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公开(公告)号：CN109266566A
公开(公告)日：2019-01-25
申请号：CN201811188465.9
申请日：2018-10-12
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种调节光滑球拟酵母渗透压胁迫的方法，属于生物工程领域。本发明通过过量表达或缺失本源转录因子的编码基因CgRDS2来调节光滑球拟酵母的抗渗透压胁迫能力。结果表明，光滑球拟酵母缺失CgRDS2基因后，与野生型菌株相比，在渗透压胁迫条件下生物量可降低23％，细胞活性下降46％，细胞膜完整性降低47.6％；过表达CgRDS2基因后，菌株在1.5M NaCl胁迫条件下，生物量增加10％，细胞活性增加39％，细胞膜完整性增加12.1％。
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公开(公告)号：CN104630297B
公开(公告)日：2018-07-06
申请号：CN201410746816.9
申请日：2014-12-10
Applicant: 江南大学
IPC: C12P9/00
Abstract: 本发明阐述了一种酶法非水相催化合成(R)‑3‑TBDMSO戊二酸甲单酯及其衍生物，属于生物工程技术领域。本发明涉及瑞舒伐他汀钙(Rosuvastatin)的制备，尤其是其中一关键中间体的制备方法。本发明公开一种采用Novozyme435酶法催化合成(R)‑3‑TBDMSO戊二酸单酯(R‑J6)及其衍生物的方法，采用本方法对酶转化条件进行了优化，反应24h后R‑J6产物含量可达67.1g/L，优化后的R‑J6的产量是优化前(优化前为4.5g/L)的14.倍；正交实验发现酶催化的影响因素主次顺序为：底物浓度＞醇酐摩尔比＞酶浓度；最优的酶转化体系为底物浓度250g/L，酶浓度60g/L，醇酐摩尔比2∶1，溶剂为异辛烷，催化温度为35℃，酶转化24h后，转化液中R‑J6含量可达68.9g/L，生产强度2.87(g/L·h)。
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公开(公告)号：CN107267405A
公开(公告)日：2017-10-20
申请号：CN201710525209.3
申请日：2017-06-30
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种提高光滑球拟酵母酸耐受能力的方法，属于生物工程领域。本发明利用过表达Med15B，使光滑球拟酵母在pH 2.0条件下，最终生物量提高59.2％，在pH 2.0条件下，12h时细胞生长量较出发菌株增加73.8％，细胞膜酵母甾醇、粪甾醇和麦角甾醇的含量分别提高了970％、16.6％和94.5％，细胞膜完整性和流动性增强，细胞低pH耐受性增大、生长能力增强，丙酮酸发酵能力较出发菌株提高100％。
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公开(公告)号：CN105861574A
公开(公告)日：2016-08-17
申请号：CN201610262363.1
申请日：2016-04-25
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12P7/46
Abstract: 本发明公开了一种利用米曲霉发酵产L?苹果酸的方法，属于发酵技术领域。本发明以米曲霉为生产菌株，向装液量20％的发酵培养基中，接入10％的孢子悬液，加入60～80g/LCaCO3，30～34℃通风培养120h。本发明采用米曲霉发酵糖质原料生产苹果酸，其产酸水平最高可达103.2g/L，原料价格低廉，成本低；并且，本发明是采用单菌发酵，需要的培养基成分简单，发酵条件简单易控制，还避免了与黄曲霉混合发酵会产生毒素的问题，本发明提供的以糖质原料发酵生产L?苹果酸的工艺具有重要的经济价值。
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公开(公告)号：CN105400813A
公开(公告)日：2016-03-16
申请号：CN201510997621.6
申请日：2015-12-28
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N9/88 , A61K38/00 , C12Y401/01015
