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公开(公告)号：CN102212585B
公开(公告)日：2013-06-05
申请号：CN201110108817.7
申请日：2011-04-28
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种酵母展示脂肪酶催化合成淀粉磷酸酯的方法，包括：将谷物淀粉溶于水，吸涨后加入NaH2PO4和酵母展示脂肪酶，在55～65℃下搅拌反应1～1.5小时，分离、纯化制得淀粉磷酸酯。所述的酵母展示脂肪酶制备方法为：将线性化处理的重组质粒转入毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115，将所得转化子接种于BMMY培养基中，诱导培养72～144小时后离心收集菌体，菌体经冲洗、生物印迹和冷冻干燥制得酵母展示脂肪酶。本发明通过将脂肪酶展现在细胞外，利用该酶制剂催化合成淀粉磷酸酯，不仅提高了转化效率，而且缩短了反应时间，降低了生产成本。
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公开(公告)号：CN102488122B
公开(公告)日：2013-03-20
申请号：CN201110407012.2
申请日：2011-12-08
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种红茶菌果冻及其制备方法。以重量百分比计，该红茶菌果冻包括以下原料：红茶菌发酵液15-30％，红茶粉0.01-0.05％，胶凝剂0.8-1.4％，白砂糖10-18％，酸味剂适量，稳定剂适量，食品防腐剂适量，水45-75％。本发明利用我国传统的特色资源红茶菌，将具有多种功效的红茶菌发酵液加入果冻的成分配料中，制备工艺简单易行，生产成本低，并且能有效防止茶叶浸出物、红茶菌发酵液和红茶粉中热敏性有益成分的破坏。所制得的红茶菌果冻具有红茶菌独特的发酵风味，营养丰富，色泽自然，弹韧性好，酸甜适口，爽滑细腻，具有清理肠胃、帮助消化等保健功效，市场前景较好。
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公开(公告)号：CN102907643A
公开(公告)日：2013-02-06
申请号：CN201210408149.4
申请日：2012-10-23
Applicant: 浙江大学
IPC: A23L1/218
CPC classification number: Y02A40/946
Abstract: 本发明公开了一种榨菜腌制工艺，包括：初腌，将洗净的鲜菜头置于腌制容器中，添加食盐和接入乳酸菌后，进行密封腌制；复腌，初腌结束后，再次添加食盐和接入乳酸菌，直至腌制完成。本发明在榨菜腌制过程中，将分次接种乳酸菌与分次加盐相结合，相对于现有的一次接种腌制法，复腌时再次接种乳酸菌可防止腌制后期卤水pH回升，增加益生乳酸菌数量，降低亚硝酸盐峰值，更好地防止腐败，并且能增加卤水中氨基态氮含量，显著提高榨菜风味。不仅减少食盐使用量，还明显缩短腌制时间。
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公开(公告)号：CN102888388A
公开(公告)日：2013-01-23
申请号：CN201210316415.0
申请日：2012-08-30
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种固体发酵生产阿魏酸酯酶的方法，包括制备种子液、接种和发酵，所述发酵的菌种为黑曲霉(Aspergllus niger)CGMCC No.6152；所述发酵的培养基由碳源、氮源、无机盐和无菌水组成，其中碳源为麸皮、玉米棒粉、豆粕和稻草粉中的至少一种。本发明所生产的阿魏酸酯酶的酶活力高，且发酵所采用的原料不需要经过特殊的前处理，直接利用农业副产物发酵，工艺简单，降低了生产成本的同时减少了污染。
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公开(公告)号：CN102286110B
公开(公告)日：2012-11-21
申请号：CN201110263958.6
申请日：2011-09-07
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种酵母展示型聚半乳糖醛酸酶协同超声波处理提取紫菜多糖的方法，包括：将紫菜干粉、酵母展示型聚半乳糖醛酸酶加入水中混匀，于35～37℃搅拌反应30～45分钟，再于28～35℃利用功率为730～750W的超声波破碎1～2小时，得到细胞破碎液，分离纯化制得紫菜多糖。本发明通过将聚半乳糖醛酸酶展示在毕赤酵母细胞外，利用该酶制剂协同超声波处理破碎紫菜细胞，工艺简便、条件温和、易于控制、安全可靠，能获得较高得率、较高纯度的紫菜多糖。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102321596B
公开(公告)日：2012-11-14
