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公开(公告)号：CN103421856A
公开(公告)日：2013-12-04
申请号：CN201210246546.6
申请日：2012-07-17
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12P17/18 , C07D493/10 , C12R1/77
CPC classification number: Y02P20/582
Abstract: 本发明属于兽医药理学技术领域，具体涉及一种T-2毒素的制备方法。以玉米颗粒为原料，经产毒镰刀菌复苏，产分生孢子，接种玉米产毒培养基培养，在产毒高峰期对培养基采用乙醇液提取、二氯甲烷萃取、一步柱层析和结晶等工艺过程，获得T-2毒素结晶的提取方法。整个提取效率可达89%，所得毒素经核磁和质谱结构鉴定正确无误，测定含量不低于95.66%，稳定性至少4个月以上。与传统提取工艺比较，本发明采用一步法柱层析即可分离纯化出大量T-2毒素，步骤简单快捷产量高，所制备的毒素性质稳定纯度高，整个提取方法极大的降低了毒素合成成本，简化了毒素合成工艺，合成的毒素可以广泛应用于毒理学、代谢实验等各种毒素相关科研领域。
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公开(公告)号：CN103421019A
公开(公告)日：2013-12-04
申请号：CN201210434826.X
申请日：2012-11-02
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07D493/10
Abstract: 本发明涉及生物毒素脱氧雪腐镰刀菌烯醇的微量氚标记的制备法。其包括以脱氧雪腐镰刀菌烯醇为原料，以苯硼酸保护7α,15位的两个羟基，通过斯文氧化（Swern Oxidation）将3位羟基氧化。然后以异丙醇为溶剂，采用氚标记硼氢化钠选择性还原3位羰基，得到氚标记脱氧雪腐镰刀菌烯醇。本发明的合成方法原料易得、反应条件温和、易操作，获得的氚标记化合物标记位点明确、稳定。产物的化学纯度和放化纯度均不低于98%，比活度为2.52Ci/mmol。本发明为深入开展脱氧雪腐镰刀菌烯醇的毒作用机制及食品安全性评价提供了重要的物质基础。
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公开(公告)号：CN103420934A
公开(公告)日：2013-12-04
申请号：CN201310226349.2
申请日：2013-06-07
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07D263/26
Abstract: 本发明属于兽药残留分析领域，具体涉及一种用于兽药残留检测的呋喃它酮残留标志物5-甲基吗啉-3-氨基-2-噁唑烷基酮的化学合成新方法，其特征在于：以水合肼与吗啉基环氧丙烷为原料，在碱性条件下反应，得到中间体1-肼基-3-吗啉-2-丙醇，接着在碱性条件下与取代的甲酸酯反应，得到目标产物5-甲基吗啉-3-氨基-2-噁唑烷基酮。本发明首次提供了5-甲基吗啉-3-氨基-2-噁唑烷基酮(AMOZ)的完整合成方法，其合成步骤简单，易操作，反应条件温和。
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公开(公告)号：CN103288964A
公开(公告)日：2013-09-11
申请号：CN201210049837.6
申请日：2012-02-29
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K16/44 , C12N5/20 , G01N33/577 , G01N33/543 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种阿苯达唑-2-氨基砜残留检测用单克隆抗体及制备方法和应用，杂交瘤细胞GA/2A11，CCTCCNO:C201142。其步骤是：a、将半抗原阿苯达唑-2-氨基砜与牛血清白蛋白偶联得到免疫原；b、将半抗原阿苯达唑-2-氨基砜与卵清蛋白偶联得到包被原；c、利用免疫原制备得到杂交瘤细胞株；d、用包被原包被固相载体；e、将待测样品用乙酸乙酯在氢氧化钾条件下提取得到待测物；f、对待测物进行酶联免疫检测；试剂盒包括：⑴包被有包被原ABZSO2NH2-GA-OVA的酶标板；⑵ABZSO2NH2标准品溶液；⑷辣根过氧化物酶标记的羊抗鼠IgG抗体工作液；⑸浓缩磷酸盐缓冲液；⑹浓缩洗涤液；⑺底物混合液；⑼终止液。试剂盒在阿苯达唑-2-氨基砜残留检测中的应用。具有简便、快速、灵敏、准确的特点。
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公开(公告)号：CN103288962A
公开(公告)日：2013-09-11
申请号：CN201210049821.5
申请日：2012-02-29
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K16/44 , C12N5/20 , G01N33/577 , G01N33/543 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种呋喃西林残留标示物氨基脲单克隆抗体及制备方法和应用，杂交瘤细胞SEM/4G6，CCTCC，CCTCCNO:C201150。其步骤：A、将半抗原CPSEM与牛血清白蛋白偶联得到免疫原；B、将半抗原CPSEM与卵清蛋白偶联得到包被原；C、利用步骤A的免疫原制备得到保藏号为CCTCCNO:C201150杂交瘤细胞株SEM/4G6所分泌的单克隆抗体；D用步骤B的包被原包被固相载体；E、将待测样品用酸处理，加入苯甲醛超声衍生后，用乙酸乙酯萃取，取乙酸乙酯层氮气吹干、正己烷净化和样品稀释液重新溶解得到待测物；F、对待测物进行酶联免疫检测。试剂盒在动物可食性组织中呋喃西林残留检测中的应用。方法简便、快速、灵敏、准确，可用于开发能检测动物可食性组织中氨基脲残留的酶联免疫试剂盒。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103288960A
