一种耐酸耐热α-淀粉酶及其制备与应用

    公开(公告)号:CN119931993A

    公开(公告)日:2025-05-06

    申请号:CN202510107377.5

    申请日:2025-01-23

    Abstract: 本发明公开了一种耐酸耐热α‑淀粉酶及其制备与应用。本发明的耐酸耐热α‑淀粉酶是野生型α‑淀粉酶Ba‑amy融合了α‑淀粉酶Gt‑amy N端37个氨基酸,以及删除了178位和179位氨基酸,且332位氨基酸由缬氨酸突变为天冬氨酸而得,其比酶活高达6734U/mg,是野生型酶的13倍;最适pH为5.5,相比于野生型酶下降了0.5个单位,且在pH 4.5下仍保留60%的酶活;热稳定性提高,在90℃下的半衰期相较于野生型酶提高了5.8倍。焦糊精水解结果表明,其能直接在酸性环境下有效辅助糖化酶酶解,避免反应过程反复调节pH,能在提高抗性糊精产率的同时简化工艺流程、减少生产成本,具有广阔应用前景。

    一种兼具高DNA聚合酶活性与逆转录酶活性的重组Bst DNA聚合酶及其制备与应用

    公开(公告)号:CN119592539A

    公开(公告)日:2025-03-11

    申请号:CN202411785671.3

    申请日:2024-12-06

    Abstract: 本发明公开了一种兼具高DNA聚合酶活性与逆转录酶活性的重组Bst DNA聚合酶及其制备与应用。本发明对来源于鸡绒毛蛋白的Headpiece结构域截短体Hp47和来源于嗜热古菌Sulfolobus tokodaii的Sto7d结构域进行了序列重排,并融合至Bst DNA聚合酶大片段的氨基末端,构建了新型Bst DNA聚合酶重排突变体HpSt‑G23。本发明得到的重组聚合酶HpSt‑G23兼具高聚合酶活性与逆转录酶活性,且能够耐受尿素、氯化钠等抑制剂。HpSt‑G23可与TthRecA构建检测体系,同一体系仅用两条引物即可完成DNA或RNA扩增,且大幅提高了RNA模板的检测灵敏度,在核酸检测领域具有良好的发展前景。

    一种抗性糊精粪菌液及其制备方法与在预防大鼠肥胖中的应用

    公开(公告)号:CN118516251A

    公开(公告)日:2024-08-20

    申请号:CN202410439977.7

    申请日:2024-04-12

    Abstract: 本发明公开了一种抗性糊精粪菌液及其制备方法与在预防大鼠肥胖中的应用。本发明方法包括以下步骤:(1)收集:SPF级屏障收集高脂饮食和抗性糊精喂养的大鼠新鲜粪便;(2)搅拌:将大鼠粪便置于离心管,加入生理盐水,搅拌均匀(3)离心:将搅拌后的粪便溶液离心,收集上清液,即为抗性糊精粪菌液。本发明采用抗性糊精粪菌液预防高脂饮食大鼠的肥胖,通过建立模型用于抗性糊精产品生理功能评价,发现,经抗性糊精粪菌液干预后高脂饮食大鼠的体重增长和脂肪蓄积可趋于正常水平,糖耐量受损和肠道菌群结构得到改善,抗性糊精粪菌液预防肥胖效果明显,为肥胖症的治疗和微生物组功能产品的开发提供新思路。

    一种突变型重组月季多酚氧化酶原及其制备方法与应用

    公开(公告)号:CN117603926A

    公开(公告)日:2024-02-27

    申请号:CN202311318969.9

    申请日:2023-10-12

    Abstract: 本发明公开一种突变型重组月季多酚氧化酶原及其制备方法与应用。本发明提供所述突变型重组月季多酚氧化酶原的制备方法,实现高效可溶表达;所述方法简便高效,易于分离纯化,适合工业化生产。与野生型酶相比,所述的突变型重组月季多酚氧化酶的酶学活性提高至2.67倍,其半衰期在40和50℃下分别提高至2.62和3.37倍,表明突变体的酶学活性和稳定性获得显著的提高。本发明还提供所述的突变型重组月季多酚氧化酶原的生物激活方法,实现高效激活。激活的突变型酶活性是未激活野生型酶活性的14.63倍。与野生型月季多酚氧化酶相比,突变酶可更高效催化合成TF1等茶黄素产物,并在这些产物的大规模生产上具有更优的应用前景。