申请号：CN201110260328.3
申请日：2011-09-05
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种酵母展示型脂肪酶协同超声波破碎紫菜细胞的方法，包括：将紫菜干粉、酵母展示型脂肪酶加入水中混匀，35～37℃下酶解反应30～45min后于30～32℃下利用功率为730～750W的超声波破碎65～70min；本发明还公开了一种提取紫菜蛋白和紫菜多糖的方法，将上述紫菜细胞破碎后的细胞破碎液分离即可；本发明还公开了一种制备紫菜降血压肽的方法，即将分离的紫菜蛋白利用蛋白酶在在36～37℃下酶解反应130～133min即可。本发明的方法利用酵母展示脂肪酶对紫菜细胞的细胞膜进行降解并协同超声波处理，高效破碎紫菜细胞，提高紫菜细胞破碎率，增加紫菜多糖、紫菜蛋白和紫菜降血压肽的得率。
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公开(公告)号：CN102286442B
公开(公告)日：2012-08-29
申请号：CN201110257798.4
申请日：2011-09-02
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种烟曲霉发酵生产阿魏酸酯酶的方法，将经活化的烟曲霉(Aspergillus fumigatus)CGMCC No.3.5835接种于培养液中，并在25～30℃下发酵培养2～6天；其中，所述的培养液由玉米粉或麸皮与基础液体培养基组成。采用本方法，以玉米粉为发酵培养基的主要原料，烟曲霉通过液体发酵在第4～5天产阿魏酸酯酶酶活稳定达到98U/L以上。本发明原料来源广泛，菌株生长繁殖快；工艺简单，条件温和，易于控制；且产阿魏酸酯酶酶活较高，稳定性好，酶活测定方便，为阿魏酸酯酶的工业化生产提供新思路。
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公开(公告)号：CN101871924B
公开(公告)日：2012-07-18
申请号：CN201010187676.8
申请日：2010-05-31
Applicant: 浙江大学
IPC: G01N30/89
Abstract: 本发明公开了一种同步检测啤酒花中黄腐酚、异黄腐酚和8-异戊烯基柚皮素方法，包括：用有机溶剂提取含啤酒花的待测样品，过滤，所得滤液用有机溶剂定容，获得样品待测液；采用反相碳十八色谱柱和紫外可见分光检测器，流动相为乙腈和水相的混合溶液，流速为0.7ml/min～1ml/min，采用梯度洗脱，在双检测波长350nm～390nm和260nm～290nm分析样品待测液，得到样品待测液的色谱图；所述的水相为甲酸质量百分比浓度为0.5％～1.5％的甲酸水溶液；将样品待测液的色谱图上的峰面积在标准工作曲线上回归，计算含啤酒花的待测样品中黄腐酚、异黄腐酚和8-异戊烯基柚皮素的含量。该方法的精密度高，操作简单。
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公开(公告)号：CN101906448B
公开(公告)日：2012-07-11
申请号：CN201010104264.3
申请日：2010-02-02
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种生物合成川芎嗪的方法，利用紫红曲菌种(Monascus purpureusTMP-001)，包括以下步骤：A)、在无菌环境下将紫红曲菌种转接于麦芽汁琼脂培养基上活化培养；B)、将步骤A)所得的培养物洗入无菌水中，制成孢子悬浮液；然后将孢子悬浮液转移到种子培养基中培养；得种子液；C)、将种子液转接到基础发酵培养基中培养，得含有川芎嗪的液体发酵产物。采用该方法生物合成川芎嗪，具有转化反应易于控制、安全性高等特点。
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公开(公告)号：CN102517225A
公开(公告)日：2012-06-27
申请号：CN201110446693.3
申请日：2011-12-28
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种表面展示淀粉酶的重组酿酒酵母及构建方法和应用。该重组酿酒酵母的构建方法为：将淀粉酶基因插入酿酒酵母表达载体pGMAK中GAL1启动子下游MFα1信号肽与酿酒酵母的细胞壁α凝集素基因之间，构建获得重组质粒；采用同源重组技术将酿酒酵母的GAL1基因替换为GAL4基因，将所述重组质粒转入该细胞，获得重组酿酒酵母。本发明通过同源重组技术获得了具有双重GAL4基因的重组酿酒酵母，可有效提高GAL1启动子表达效率；同时，细胞壁α凝集素能将淀粉酶高密度展示表达在酿酒酵母细胞壁外表面。利用该重组酿酒酵母表面展示淀粉酶，表达效率较高，表达量较大，能获得较高酶活的淀粉酶，且酵母发酵培养后可直接作为淀粉酶制剂使用。
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