稻早衰植株,通过图位克隆法克隆出OsPSE1基因并进行了功能分析,发现OsPSE1基因在早衰水稻中表达,可以使早衰水稻恢复正常,而在正常水稻中过表达,则可以进一步延迟植物衰老,增加水稻生物量的积累,暗示了OsPSE1基因在提高作物产量上具有较好的应用潜力;本发明利用基因工程手段调控OsPSE1基因的表达水平进行分子育种,在提高作物产量上具有潜在的应用价值。

    一种在作物种子胚乳生产虾青素的转基因育种方法

    公开(公告)号:CN105907780B

    公开(公告)日:2020-02-21

    申请号:CN201610283794.6

    申请日:2016-04-29

    Abstract: 本发明公开了一种在作物种子胚乳生产虾青素的转基因育种方法。具体步骤为S1.根据育种作物的密码子偏好性,优化PSY、CrtI、BHY和BKT的4个基因的序列,将序列优化后的4个基因分别与育种作物胚乳表达启动子和质体转运肽融合,分别构建基因表达盒;将S1中的4个基因表达盒构建成植物转化载体,获得含PSY、CrtI、BHY和BKT的植物转化载体;将S2所述植物转化载体转化育种作物,获得种子胚乳为橙红色的合成虾青素的转基因作物。本发明实现虾青素在作物(尤其是水稻)种子胚乳中的合成,其产品即可以直接用于食用,也可以作为生产虾青素的原料,对于新型功能性作物育种具有重要的指导意义和生产应用价值。

    一种调控水稻植株株高的方法

    公开(公告)号:CN106811478B

    公开(公告)日:2020-02-04

    申请号:CN201510840714.8

    申请日:2015-11-27

    Abstract: 本发明属于基因工程技术领域,具体公开了一种调控水稻植株株高的方法,是将编码SEQ ID NO:2所示ptd1蛋白中第56位和/或76位和/或第102位和/或116位半胱氨酸的密码子定点突变为非半胱氨酸密码子,得到改造后的基因;将改造后的基因与启动子连接后转入正常株高的水稻植株,筛选获得与正常株高的水稻植株相比,株高发生变化的植株。本发明利用基因工程手段表达突变型PTD1基因或定点突变了保守半胱氨酸密码子的ptd1基因进行分子育种,在调节植物株高、植物理想株型的建成上具有潜在的应用价值。

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