公开(公告)号：CN109679898A

公开(公告)日：2019-04-26

申请号：CN201811547560.3

申请日：2018-12-18

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 王晓宇 ,  昝林森 ,  梁成成 ,  杨武才

IPC: C12N5/077

CPC classification number: C12N5/0653 ,  C12N2501/33

Abstract: 本发明涉及一种改进的诱导牛肌内脂肪细胞成脂分化的方法，该方法将牛肌内脂肪细胞培养于含有10％胎牛血清的DMEM/F12培养基中，在牛肌内脂肪细胞汇合达到100％的2天后，加入诱导分化剂处理2天，所述的诱导分化剂的组成为：3-异丁基-1-甲基黄嘌呤：0.5mM，地塞米松：1μM，胰岛素：10μg/ml，Rosiglitazone：2μmol/L。采用该方法可以明显提高其成脂分化能力，缩短诱导试验所需时间，为今后开展脂肪细胞诱导分化试验提供了了新的方法。

公开(公告)号：CN109576306A

公开(公告)日：2019-04-05

申请号：CN201811453011.X

申请日：2018-11-30

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 王亚宁 ,  昝林森 ,  杨武才

IPC: C12N15/861 ,  C12N15/12 ,  C12N7/01

Abstract: 本发明涉及一种利用pAd-Easy1腺病毒载体系统构建牛MEF2A基因过表达病毒的方法，该方法首先通过PCR技术克隆牛MEF2A基因CDS区全长序列并构建到pAdTrack-CMV载体上，得到pAdTrack-Mef2a基因克隆载体，然后与腺病毒骨架载体pAd-Easy1在BJ5183感受态细胞中同源重组，组建病毒重组子pAd-Mef2a，最后将病毒重组子pAd-Mef2a转染到293A细胞中，经包装、扩繁、鉴定，得到高滴度的牛MEF2A基因过表达腺病毒。该牛MEF2A基因过表达腺病毒可以实现牛MEF2A基因在细胞中的高丰度表达，为今后在细胞水平上研究MEF2A的功能及其作用机制提供基础。

公开(公告)号：CN109554392A

公开(公告)日：2019-04-02

申请号：CN201811547738.4

申请日：2018-12-18

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 张松 ,  昝林森 ,  王力

IPC: C12N15/861 ,  C12N15/113

Abstract: 本发明公开了一种牛mir-145基因过表达重组腺病毒载体构建方法，以含有牛mir-145基因序列质粒做模板，设计引物并克隆牛mir-145基因；经测序验证后重组到表达载体pSB50上，转化进入感受态细胞，获得表达质粒pSB50-bta-mir-145；经AdMax腺病毒系统包装成重组腺病毒载体pAd-bta-mir-145，其滴度为7.27×1010(PFU/ml)；将重组腺病毒载体加入到HEK293细胞，进行扩增、纯化；用高浓度的重组腺病毒载体pAd-bta-mir-145感染牛前体脂肪细胞，实时荧光定量PCR检测牛mir-145的表达量。其表达水平比对照组高68倍。

公开(公告)号：CN106497864A

公开(公告)日：2017-03-15

申请号：CN201610893405.1

申请日：2016-10-13

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 江中良 ,  张妮娜 ,  昝林森

IPC: C12N5/071

CPC classification number: C12N5/0682 ,  C12N2500/25 ,  C12N2500/36 ,  C12N2500/38

Abstract: 本发明公开了一种家畜腔前卵泡体外培养液及其制备方法，所述培养液为α-亚麻酸，α-亚麻酸在每1mL常规培养液中的添加量为100～200μg，所述常规培养液由100mLα-MEM溶液、1.5mL转铁蛋白，150μL胰岛素，100μL维生素C，0.5mL亚硒酸钠，500μg牛血清白蛋白，100ng海藻酸钠，500IU FSH，0.06g青霉素钠、0.1g硫酸链霉素组成。与现有技术相比，本发明首次将α-亚麻酸家畜卵巢腔前卵泡的体外培养，效果可靠，易于推广，适用于家畜腔前卵泡的体外培养，可显著提高体外培养家畜腔前卵泡的体外存活率。

公开(公告)号：CN103146752B

公开(公告)日：2016-02-10

申请号：CN201310041817.9

申请日：2013-02-01

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 昝林森 ,  付常振 ,  成功 ,  王洪宝 ,  王虹

IPC: C12N15/861 ,  C12N15/113 ,  C12N7/01

Abstract: 本发明公开了一种应用腺病毒载体介导RNA干扰技术沉默固醇调控元件结合蛋白基因1的方法，该方法包括以下步骤：A1，克隆秦川牛固醇调控元件结合蛋白1基因（SREBP1）；A2，psiCHECK-Ⅱ-SREBP1表达载体的构建；A3，靶向SREBP1基因shRNA的设计、合成；A4，pENTR/CMV-GFP/U6-shRNA表达载体的构建；A5，shRNA干扰效率的测定、筛选；A6，重组腺病毒载体的构建；A7，腺病毒包装、扩增、滴度测定；为应用RNA干扰技术研究秦川牛SREBP1基因的功能提供一种有效的方法。

