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公开(公告)号：CN103146752A
公开(公告)日：2013-06-12
申请号：CN201310041817.9
申请日：2013-02-01
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/861 , C12N15/113 , C12N7/01
Abstract: 本发明公开了一种应用腺病毒载体介导RNA干扰技术沉默固醇调控元件结合蛋白基因1的方法，该方法包括以下步骤：A1，克隆秦川牛固醇调控元件结合蛋白1基因（SREBP1）；A2，psiCHECK-Ⅱ-SREBP1表达载体的构建；A3，靶向SREBP1基因shRNA的设计、合成；A4，pENTR/CMV-GFP/U6-shRNA表达载体的构建；A5，shRNA干扰效率的测定、筛选；A6，重组腺病毒载体的构建；A7，腺病毒包装、扩增、滴度测定；为应用RNA干扰技术研究秦川牛SREBP1基因的功能提供一种有效的方法。
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公开(公告)号：CN118497116A
公开(公告)日：2024-08-16
申请号：CN202410725369.2
申请日：2024-06-06
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N5/077
Abstract: 本发明涉及一种诱导牛脂肪细胞分化的无血清培养基，该培养基包括I液和II液两种，其中I液是在基础培养基的基础上添加了以下组分：牛血清白蛋白浓度为0.5mg/ml‑2mg/ml，胰岛素浓度为10μg/ml‑40μg/ml，表皮生长因子浓度为5ng/ml‑20ng/ml，维生素C磷酸酯浓度为20μg/ml‑100μg/ml，罗格列酮浓度为0.5μg/ml‑3μg/ml，地塞米松浓度为0.1μg/ml‑1μg/ml；II液是在基础培养基的基础上添加了以下组分：牛血清白蛋白浓度为0.5mg/ml‑2mg/ml，胰岛素浓度为10μg/ml‑40μg/ml，表皮生长因子浓度为5ng/ml‑20ng/ml，维生素C磷酸酯浓度为20μg/ml‑100μg/ml。本发明提供的无血清培养基能有效的诱导牛脂肪细胞成脂，不含有血清，但效果优于含血清培养基。
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公开(公告)号：CN117649699A
公开(公告)日：2024-03-05
申请号：CN202311437895.0
申请日：2023-10-31
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明提供了一种基于时刻偏移损失的肉牛异常行为视频时序定位方法，包括：步骤S1，构建肉牛异常行为时序定位数据集：步骤S2，提取肉牛异常行为视频特征：步骤S3，实现肉牛异常行为时序定位方法：步骤S4，利用中心点‑始末时刻偏移损失函数和焦点损失函数训练肉牛异常行为时序定位模型；步骤S5，肉牛异常行为时序定位。针对现有时序定位方法仅针对单一目标且准确性差的问题，本发明的计算行为发生和结束时刻偏移量的损失函数——中心点‑始末时刻偏移损失函数，构建基于时刻偏移损失的肉牛异常行为视频时序定位方法，实现监控视频中肉牛异常行为的时序定位，以满足真实养殖场景下肉牛精准管理时获取异常行为发生时间的需求。
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公开(公告)号：CN110511871A
公开(公告)日：2019-11-29
申请号：CN201910911343.6
申请日：2019-09-25
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明的一种细胞共培养的装置，涉及细胞培养领域，其是由皿体和皿盖构成，皿体为上开口的中空结构，皿体开口处有皿盖，皿体内有隔离圈，隔离圈将皿体的内部分割为区域Ⅰ和区域Ⅱ，隔离圈内有爬片。利用上述装置在实现牛肌细胞与脂肪细胞直接接触共培养的同时，又可将爬片上的单类细胞（肌细胞或脂肪细胞）进行收集进行后续转录组及蛋白组的分析处理，以用来研究共培养环境下对肌细胞或脂肪细胞的作用，因此有利于进一步探究肌细胞与脂肪细胞之间的相互作用；经多次观察证实用这种方法培养的肌细胞和脂肪细胞成活效率高、活力好、细胞特征明显，并与单独培养的肌细胞和脂肪细胞形态一致，是一种很好的体外研究模型，具有一定的推广研究价值。
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公开(公告)号：CN103146752B
公开(公告)日：2016-02-10
申请号：CN201310041817.9
申请日：2013-02-01
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/861 , C12N15/113 , C12N7/01
Abstract: 本发明公开了一种应用腺病毒载体介导RNA干扰技术沉默固醇调控元件结合蛋白基因1的方法，该方法包括以下步骤：A1，克隆秦川牛固醇调控元件结合蛋白1基因（SREBP1）；A2，psiCHECK-Ⅱ-SREBP1表达载体的构建；A3，靶向SREBP1基因shRNA的设计、合成；A4，pENTR/CMV-GFP/U6-shRNA表达载体的构建；A5，shRNA干扰效率的测定、筛选；A6，重组腺病毒载体的构建；A7，腺病毒包装、扩增、滴度测定；为应用RNA干扰技术研究秦川牛SREBP1基因的功能提供一种有效的方法。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103740830A
