公开(公告)号：CN118773140A

公开(公告)日：2024-10-15

申请号：CN202411082823.3

申请日：2024-08-08

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 袁晓龙 ,  何颖婷 ,  李加琪 ,  张哲 ,  周小枫 ,  李硕 ,  杨景昊

IPC: C12N5/10 ,  C12N15/113 ,  C12N15/12 ,  C12Q1/6851 ,  G01N33/68 ,  G01N21/76

Abstract: 本发明公开了RSPO3在卵巢颗粒细胞中调控P62蛋白表达水平的应用。本发明通过实验发现，过表达RSPO3抑制卵巢颗粒细胞自噬，干扰RSPO3促进卵巢颗粒细胞自噬；过表达RSPO3基因促进卵巢颗粒细胞中P62蛋白的表达水平，干扰RSPO3基因抑制卵巢颗粒细胞中P62蛋白的表达水平；还发现RSPO3蛋白的FU结构域能与P62蛋白结合，而经褪黑素处理后可以显著促进RSPO3与P62的结合。因此，可通过RSPO3调控卵巢颗粒细胞中P62蛋白的表达水平。

公开(公告)号：CN115011599B

公开(公告)日：2024-05-10

申请号：CN202210596549.6

申请日：2022-05-30

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 袁晓龙 ,  李泳光 ,  李加琪 ,  方明 ,  吕嫒媛 ,  张哲 ,  张豪

IPC: C12N15/113 ,  C12N5/10 ,  C12N9/64 ,  C12N15/57

Abstract: 本发明公开一种DNA甲基化调控MMP2基因转录的方法，属于细胞工程和基因工程技术领域。本发明以MMP2基因启动子区DNA甲基化以及MMP2基因为研究对象，通过分析MMP2基因在卵泡发育过程中的表达与甲基化水平的关联，然后利用5‑Aza‑CdR或DNMT1‑siRNA、DNMT3A‑siRNA和DNMT3B‑siRNA验证MMP2基因启动子低甲基化促进其表达。本发明通过探究DNA甲基化调控MMP2基因转录表达机制的应用，对研究MMP2基因启动子区的DNA甲基化影响卵巢卵泡发育以及母猪初情启动等的分子机制具有一定的应用价值。

公开(公告)号：CN117866956A

公开(公告)日：2024-04-12

申请号：CN202311416318.3

申请日：2023-10-30

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 张哲 ,  周小枫 ,  袁晓龙 ,  李加琪 ,  何颖婷 ,  张豪 ,  李念

IPC: C12N15/113 ,  C12N5/10 ,  C12N15/85 ,  A61K31/713 ,  A61P15/00

Abstract: 本发明公开一种lncRNA SFFD及其在猪卵巢颗粒细胞中的应用，属于细胞工程和基因工程技术领域。本发明以lncRNA SFFD为研究对象，通过构建lncRNA SFFD超表达载体和合成siRNA，分别将lncRNA SFFD超表达载体或siRNA转染到卵巢颗粒细胞，然后检测与卵巢颗粒细胞凋亡、增殖以及E2分泌相关的信号通路基因mRNA以及蛋白水平的变化，最后再检测卵巢颗粒细胞的表型变化。结果表明，lncRNA SFFD可抑制卵巢颗粒细胞的凋亡和促进增殖以及E2分泌。本发明通过探究lncRNA SFFD对卵巢颗粒细胞的影响，为研究卵巢卵泡闭锁以及性成熟延迟等机制具有很好的应用价值。

公开(公告)号：CN117625687A

公开(公告)日：2024-03-01

申请号：CN202311416324.9

申请日：2023-10-30

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 李加琪 ,  张哲 ,  周小枫 ,  袁晓龙 ,  张豪 ,  何颖婷 ,  李硕 ,  李念