    一种基于深度共熔溶剂提取金线莲苷的方法

    公开(公告)号:CN113817006B

    公开(公告)日:2023-08-18

    申请号:CN202111160733.8

    申请日:2021-09-30

    Inventor: 胡松青 苑歆 侯轶

    Abstract: 本发明公开了一种基于深度共熔溶剂提取金线莲苷的方法,属于植物有效成分提取领域。本发明方法包括以下步骤:S1、原料的预处理;S2、深度共熔溶剂‑水溶液的制备;S3、向所得金线莲粉末加入深度共熔溶剂‑水溶液,混合均匀,进行超声提取或柱提取,得到提取液;提取液分离纯化,得到金线莲苷。本发明采用的深度共熔溶剂由氢键受体试剂和氢键供体试剂以1~3∶3~1的比例制备而成,为绿色溶剂,具有不易挥发,热稳定性高、氢键稳定、生物相容性高等优点。本发明方法原料利用率高,提取溶剂用量少,提取效率高,提取与固液分离一次完成;提取过程中无需加热,操作条件温和,避免了高温高压对活性物质的破坏,且设备工艺简单。

    一种直扩型Bst DNA聚合酶及其制备方法与应用

    公开(公告)号:CN115094047B

    公开(公告)日:2023-06-20

    申请号:CN202210722107.1

    申请日:2022-06-24

    Abstract: 本发明公开了一种直扩型Bst DNA聚合酶及其制备方法与应用。本发明公开的直扩型StoL3Bst是野生型BstDNA聚合酶经截短突变、融合非特异性双链DNA结合蛋白结构域,并采用适当长度的连接子进行连接而成。本发明StoL3Bst可大幅提高DNA聚合酶的延伸速率和抑制剂耐受能力,可耐受高浓度的常见抑制剂,可应用于各种来源的、组成复杂的样本检测,还可直接利用血液样本进行免提取LAMP或qLAMP检测,使得LAMP相关检测更加便捷。本发明还公开了一种qLAMP反应试剂盒,检测特异性高、重复性好,适用于粗提取核酸样本的快速检测,可应用于微生物检测、食品掺假检测、动植物疾病筛查等。

    一种抑制二肽基肽酶IV的四肽及其应用

    公开(公告)号:CN113801192B

    公开(公告)日:2023-06-20

    申请号:CN202111011996.2

    申请日:2021-08-31

    Inventor: 胡松青 叶伟 侯轶

    Abstract: 本发明公开了一种抑制二肽基肽酶Ⅳ的四肽及其应用。本发明的多肽包含4个氨基酸残基,分子量为511.27,理论等电点为3.70,其氨基酸序列为:色氨酸‑脯氨酸‑亮氨酸‑脯氨酸(Trp‑Pro‑Leu‑Pro)。本发明的多肽来源于食用酵母酶解产物,可通过固相合成制备。本发明的多肽具有良好的二肽基肽酶Ⅳ抑制活性,其IC50值为178.90μmol/L,且与低剂量浓度西格列汀(30%抑制率)具有协同抑制作用,可用于降血糖功能药品的开发与制备,具有良好的应用前景。

    一种高效表达具有高活性的重组多肽连接酶原的方法

    公开(公告)号:CN114854782A

    公开(公告)日:2022-08-05

    申请号:CN202210514990.5

    申请日:2022-05-12

    Abstract: 本发明公开了一种高效表达具有高活性的重组多肽连接酶原的方法。本发明方法是将含有编码序列如SEQ ID NO.1所示重组多肽连接酶原的DNA分子以及序列如SEQ ID NO.3所示核糖体结合位点的重组表达载体转化入工程细胞E.coli Rosetta gami B(DE3)后,再进行诱导表达。该方法将重组多肽连接酶酶活得率从160.88U/L发酵液提高到7448.40U/L发酵液,提高了约46倍。本发明所述方法简便高效,原料简单,分离纯化易行,易于大量表达,适合工业化生产,具有广阔的应用前景。

    一种具有血管内皮细胞保护功能的抗氧化五肽及其应用

    公开(公告)号:CN114657162A

    公开(公告)日:2022-06-24

    申请号:CN202210212001.7

    申请日:2022-03-04

    Abstract: 本发明公开了一种具有血管内皮细胞保护功能的抗氧化五肽及其应用。所述的抗氧化五肽包含5个氨基酸残基,分子量为679.76g/mol,理论等电点为11.05,氨基酸序列为:亮氨酸‑丙氨酸‑组氨酸‑苯丙氨酸‑精氨酸。本发明的五肽来源于食用酵母酶解产物,可通过固相合成制备。本发明的多肽具有良好的抗氧化活性,对由H2O2诱导的血管内皮细胞氧化损伤有显著保护作用,可用于抗氧化功能食品的开发与制备,具有良好的应用前景。

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