公开(公告)日：2013-09-11
申请号：CN201210049798.X
申请日：2012-02-29
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K16/44 , C12N15/13 , G01N33/543
Abstract: 本发明公开了一种吉他霉素残留检测用基因工程抗体及制备方法和应用，其步骤：A、取液氮保存的杂交瘤细胞株KA/2A9，提取脾细胞总RNA，得到mRNA，在逆转录得到cDNA。B、扩增得到重链可变区、轻链可变区基因；以重链和轻链抗体片段互为引物，利用多肽链将抗体重链和轻链连接；C、将酶切scFv连接入E.coliTG1中，加入M13K07培养，得到吉他霉素特异性抗体的噬菌体抗体文库。D、将噬菌体加入到处于对数生长期的E.coliHB2151中，IPTG诱导，得到特异性噬菌体抗体。E、验证的大肠杆菌表达菌株测序，得到单链抗体氨基酸和核苷酸序列。方法易行，操作简便，便于基因工程抗体的大批量生产。广泛应用于动物可食性组织中吉他霉素的残留检测，提供动物可食性组织中吉他霉素的残留量信息。
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公开(公告)号：CN103288959A
公开(公告)日：2013-09-11
申请号：CN201210049794.1
申请日：2012-02-29
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K16/44 , C12N15/13 , C12N15/70 , G01N33/577 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种泰乐菌素和替米考星的基因工程抗体及制备方法和应用，其步骤：A、取液氮保存的杂交瘤细胞株P3C4，提取脾细胞总RNA，得到mRNA；B、扩增，以重链和轻链抗体片段互为引物，利用多肽链将抗体重链和轻链连接；C、将酶切scFv连接入E.coliTG1中，加入M13K07培养，得到能展示泰乐菌素和替米考星特异性抗体的噬菌体抗体文库；D、将噬菌体加入到处于对数生长期的E.coliHB2151中，IPTG诱导，得到特异性噬菌体抗体。E、验证的大肠杆菌表达菌株测序，得到单链抗体氨基酸和核苷酸序列。基因工程抗体在动物源性食品的泰乐菌素和替米考星残留检测中的应用。方法易行，操作简便，大批量生产，检测准确率高，应用于动物可食性组织中泰乐菌素和替米考星的残留检测。
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公开(公告)号：CN102778564A
公开(公告)日：2012-11-14
申请号：CN201210176468.7
申请日：2012-05-31
Applicant: 华中农业大学
IPC: G01N33/577
Abstract: 本发明公开了一种能识别莱克多巴胺的单克隆抗体，所述单克隆抗体是由杂交瘤细胞Rac所分泌的，该杂交瘤细胞保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC NO:C201186。本发明还公开了用于检测莱克多巴胺的酶联免疫方法和试剂盒及其在莱克多巴胺检测中的应用。与现有技术相比，本发明制备的单克隆抗体能够特异性识别莱克多巴胺，酶联免疫方法及试剂盒能检测更低浓度的莱克多巴胺残留，检测灵敏度、准确度高，精密度好。
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公开(公告)号：CN101368154B
公开(公告)日：2012-02-01
申请号：CN200810048065.8
申请日：2008-06-18
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明涉及一种人肠道菌群连续培养系统及方法。系统包括一组发酵罐，培养基输入、废液输出、液位控制系统和气路系统。建立了一种人肠道菌群连续培养系统及方法，构建了一种模拟人肠道环境的离体模型，连续培养的装置通过电脑控制，模型具有操作简单、使用方便、体系稳定性好等特点，经检测表明人肠道菌群不仅能在系统中稳定生长，且优势菌数量和主要的代谢产物(SCFA)浓度也与健康人相似。该模型的建立不仅为抗菌药残留对人肠道菌群影响的安全性评价构建了平台，也为新药、功能食品等的安全评价研究提供了更科学的方法和途径。
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公开(公告)号：CN1971279B
公开(公告)日：2011-05-18
申请号：CN200610164837.5
申请日：2006-12-06
Applicant: 华中农业大学
IPC: G01N33/544
Abstract: 本发明属于免疫化学分析技术领域。公开了一种用于喹噁啉-2-羧酸残留检测的酶联免疫方法及试剂盒，本发明的方法主要包括药物改造，免疫原、包被原、抗体的制备以及样品前处理和ELISA检测方法的建立。本发明的试剂盒主要由喹噁啉-2-羧酸(QCA)特异性抗体、QCA标准品、包被有QCA与γ-氨基丁酸反应后与卵清蛋白偶联物的酶标板组成。检测时，样品经偏磷酸水解处理，释放QCA，MAX柱净化，丁胺衍生处理，采用间接竞争ELISA方法测定。本发明的方法及试剂盒具有简便、快速、灵敏、准确等优点，能同时快速检测大批样品，组织最低检测限为0.6μg/kg。
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