Abstract: 本发明公开了一种重组表达人谷氨酸脱羧酶的毕赤酵母基因工程菌，属于基因工程技术领域。本发明将人谷氨酸脱羧酶基因GAD65与载体pPICZα连接构建表达载体pPICZα-hGAD65，电转至毕赤酵母X-33中，获得过量表达人谷氨酸脱羧酶(GAD65)的重组菌株。本发明的重组菌株经摇瓶发酵、Tricine-SDS-PAGE和Western Blot鉴定，证实人源谷氨酸脱羧酶(GAD65)实现了诱导表达，通过对发酵上清液进行分离纯化得到融合蛋白，经过蛋白浓度测定，蛋白hGAD65浓度达到2.36g/L。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN105400770A
公开(公告)日：2016-03-16
申请号：CN201510890264.3
申请日：2015-12-07
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种利用转录因子Crz1p调控光滑球拟酵母酸胁迫抗性的方法，属于生物工程领域。本发明通过对光滑球拟酵母的Cgcrz1基因进行缺失或者过表达，相应降低或者提高了菌株的酸胁迫抗性。本发明还比较了缺失突变菌株Cgcrz1Δ在酸胁迫下细胞膜脂肪酸、甾醇成份及比例和通透性，结果发现Crz1p是光滑球拟酵母抵御酸胁迫的必需转录因子，过表达Crz1p可提高光滑球拟酵母酸胁迫抗性。
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公开(公告)号：CN104745617A
公开(公告)日：2015-07-01
申请号：CN201510179726.0
申请日：2015-04-15
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种促进谷氨酸棒状杆菌生长的方法，属于生物工程领域。本发明通过改造谷氨酸棒状杆菌构建了amn基因缺失菌株△amn，与野生菌株WT相比，基因amn缺失菌株细胞干重提高了16.2％，发酵10h、25h和40h的胞内ATP分别提高了3.0、3.7和2.2倍。amn基因的缺失提高了菌株的胞内ATP水平和生物量。
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公开(公告)号：CN102965414B
公开(公告)日：2014-10-22
申请号：CN201210487801.6
申请日：2012-11-27
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种发酵液中提取硫酸软骨素的方法，即以研究室保藏产硫酸软骨素菌株为生产菌株，在7L罐中发酵后收集发酵液，将发酵液进行预处理，然后用乙醇沉淀和氯仿萃取去除发酵液中的蛋白质等杂质，再利用超滤离心管反复三次离心除去发酵液中的小分子物质，最后将浓缩液真空冷冻干燥48h得到硫酸软骨素纯品。本发明经过浓缩后大大节约了使用乙醇的量，氯仿可以回收利用，同时使用超滤离心管对于小量制备硫酸软骨素纯品更加快捷、方便。
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公开(公告)号：CN103388002A
公开(公告)日：2013-11-13
申请号：CN201310309739.6
申请日：2013-07-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明阐述了一种产L-谷氨酸氧化酶重组菌株的构建方法及其应用，属于基因工程与酶学品领域，将重组产生的谷氨酸氧化酶包涵体进行蛋白变性、复性和浓缩，使30％的蛋白包涵体恢复活性，通过对重组酶的酶学性质研究，发现重组酶最适pH8.5，最适温度35℃，Mn2+可以使酶比活力提高20％以上，而外源添加FAD对酶活力没有影响；结合酶学特征，将重组酶添加到含有20g/L的谷氨酸钠pH8.5的缓冲液中，35℃转化12h可以生成8.3g/L的α-酮戊二酸。
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公开(公告)号：CN102286614B
公开(公告)日：2013-09-18
申请号：CN201110166734.3
申请日：2011-06-21
Applicant: 江南大学
Abstract: 调控酸胁迫抑制维生素C发酵菌株产酸的基因，属于发酵制备维生素C的基础研究及生物工程技术领域。确定生产菌株中调控酸胁迫诱导2-酮基-L-古龙酸(2-KLG)产量降低的关键基因有助于制定出针对性强的代谢工程策略。本发明利用表达谱芯片技术分析了维生素C混菌发酵体系中产酸菌的基因表达情况，尤其是膜转运蛋白基因。与单独培养相比，混菌培养的普通生酮基古龙酸菌中共有45个膜转运蛋白基因上调，15个膜转运蛋白基因下调。值得注意的是，这其中有7个铁离子转运蛋白基因被抑制表达。酸胁迫后，铁离子转运蛋白基因却过量表达。发酵时添加铁离子抑制混菌发酵产酸。以上结果表明，铁离子转运蛋白在酸胁迫诱导混菌发酵生产2-KLG产量降低的过程中发挥反作用。
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