一种牛PDHB基因腺病毒干扰载体构建及其鉴定方法

    公开(公告)号:CN106811484A

    公开(公告)日:2017-06-09

    申请号:CN201710018350.4

    申请日:2017-01-11

    Abstract: 本发明公开了一种牛PDHB基因腺病毒干扰载体构建及其鉴定方法,序列为:SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3。构建方法包括:载体用BamH I,EcoR I双酶切;酶切完成后胶回收;目的片断利用3’和5’的单链退火获得:目的片段与载体连接反应;转化感受态细胞:DH5a;转化后挑菌,摇菌14小时,测序;将重组腺病毒载体质粒PDHB shRNA与pHBAd‑BHG骨架载体共转染HEK293A细胞,获得重组腺病毒Ad‑PDHB shRNA。本发明的shRNA1、shRNA2和shRNA3对PDHB基因的干扰效率分别为:95.12%、12.69%和97.76%。

    一种改进的诱导牛肌内脂肪细胞成脂分化的方法

    公开(公告)号:CN109679898A

    公开(公告)日:2019-04-26

    申请号:CN201811547560.3

    申请日:2018-12-18

    CPC classification number: C12N5/0653 C12N2501/33

    Abstract: 本发明涉及一种改进的诱导牛肌内脂肪细胞成脂分化的方法,该方法将牛肌内脂肪细胞培养于含有10%胎牛血清的DMEM/F12培养基中,在牛肌内脂肪细胞汇合达到100%的2天后,加入诱导分化剂处理2天,所述的诱导分化剂的组成为:3-异丁基-1-甲基黄嘌呤:0.5mM,地塞米松:1μM,胰岛素:10μg/ml,Rosiglitazone:2μmol/L。采用该方法可以明显提高其成脂分化能力,缩短诱导试验所需时间,为今后开展脂肪细胞诱导分化试验提供了了新的方法。

    一种秦川牛体尺及肉质性状相关的SNP分子标记及其应用

    公开(公告)号:CN114921568B

    公开(公告)日:2023-04-07

    申请号:CN202210597655.6

    申请日:2022-05-30

    Abstract: 本发明公开了一种与秦川牛体尺及肉质性状相关的SNP分子标记,位于R3HDM1基因核苷酸序列(XM 024980895.1)第14外显子的多态性T/C位点,即g.62029166T/C位点;该位点与秦川牛体斜长、腰高、胸深、背膘厚、眼肌面积、眼肌深度性状显著相关。可以用于制备检测R3HDM1基因g.62029166T/C位点基因型试剂盒的应用,可提前预测肉牛体尺及肉质性状并用于早期肉用选种,加快肉牛遗传进展,节约生产成本。同时,提供了用于SNP位点检测的试剂盒和操作方法,可实现对肉牛群体快速检测并判定个体基因型,用于犊牛早期选种留种可加快肉牛肉用选育进程。

    一种秦川肉牛肌内脂肪细胞分离的方法

    公开(公告)号:CN109486752B

    公开(公告)日:2022-05-27

    申请号:CN201811547543.X

    申请日:2018-12-18

    Abstract: 本发明涉及一种秦川肉牛肌内脂肪细胞的分离纯化和鉴定方法,使用II型胶原酶对秦川肉牛背最长肌进行消化,经II型胶原酶消化后的组织块用含有10%胎牛血清的DMEM/F12培养基中和,经过滤、离心得到细胞,细胞再经洗涤、离心后重悬于含有10%FBS的DMEM/F12培养基中,计数后,将细胞接种在培养皿中,在CO2培养箱中培养1.5小时,用无菌磷酸缓冲盐溶液洗涤除去非粘附细胞,然后将细胞培养在37℃、CO2浓度为5%的培养箱中,每隔2天换一次培养基,待细胞汇合度达到70%‑80%后,进行细胞免疫荧光标记阳性细胞鉴定。该方法获得的肉牛肌内脂肪细胞具有较高的前脂肪细胞阳性比率,为提高肌内脂肪沉积的同时不增加皮下及内脏脂肪沉积的研究奠定了基础。

