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公开(公告)号：CN109355240A
公开(公告)日：2019-02-19
申请号：CN201811279130.8
申请日：2018-10-30
Applicant: 清华大学 , 广东清大智兴生物技术有限公司
Abstract: 本发明提供了一种重组克雷伯氏菌肺炎杆菌及其应用。本发明的重组克雷伯氏菌肺炎杆菌PdhR基因编码的蛋白功能失活，将该菌用于发酵甘油生产1,3-丙二醇，能够提高厌氧或微氧条件下1，3-丙二醇的产量和得率，有效减低发酵成本，在1，3-丙二醇生产领域具有良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN108192899A
公开(公告)日：2018-06-22
申请号：CN201810036054.1
申请日：2018-01-15
Applicant: 清华大学
Abstract: 本发明提供一种兽疫链球菌乳酸脱氢酶基因突变体及其应用，属于微生物基因工程技术领域。本发明将兽疫链球菌经NTG诱变引起该菌乳酸脱氢酶基因ldhA发生了一个碱基的突变，697位碱基由A突变为G(A697G)，导致其氨基酸序列的233位氨基酸残基由苏氨酸突变为丙氨酸(T233A)，该基因突变体的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，能够使乳酸脱氢酶酶活降低50％以上，进一步证实含有该基因突变体的兽疫链球菌在发酵生产透明质酸的过程中，能够显著降低乳酸的积累，乳酸积累量降低60％以上，透明质酸的产量提高50％以上，具有重要的工业应用前景。
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公开(公告)号：CN106906248A
公开(公告)日：2017-06-30
申请号：CN201710194075.1
申请日：2017-03-28
Applicant: 清华大学
Abstract: 本发明提供了一种利用重组微生物发酵生产1,3‑丙二醇的方法。本发明通过在谷氨酸棒杆菌中过表达内源的磷酸二羟基丙酮磷酸酯酶基因hdpA来强化磷酸二羟基丙酮脱磷酸生成二羟基丙酮，引入外源的甘油脱氢酶将二羟基丙酮转化成甘油，甘油在外源的甘油脱水酶及其激活因子以及醇脱氢酶的作用下最终生成1,3‑丙二醇。谷氨酸棒杆菌能够利用不同的廉价原料进行发酵，还可以使用廉价的玉米浆作为营养成分替代昂贵的酵母粉，可以进一步降低原料的成本，同时解决了生物安全性以及菌株对底物与产物的耐受性问题。同时发酵过程中的菌体可以作为产品，用在饲料添加剂当中。本发明方法副产物少，能够进一步简化1,3‑丙二醇的分离过程。
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公开(公告)号：CN106190997A
公开(公告)日：2016-12-07
申请号：CN201610578975.1
申请日：2016-07-20
Applicant: 清华大学
IPC: C12N9/06 , C12N15/53 , C12N1/21 , C12R1/15 , C12R1/19 , C12P41/00 , C12P13/08 , C12P13/00 , A61K38/44 , A61K35/741 , A61K35/74 , A61P1/14 , A23K20/189 , A23K10/18
CPC classification number: C12N9/0016 , A61K38/00 , A61K2035/11 , C12P13/001 , C12P13/08 , C12P41/00 , C12Y104/01016
Abstract: 本发明提供了一种NADH依赖性的二氨基庚二酸脱氢酶及其应用，本发明的二氨基庚二酸脱氢酶来源于Pseudothermotoga thermarum，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，编码其的基因序列如SEQ ID NO.2所示。本发明的二氨基庚二酸脱氢酶催化L-2-氨基-6-酮庚二酸的氨基化具有很高的活性，其能同时利用NADH和NADPH作为辅因子，且其对NADH的利用效率要远高于NADPH，通过在谷氨酸棒杆菌或大肠杆菌中过表达本发明所提供的二氨基庚二酸脱氢酶基因可以显著的提高赖氨酸的产量，具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN102323539A
公开(公告)日：2012-01-18
申请号：CN201110216891.0
申请日：2011-07-29
Applicant: 清华大学
IPC: G01R31/3183
Abstract: 本发明公开了一种延迟故障的测试向量集的生成方法，涉及集成电路可测性设计领域。所述方法包括步骤：根据两帧电路模型统计实物电路中每个触发器的后继集合和前驱集合；根据所述后继集合，将所述触发器进行分组，按组构造以扫描输入端为根节点的扫描树；所述扫描树中每个分支中的触发器构成一个扫描段，根据所述前驱集合，将所述扫描段通过异或门网络连接到扫描输出端；分阶段对所述扫描输入端进行分组连接，通过ATPG工具生成测试向量集。所述方法，通过对触发器进行分组，以及分阶段生成测试向量集的方式，显著减小了最终的测试向量集，减少了测试数据量。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN101648958B