IPC: C12N15/85 ,  C12N5/10 ,  C12N15/113 ,  C12N15/53

Abstract: 本发明公开一种miR‑202‑3p调控COX1表达在猪卵巢颗粒细胞中的应用。本发明以miR‑202‑3p为研究对象，采用了分子和细胞生物学方法研究其在猪卵巢颗粒细胞中的应用，结果表明，miR‑202‑3p可下调COX1表达，促进卵巢颗粒细胞的凋亡和抑制增殖以及E2分泌。本发明通过探究miR‑202‑3p在卵巢颗粒细胞中的应用，对于研究卵巢卵泡闭锁以及卵泡发育等机制具有很好的应用价值。本发明技术方案设计周详，结果可靠。为证实miR‑202‑3p对卵巢颗粒细胞增殖、凋亡以及E2分泌的影响，本发明从多层次、多角度验证，在相关信号通路基因及mRNA水平验证，最后在卵巢颗粒细胞的表型上验证。

公开(公告)号：CN116808062A

公开(公告)日：2023-09-29

申请号：CN202310792006.6

申请日：2023-06-30

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 李加琪 ,  全洪燕 ,  张豪 ,  袁晓龙 ,  张哲 ,  何颖婷 ,  林晨楠 ,  胡梦婷 ,  杨景昊

IPC: A61K31/7088 ,  A61P15/00 ,  C12Q1/6851 ,  G01N33/573 ,  G01N33/74

Abstract: 本发明公开了PLPP3基因在调控卵巢颗粒细胞E2生成中的应用，属于细胞工程和基因工程技术领域。本发明首次发现，PLPP3过表达显著降低了人卵巢颗粒细胞中上清液中E2水平，而抑制PLPP3表达显著提高了颗粒细胞上清液中E2水平；PLPP3过表达显著降低了小鼠血清中E2水平，而抑制PLPP3表达显著提高了小鼠血清中E2水平。本发明对研究PLPP3在卵巢卵泡发育、繁殖能力及卵巢相关疾病中的影响机制具有很好的应用价值。为提高母猪繁殖力提供技术支持，同时对养猪业的实际生产具有重要经济价值。

公开(公告)号：CN116790595A

公开(公告)日：2023-09-22

申请号：CN202310792043.7

申请日：2023-06-30

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 袁晓龙 ,  全洪燕 ,  张哲 ,  李硕 ,  何颖婷 ,  黄恩媛 ,  张柳红 ,  陈永财

IPC: C12N15/113 ,  C12N9/22 ,  C12Q1/66 ,  G01N33/573

Abstract: 本发明公开一种调控人卵巢颗粒细胞中PLPP3转录活性的方法。本发明以PLPP3基因DNA甲基化以及PLPP3为研究对象，通过分析PLPP3在卵泡发育过程中的潜在调控作用，利用5‑Aza‑CdR或DNMT1‑siRNA验证PLPP3低甲基化促进其表达，而通过CpG甲基化处理带来PLPP3高甲基化则抑制了其表达。最后通过dCas9‑DNMT1和gRNA实现定点甲基化找到PLPP3甲基化水平发生变化的具体区域。本发明通过探究DNA甲基化调控PLPP3转录表达机制的应用，对研究PLPP3基因的DNA甲基化参与卵泡发育调控及卵巢衰老分子机制研究具有具有很好的应用价值。

公开(公告)号：CN116785308A

公开(公告)日：2023-09-22

申请号：CN202310792019.3

申请日：2023-06-30

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 张哲 ,  全洪燕 ,  李加琪 ,  袁晓龙 ,  何颖婷 ,  陈永财 ,  张柳红 ,  黄恩媛

IPC: A61K31/7088 ,  A61P15/00 ,  C12Q1/6851 ,  G01N33/573

Abstract: 本发明公开了PLPP3调控细胞氧化应激在人卵巢颗粒细胞中的应用，属于细胞工程和基因工程技术领域。本发明首次发现，超表达PLPP3基因，能够显著提高人卵巢颗粒细胞氧化应激水平，抑制颗粒细胞增殖，促进颗粒细胞凋亡；而干扰PLPP3基因的表达，则显著降低人卵巢颗粒细胞氧化应激水平，促进颗粒细胞增殖，抑制颗粒细胞凋亡，进而促进卵泡发育。本发明对研究氧化应激调控在卵巢卵泡发育、繁殖能力及卵巢相关疾病中的影响机制具有很好的应用价值，在卵巢功能保护和卵巢相关疾病治疗中具有重要的临床价值。

