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公开(公告)号：CN102220270A
公开(公告)日：2011-10-19
申请号：CN201110127831.1
申请日：2011-05-18
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明阐述了一种产硫酸软骨素枯草芽孢杆菌的筛选方法和用该菌株发酵法生产硫酸软骨素，属于生物工程技术领域。本发明菌株是将豆豉经过沸水浴后稀释涂布，染色镜检得到的有芽孢菌株，然后对筛选出的菌株采用一级发酵逐一摇瓶培养，发酵液中加入鲨鱼硫酸软骨素标准品作为内标，采用高效液相色谱法进行定性分析筛选，并对筛选菌株进行形态学、生理生化及分子生物学鉴定。得到一株产硫酸软骨素的枯草芽孢杆菌。本发明同时公开一种采用该菌株生产硫酸软骨素的方法，采用本方法发酵24h硫酸软骨素产量为177mg/L。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102965414B
公开(公告)日：2014-10-22
申请号：CN201210487801.6
申请日：2012-11-27
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种发酵液中提取硫酸软骨素的方法，即以研究室保藏产硫酸软骨素菌株为生产菌株，在7L罐中发酵后收集发酵液，将发酵液进行预处理，然后用乙醇沉淀和氯仿萃取去除发酵液中的蛋白质等杂质，再利用超滤离心管反复三次离心除去发酵液中的小分子物质，最后将浓缩液真空冷冻干燥48h得到硫酸软骨素纯品。本发明经过浓缩后大大节约了使用乙醇的量，氯仿可以回收利用，同时使用超滤离心管对于小量制备硫酸软骨素纯品更加快捷、方便。
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公开(公告)号：CN102220270B
公开(公告)日：2013-05-15
申请号：CN201110127831.1
申请日：2011-05-18
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明阐述了一种产硫酸软骨素枯草芽孢杆菌的筛选方法和用该菌株发酵法生产硫酸软骨素，属于生物工程技术领域。本发明菌株是将豆豉经过沸水浴后稀释涂布，染色镜检得到的有芽孢菌株，然后对筛选出的菌株采用一级发酵逐一摇瓶培养，发酵液中加入鲨鱼硫酸软骨素标准品作为内标，采用高效液相色谱法进行定性分析筛选，并对筛选菌株进行形态学、生理生化及分子生物学鉴定。得到一株产硫酸软骨素的枯草芽孢杆菌。本发明同时公开一种采用该菌株生产硫酸软骨素的方法，采用本方法发酵24h硫酸软骨素产量为177mg/L。
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公开(公告)号：CN102337312A
公开(公告)日：2012-02-01
申请号：CN201110317393.5
申请日：2011-10-19
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公布了一种提高发酵法生产硫酸软骨素产量的方法，属于发酵工程技术领域。本发明以产硫酸软骨素的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtillis BN)为生产菌株，利用单因素和正交实验的方法进行发酵优化，确定接种菌龄为12-13h，发酵周期为32h，最佳种子培养基和发酵培养基组成。本发明有效提高了硫酸软骨素的产量(153％)，为实现发酵法生产硫酸软骨素这一新方法提供借鉴。
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公开(公告)号：CN102965414A
公开(公告)日：2013-03-13
申请号：CN201210487801.6
申请日：2012-11-27
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明阐述了一种发酵液中提取硫酸软骨素的方法，即以研究室保藏产硫酸软骨素菌株为生产菌株，在7L罐中发酵后收集发酵液，将发酵液进行预处理，然后用乙醇沉淀和氯仿萃取去除发酵液中的蛋白质等杂质，再利用超滤离心管反复三次离心除去发酵液中的小分子物质，最后将浓缩液真空冷冻干燥48h得到硫酸软骨素纯品。本发明经过浓缩后大大节约了使用乙醇的量，氯仿可以回收利用，同时使用超滤离心管对于小量制备硫酸软骨素纯品更加快捷、方便。
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公开(公告)号：CN102618597A
公开(公告)日：2012-08-01
申请号：CN201210098057.0
申请日：2012-04-06
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高产荚膜多糖的大肠杆菌基因工程菌，并以此荚膜多糖制备软骨素的方法。通过在大肠杆菌中过量表达荚膜多糖合成基因簇转录调控因子slyA蛋白，促进大肠杆菌荚膜多糖合成基因簇的表达，从而增加大肠杆菌K4生产荚膜多糖。发酵培养该大肠杆菌工程菌后荚膜多糖产量比原菌提高112％，并收集制备获得纯度大于93％的软骨素。本发明为开发硫酸软骨素的发酵法生产技术奠定一定的基础。
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