公开(公告)日：2011-11-16
申请号：CN200910092469.1
申请日：2009-09-15
Applicant: 清华大学
IPC: C07D493/04
Abstract: 本发明涉及一种含有手性二脱水己糖醇的二酐单体的制备方法，属于高分子材料技术领域。首先在无水的溶剂中加入手性二脱水己糖醇，加入的摩尔比为：手性二脱水己糖醇∶溶剂＝1∶30-40；在手性二脱水己糖醇溶液中加入酸吸收剂，加入的摩尔比为：手性二脱水己糖醇∶酸吸收剂＝1∶1-1.2；在混合物中加入1，2，4-偏苯三酸酐酰氯，加入的摩尔比为：手性二脱水己糖醇∶1，2，4-偏苯三酸酐酰氯＝1∶2.1-2.4，在0℃-室温下搅拌反应；对反应物进行抽滤，将滤液缓慢滴加进石油醚中，析出白色固体。本发明的制备方法，其优点是原料价格低廉，制备的反应条件温和，易控制，反应转化率高，反应后提纯也比较简单。
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公开(公告)号：CN120082489A
公开(公告)日：2025-06-03
申请号：CN202510109494.5
申请日：2025-01-23
Applicant: 清华大学
IPC: C12N1/21 , C07K14/195 , C12N9/10 , C12N9/04 , C12N9/02 , C12N15/31 , C12N15/53 , C12N15/54 , C12P7/18 , C12R1/19
Abstract: 本发明涉及基因工程和生物发酵技术领域，具体公开了一种可发酵生产1,6‑己二醇的重组微生物及其构建方法和应用。本发明的重组微生物与出发菌株相比，表达己二酸转运蛋白DcaK和DcaP、酰基CoA转移酶DcaI和DcaJ、醛脱氢酶变体bldL273T、羧酸还原酶CAR变体以及CAR激活酶sfp；所述羧酸还原酶CAR变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示。本发明提供了一种利用重组微生物，通过发酵将己二酸高效转化为1,6‑己二醇的新方法，该方法具有生产成本低、可在常温常压条件下直接操作的优点，为1,6‑己二醇绿色生物合成提供了新的方法。
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公开(公告)号：CN117683771A
公开(公告)日：2024-03-12
申请号：CN202311466406.4
申请日：2023-11-06
Applicant: 清华大学 , 北京绿色康成生物技术有限公司
Abstract: 本发明涉及生物化工技术领域，具体公开了谷氨酸棒杆菌启动子库及其应用。本发明的启动子库，包含核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的启动子，其中，n代表a、t、c、g中的任意一种。本发明构建的启动子库具有不同表达强度的启动子，尤其具备高强度表达的启动子，可根据基因表达需求，从启动子库中选择合适的启动子用以更精准地调控基因的表达量。
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公开(公告)号：CN113122491B
公开(公告)日：2022-08-02
申请号：CN202110328492.7
申请日：2021-03-26
Applicant: 清华大学
Abstract: 本发明涉及微生物发酵技术领域，具体公开了一种产N‑乙酰神经氨酸的重组微生物及其应用。本发明提供了一种重组微生物，所述重组微生物与出发菌株相比，具有降低的丙酮酸激酶的表达和/或酶活性；所述丙酮酸激酶为丙酮酸激酶I和/或丙酮酸激酶II；所述出发菌株为能够合成N‑乙酰神经氨酸的微生物。本发明的重组微生物与能够合成N‑乙酰神经氨酸的出发菌株相比，具有降低的丙酮酸激酶的表达和/或酶活性。其特别适于利用葡萄糖这一廉价低碳原料进行发酵培养生成N‑乙酰神经氨酸。本发明的重组微生物合成N‑乙酰神经氨酸发酵水平高，显著降低了N‑乙酰神经氨酸的生产成本，具有工业化潜力。
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公开(公告)号：CN112175893B
公开(公告)日：2022-06-17
申请号：CN202010924133.3
申请日：2020-09-04
Applicant: 清华大学
Abstract: 本发明涉及微生物发酵技术领域，具体涉及一种产唾液酸的重组微生物及其应用。本发明提供一种重组微生物，其与能够合成唾液酸的出发菌株相比，具有提高的6‑磷酸葡萄糖胺合成酶或其突变体的表达，以及提高的果糖‑1,6‑双磷酸酯酶和/或谷氨酰胺合成酶的表达。本发明通过对微生物进行改造获得了能够以葡萄糖、甘油等廉价碳源为原料发酵生产唾液酸的重组微生物，该重组微生物的唾液酸产量得到了显著提高，实现了从葡萄糖、甘油等廉价碳源到唾液酸的高效转化，显著降低了唾液酸的生产成本，具有重要的工业应用价值。
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