    一种秦川牛体尺及肉质性状相关的SNP分子标记及其应用

    公开(公告)号:CN114921568A

    公开(公告)日:2022-08-19

    申请号:CN202210597655.6

    申请日:2022-05-30

    Abstract: 本发明公开了一种与秦川牛体尺及肉质性状相关的SNP分子标记,位于R3HDM1基因核苷酸序列(XM 024980895.1)第14外显子的多态性T/C位点,即g.62029166T/C位点;该位点与秦川牛体斜长、腰高、胸深、背膘厚、眼肌面积、眼肌深度性状显著相关。可以用于制备检测R3HDM1基因g.62029166T/C位点基因型试剂盒的应用,可提前预测肉牛体尺及肉质性状并用于早期肉用选种,加快肉牛遗传进展,节约生产成本。同时,提供了用于SNP位点检测的试剂盒和操作方法,可实现对肉牛群体快速检测并判定个体基因型,用于犊牛早期选种留种可加快肉牛肉用选育进程。

    一种牛PDHB基因腺病毒干扰载体构建及其鉴定方法

    公开(公告)号:CN106811484B

    公开(公告)日:2020-03-10

    申请号:CN201710018350.4

    申请日:2017-01-11

    Abstract: 本发明公开了一种牛PDHB基因腺病毒干扰载体构建及其鉴定方法,序列为:SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3。构建方法包括:载体用BamH I,EcoR I双酶切;酶切完成后胶回收;目的片断利用3’和5’的单链退火获得:目的片段与载体连接反应;转化感受态细胞:DH5a;转化后挑菌,摇菌14小时,测序;将重组腺病毒载体质粒PDHB shRNA与pHBAd‑BHG骨架载体共转染HEK293A细胞,获得重组腺病毒Ad‑PDHB shRNA。本发明的shRNA1、shRNA2和shRNA3对PDHB基因的干扰效率分别为:95.12%、12.69%和97.76%。

    一种秦川肉牛肌内脂肪细胞分离的方法

    公开(公告)号:CN109486752A

    公开(公告)日:2019-03-19

    申请号:CN201811547543.X

    申请日:2018-12-18

    Abstract: 本发明涉及一种秦川肉牛肌内脂肪细胞的分离纯化和鉴定方法,使用II型胶原酶对秦川肉牛背最长肌进行消化,经II型胶原酶消化后的组织块用含有10%胎牛血清的DMEM/F12培养基中和,经过滤、离心得到细胞,细胞再经洗涤、离心后重悬于含有10%FBS的DMEM/F12培养基中,计数后,将细胞接种在培养皿中,在CO2培养箱中培养1.5小时,用无菌磷酸缓冲盐溶液洗涤除去非粘附细胞,然后将细胞培养在37℃、CO2浓度为5%的培养箱中,每隔2天换一次培养基,待细胞汇合度达到70%-80%后,进行细胞免疫荧光标记阳性细胞鉴定。该方法获得的肉牛肌内脂肪细胞具有较高的前脂肪细胞阳性比率,为提高肌内脂肪沉积的同时不增加皮下及内脏脂肪沉积的研究奠定了基础。

    一种大熊猫妊娠诊断辅助装置

    公开(公告)号:CN217660273U

    公开(公告)日:2022-10-28

    申请号:CN202123165499.6

    申请日:2021-12-16

    Abstract: 本实用新型涉及动物设备技术领域,具体为一种大熊猫妊娠诊断辅助装置,包括装置主体,包括侧板,所述侧板的数量为两个,所述侧板相互靠近的一侧皆开设有第一空槽,左侧所述侧板的一面固定安装有控制器;固定结构,包括螺杆,且螺杆的数量为两个,所述螺杆的顶端皆固定安装有摇把,所述螺杆与第一空槽的内壁底端通过轴承活动连接,所述螺杆的外侧皆通过螺纹活动安装有套筒,两个所述套筒相互靠近的一侧皆固定安装有方块。本实用新型通过使用时,转动摇把使得两个皮带皆与大熊猫紧密贴合,从而对大熊猫进行束缚,可以在对大熊猫进行怀孕检测时将大熊猫短暂的束缚固定住,避免因大熊猫乱动影响检测,防止诊断结果不准影响后期治疗。

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