公开(公告)号：CN114875029B

公开(公告)日：2023-08-29

申请号：CN202210605334.6

申请日：2022-05-31

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 袁晓龙 ,  周小枫 ,  张哲 ,  李加琪 ,  何颖婷 ,  潘向春 ,  全洪燕

IPC: C12N15/113 ,  C12N5/10 ,  C12N5/071 ,  C12N15/85 ,  C12Q1/6888 ,  C12Q1/686

Abstract: 本发明公开一种调控猪卵巢颗粒细胞中lncRNA IFFD转录表达的方法，属于细胞工程和基因工程技术领域。本发明以lncRNA IFFD启动子区DNA甲基化以及lncRNA IFFD为研究对象，通过分析lncRNA IFFD在卵泡发育过程中的表达与甲基化水平的关联，然后利用DNMT1‑siRNA验证lncRNA IFFD启动子低甲基化促进其表达，最后找到lncRNA IFFD启动子CGI区的低甲基化招募转录因子SP1的结合，进而促进lncRNA IFFD的转录表达。本发明对研究lncRNA IFFD启动子区DNA甲基化参与卵巢卵泡闭锁以及初情启动等的分子机制具有很好的应用价值。

公开(公告)号：CN114941010B

公开(公告)日：2023-08-15

申请号：CN202210582497.7

申请日：2022-05-26

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 张哲 ,  云冰 ,  李加琪 ,  杨景昊 ,  方明 ,  张豪 ,  袁晓龙 ,  陈赞谋

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/12 ,  C12N15/113 ,  C12N5/10 ,  A61K38/17 ,  A61P15/00 ,  A61P15/08

Abstract: 本发明公开了TAB2在猪卵巢颗粒细胞中的应用，属于细胞工程和基因工程技术领域。本发明以TAB2为研究对象，通过构建TAB2的过表达载体和合成其RNA的小干扰片段，检测TAB2对猪卵巢颗粒细胞增殖、凋亡和周期的影响。本发明验证了TAB2对猪卵巢颗粒细胞功能的影响：TAB2能促进猪卵巢颗粒细胞增殖，抑制猪卵巢颗粒细胞凋亡，对猪卵巢颗粒细胞周期分布无显著影响。本发明对于研究卵巢卵泡发育、闭锁的机制具有很好的应用价值。

公开(公告)号：CN115992179A

公开(公告)日：2023-04-21

申请号：CN202211048041.9

申请日：2022-08-30

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 袁晓龙 ,  李加琪 ,  李念 ,  张哲 ,  张豪 ,  郭懿萱 ,  李硕 ,  胡梦婷

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/113 ,  C12N15/12 ,  C12N5/10 ,  A61K31/7105 ,  A61P15/08

Abstract: 本发明公开了lncRNA IFA调控ACTG1在猪卵巢颗粒细胞中表达的应用。本发明通过预测lncRNA IFA序列中与ACTG1的mRNA互补的序列，通过Pull down及实验检测了lncRNA IFA与ACTG1mRNA的结合；通过qPCR检测了lncRNA IFA与ACTG1在不同发育阶段卵泡的颗粒细胞中的表达量，在过表达和干扰lncRNA IFA后检测了ACTG1的表达水平，发现lncRNA IFA可以促进ACTG1的表达；在过表达和干扰ACTG1后通过CCK8、EdU、流式细胞术检测到ACTG1可以促进卵巢颗粒细胞的增殖、抑制凋亡，同时增强卵巢颗粒细胞的细胞活性，加快卵巢颗粒细胞的细胞周期进程，为ACTG1的表达调控机制研究积累了材料。