公开(公告)号：CN104372024A

公开(公告)日：2015-02-25

申请号：CN201410606153.0

申请日：2014-10-30

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 成功 ,  昝林森 ,  王虹

IPC: C12N15/861 ,  C12N5/10

Abstract: 本发明公开了一种诱导牛成纤维细胞/成肌细胞转分化为脂肪细胞的方法，克隆牛转录因子CCAAT增强子结合蛋白C/EBPβ基因，构建C/EBPβ基因过表达载体并包装获得重组腺病毒。腺病毒侵染牛成纤维细胞、成肌细胞实现上述细胞快速转分化为脂肪细胞。该脂肪细胞具有明显的脂滴形成和成脂关键基因表达。本发明可为研究脂肪细胞分化、家畜脂肪沉积机理提供一个很好的细胞模型。同时，为培育“大理石花纹”明显、富含肌内脂肪的优质肉牛新品种提供了新思路和新候选功能基因，具有重要应用前景。

公开(公告)号：CN103740830A

公开(公告)日：2014-04-23

申请号：CN201410014627.2

申请日：2014-01-13

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 王洪宝 ,  昝林森 ,  张小白 ,  张莺莺

IPC: C12Q1/68

CPC classification number: C12Q1/6888 ,  C12Q2600/124 ,  C12Q2600/156

Abstract: 本发明涉及一种用THRSP基因预示秦川牛肌肉嫩度和系水力的分子标记方法，根据牛THRSP基因序列设计一对引物，对秦川牛全血基因组DNA进行PCR扩增后进行SSCP带型检测，通过分析带型确定秦川牛肌肉嫩度和系水力。该方法采用PCR-SSCP技术相结合，通过变异位点基因型的分析、比较，从而预测和确定该牛的肉质优劣，操作简单、费用低、精确度高，可进行快速检测。

公开(公告)号：CN103098980A

公开(公告)日：2013-05-15

申请号：CN201310032692.3

申请日：2013-01-28

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 辛亚平 ,  昝林森 ,  杜双田 ,  田万强 ,  刘晓辉

IPC: A23K1/00 ,  A23K1/14

Abstract: 本发明公开了一种新型的微生物秸秆饲料发酵剂，由乳酸杆菌、枯草芽孢杆菌、酵母菌、黑曲霉菌按比例组成。这种新型微生物秸秆饲料发酵剂活力高、发酵时间短，具有促生长、预防疾病效果、菌种符合国家有关规定；产品稳定性高、流动性好，能保证和秸秆饲料原料混合均匀，使用方便；菌体纯、含杂菌少、安全性高，是一种无毒、无残留、无抗药性产生的绿色饲料发酵剂。

公开(公告)号：CN102876700A

公开(公告)日：2013-01-16

申请号：CN201210375051.3

申请日：2012-09-27

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 昝林森 ,  杨宁 ,  成功 ,  王洪宝

IPC: C12N15/65 ,  C12N15/63 ,  C12N5/10 ,  A01K67/027

Abstract: 本发明公开了一种PiggyBac转座子介导的肌肉特异表达A-FABP通用载体的构建方法。全基因合成一段包括PiggyBac转座子转座必需的PB5’端与PB3’端的DNA序列，并且在PB5’末端和PB3’末端中间引入多克隆位点。以pSP72商业化质粒为基础完成PiggyBac骨架载体构建。再将LoxP锚定的新霉素抗性基因、绿色荧光蛋白基因（LoxP-NEO-LoxP-EGFP）以及牛α-actin启动子和牛A-FABP基因克隆到PiggyBac骨架载体多克隆位点中，最终构建完成PiggyBac-NEO-EGFP-actin-AFABP通用型表达载体。通过分离并转染牛成纤维细胞，表明通过上述方法构建的通用型表达载体可在成纤维细胞中实现高效转座，在很大程度上提高了目的基因的整合效率。可用于制备提高肉中多不饱和脂肪酸、增加瘦肉率等多种用途，具有很高的通用性。

公开(公告)号：CN102747150A

公开(公告)日：2012-10-24

申请号：CN201210188946.6

申请日：2012-06-08

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 昝林森 ,  姜碧杰 ,  田万强 ,  王洪程

IPC: C12Q1/68

Abstract: 本发明公开了一种用ANAPC13基因检测秦川牛体型大小的方法，该方法采用PCR-SSCP技术结合DNA测序来检测牛ANAPC13基因变异位点。SSCP结果出现三种带型，测序结果发现两个变异位点，分别位于第一外显子17bp处的A→G突变和42bp处的C→T突变。后来测序验证发现，两个位点在98%的个体中属于连锁突变。因此，我们将三种带型分别型命名为AACC、AGCT和GGTT，并在秦川牛404个体中做了分型统计及其与体尺性状的关联分析。该方法是一种在DNA水平上筛查和检测与秦川牛生长发育性状密切相关的分子遗传标记，以用于秦川牛的辅助选择和分子育种，加快秦川牛良种繁育速度。通过基因型的分析比较，从而预测和确定该秦川牛的体型大小，操作简单、费用低、精确度高，可进行快速检测。