公开(公告)号：CN103146752A

公开(公告)日：2013-06-12

申请号：CN201310041817.9

申请日：2013-02-01

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 昝林森 ,  付常振 ,  成功 ,  王洪宝 ,  王虹

IPC: C12N15/861 ,  C12N15/113 ,  C12N7/01

Abstract: 本发明公开了一种应用腺病毒载体介导RNA干扰技术沉默固醇调控元件结合蛋白基因1的方法，该方法包括以下步骤：A1，克隆秦川牛固醇调控元件结合蛋白1基因（SREBP1）；A2，psiCHECK-Ⅱ-SREBP1表达载体的构建；A3，靶向SREBP1基因shRNA的设计、合成；A4，pENTR/CMV-GFP/U6-shRNA表达载体的构建；A5，shRNA干扰效率的测定、筛选；A6，重组腺病毒载体的构建；A7，腺病毒包装、扩增、滴度测定；为应用RNA干扰技术研究秦川牛SREBP1基因的功能提供一种有效的方法。

公开(公告)号：CN103146752B

公开(公告)日：2016-02-10

申请号：CN201310041817.9

申请日：2013-02-01

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 昝林森 ,  付常振 ,  成功 ,  王洪宝 ,  王虹

IPC: C12N15/861 ,  C12N15/113 ,  C12N7/01

Abstract: 本发明公开了一种应用腺病毒载体介导RNA干扰技术沉默固醇调控元件结合蛋白基因1的方法，该方法包括以下步骤：A1，克隆秦川牛固醇调控元件结合蛋白1基因（SREBP1）；A2，psiCHECK-Ⅱ-SREBP1表达载体的构建；A3，靶向SREBP1基因shRNA的设计、合成；A4，pENTR/CMV-GFP/U6-shRNA表达载体的构建；A5，shRNA干扰效率的测定、筛选；A6，重组腺病毒载体的构建；A7，腺病毒包装、扩增、滴度测定；为应用RNA干扰技术研究秦川牛SREBP1基因的功能提供一种有效的方法。

公开(公告)号：CN104372024A

公开(公告)日：2015-02-25

申请号：CN201410606153.0

申请日：2014-10-30

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 成功 ,  昝林森 ,  王虹

IPC: C12N15/861 ,  C12N5/10

Abstract: 本发明公开了一种诱导牛成纤维细胞/成肌细胞转分化为脂肪细胞的方法，克隆牛转录因子CCAAT增强子结合蛋白C/EBPβ基因，构建C/EBPβ基因过表达载体并包装获得重组腺病毒。腺病毒侵染牛成纤维细胞、成肌细胞实现上述细胞快速转分化为脂肪细胞。该脂肪细胞具有明显的脂滴形成和成脂关键基因表达。本发明可为研究脂肪细胞分化、家畜脂肪沉积机理提供一个很好的细胞模型。同时，为培育“大理石花纹”明显、富含肌内脂肪的优质肉牛新品种提供了新思路和新候选功能基因，具有重要应用前景。