公开(公告)日：2014-04-23
申请号：CN201410014627.2
申请日：2014-01-13
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/68
CPC classification number: C12Q1/6888 , C12Q2600/124 , C12Q2600/156
Abstract: 本发明涉及一种用THRSP基因预示秦川牛肌肉嫩度和系水力的分子标记方法，根据牛THRSP基因序列设计一对引物，对秦川牛全血基因组DNA进行PCR扩增后进行SSCP带型检测，通过分析带型确定秦川牛肌肉嫩度和系水力。该方法采用PCR-SSCP技术相结合，通过变异位点基因型的分析、比较，从而预测和确定该牛的肉质优劣，操作简单、费用低、精确度高，可进行快速检测。
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公开(公告)号：CN102876700A
公开(公告)日：2013-01-16
申请号：CN201210375051.3
申请日：2012-09-27
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/65 , C12N15/63 , C12N5/10 , A01K67/027
Abstract: 本发明公开了一种PiggyBac转座子介导的肌肉特异表达A-FABP通用载体的构建方法。全基因合成一段包括PiggyBac转座子转座必需的PB5’端与PB3’端的DNA序列，并且在PB5’末端和PB3’末端中间引入多克隆位点。以pSP72商业化质粒为基础完成PiggyBac骨架载体构建。再将LoxP锚定的新霉素抗性基因、绿色荧光蛋白基因（LoxP-NEO-LoxP-EGFP）以及牛α-actin启动子和牛A-FABP基因克隆到PiggyBac骨架载体多克隆位点中，最终构建完成PiggyBac-NEO-EGFP-actin-AFABP通用型表达载体。通过分离并转染牛成纤维细胞，表明通过上述方法构建的通用型表达载体可在成纤维细胞中实现高效转座，在很大程度上提高了目的基因的整合效率。可用于制备提高肉中多不饱和脂肪酸、增加瘦肉率等多种用途，具有很高的通用性。
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公开(公告)号：CN101899527A
公开(公告)日：2010-12-01
申请号：CN201010266204.1
申请日：2010-08-30
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种用A-FABP基因预示秦川牛肉质性状的分子标记方法，根据牛A-FABP基因序列设计一对引物；利用该引物对牛的基因组DNA进行PCR扩增，然后使用聚丙烯酰胺凝胶对PCR产物进行电泳分离，检测出牛A-FABP基因在第二外显子处的1个A→G碱基变异位点；该位点处于牛A-FABP基因2988位，并对该位点的两种纯合基因型和杂合基因型进行命名。实验结果表明，具有AA基因型秦川牛个体的眼肌面积比GG基因型个体的大18.25cm2；具有AA基因型秦川牛个体的含水率比GG基因型个体的高10.00%；具有AA基因型秦川牛个体的嫩度比GG基因型个体的高0.550kg。方法操作简单、费用低、精确度高，可进行快速检测，为改善秦川牛肉质提供一种有效地分子标记育种手段，加速秦川牛选育新品种（系）的培育进程。
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公开(公告)号：CN110511871B
公开(公告)日：2025-02-07
申请号：CN201910911343.6
申请日：2019-09-25
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明的一种细胞共培养的装置，涉及细胞培养领域，其是由皿体和皿盖构成，皿体为上开口的中空结构，皿体开口处有皿盖，皿体内有隔离圈，隔离圈将皿体的内部分割为区域Ⅰ和区域Ⅱ，隔离圈内有爬片。利用上述装置在实现牛肌细胞与脂肪细胞直接接触共培养的同时，又可将爬片上的单类细胞（肌细胞或脂肪细胞）进行收集进行后续转录组及蛋白组的分析处理，以用来研究共培养环境下对肌细胞或脂肪细胞的作用，因此有利于进一步探究肌细胞与脂肪细胞之间的相互作用；经多次观察证实用这种方法培养的肌细胞和脂肪细胞成活效率高、活力好、细胞特征明显，并与单独培养的肌细胞和脂肪细胞形态一致，是一种很好的体外研究模型，具有一定的推广研究价值。
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公开(公告)号：CN117660315A
公开(公告)日：2024-03-08
申请号：CN202311532581.9
申请日：2023-11-17
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N5/077
Abstract: 本发明涉及一种诱导牛成肌细胞分化的无血清培养基，该培养基是在基础培养基的基础上添加了以下组分：牛血清白蛋白浓度为0.5mg/ml‑2mg/ml，胰岛素浓度为10μg/ml‑40μg/ml，表皮生长因子浓度为5ng/ml‑20ng/ml，转铁蛋白浓度为2μg/ml‑10μg/ml，维生素C磷酸酯浓度为20μg/ml‑100μg/ml。本发明提供的无血清培养基能有效诱导牛成肌细胞的分化；该培养基不仅仅避免了添加血清，并且效果优于现有的血清培养基，用该培养基可以避免高成本、血清批次差异和动物福利等问题。
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