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公开(公告)号：CN104841399B
公开(公告)日：2017-07-07
申请号：CN201510224769.6
申请日：2015-05-06
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种喹噁啉‑2‑甲醛‑1,4‑二氧‑亲和基质的制备方法及应用，其步骤：A、喹噁啉‑2‑甲醛‑1,4‑二氧的制备，加入丙酮中充分溶解，收集黄色固体，将二甲基亚砜∶无水乙醇加入反应釜中，调节转速，向反应釜中投入二氧化硒与甲基喹噁啉进行反应，收集黄色针状固体即为喹噁啉‑2‑甲醛‑1,4‑二氧；B、喹噁啉‑2‑甲醛‑1,4‑二氧与基质的偶联：合成溶解于DMF中的喹噁啉‑2‑甲醛‑1,4‑二氧充分混合，再加入氰基硼氢化钠，磁力搅拌，取出过夜偶联的反应物，过滤离心，将喹噁啉‑2‑甲醛‑1,4‑二氧‑亲和基质保存在酒精溶液中；C、高效液相色谱分析偶联效率。偶联效率达到了76.84%。简便快捷，减少了对人体的伤害，安全性更高。提高了亲和层析的分离选择性和效率。
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公开(公告)号：CN106565846A
公开(公告)日：2017-04-19
申请号：CN201610899714.X
申请日：2016-10-13
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K16/44 , C12N5/20 , G01N33/94 , G01N33/577 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种能识别金刚烷胺和金刚乙胺的特异性单克隆抗体,它是由杂交瘤细胞株2G3所分泌的，所述的杂交瘤细胞株2G3，保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC NO:C201625。本发明还公开了检测可食性动物组织中金刚烷胺和金刚乙胺残留的酶联免疫方法及其试剂盒。本发明制备的单克隆抗体灵敏度较高，检测的准确度高，精密度好，具有渐变、快速、易操作等优点，填补了市场上ELISA检测方法的空缺。
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公开(公告)号：CN103289005B
公开(公告)日：2016-06-22
申请号：CN201210049753.2
申请日：2012-02-29
Applicant: 华中农业大学
IPC: C08F220/06 , C08F220/56 , C08F226/06 , C08F220/10 , C08F222/14 , C08J9/26 , B01J20/30 , B01J20/285 , G01N30/08
Abstract: 本发明公开了一种磺胺类药物分子印迹固相萃取小柱的制备方法及应用，其步骤：1）先将模板分子、功能单体以及交联剂混合；2）印迹聚合物颗粒进行表征；3）将印迹聚合物颗粒装填固相萃取小柱，用甲醇和丙酮润洗，真空密封；磺胺类药物分子印迹聚合物，其步骤：a）将模板分子磺胺二甲嘧啶与功能单体溶解在致孔剂乙腈中，得混合溶液；b）将混合溶液用超声清洗仪超声，得到预聚合体系；c）将预聚合体系转入石英反应试管中，加入交联剂和引发剂；d）在紫外光下预聚合体系；e）将印迹聚合物直接研磨，得到印迹聚合物颗粒。回收率高、制备简便、成本低廉，可直接用于动物源性食品中磺胺嘧啶、磺胺甲嘧啶和磺胺二甲嘧啶的选择性吸附和高效富集。
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公开(公告)号：CN103424480B
公开(公告)日：2015-05-13
申请号：CN201310161090.8
申请日：2013-05-03
Applicant: 华中农业大学
IPC: G01N30/02
Abstract: 本发明为可食性动物组织中红霉素残留检测方法，属于兽药残留检测技术领域，具体涉及动物组织中红霉素残留高效液相色谱柱前衍生化反应分析方法。红霉素药物含有羟基基团与9-芴代甲氧苯酰氯发生反应，产物具有较高紫外信号响应。在偏碱性的磷酸二氢钾缓冲溶液中，用衍生化试剂9-芴代甲氧苯酰氯在水浴45℃下衍生红霉素1h，反应结束后冷却至室温上HPLC分析检测，得到比较稳定的衍生产物，对红霉素标准衍生物溶液用二极管阵列检测器进行紫外光谱扫描，在264nm处有最大吸收。本方法的灵敏度为4μg/kg，在0.1～2μg/mL范围内对峰面积呈线性响应，结果重现性良好，批内、批间变异系数CV≤15％。本发明各项指标均能满足红霉素药物残留分析的要求，灵敏度有较大提高。
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公开(公告)号：CN103288962B
公开(公告)日：2014-12-17
申请号：CN201210049821.5
申请日：2012-02-29
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K16/44 , C12N5/20 , G01N33/577 , G01N33/543 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种呋喃西林残留标示物氨基脲单克隆抗体及制备方法和应用，杂交瘤细胞SEM/4G6，CCTCC，CCTCCNO:C201150。其步骤：A、将半抗原CPSEM与牛血清白蛋白偶联得到免疫原；B、将半抗原CPSEM与卵清蛋白偶联得到包被原；C、利用步骤A的免疫原制备得到保藏号为CCTCCNO:C201150杂交瘤细胞株SEM/4G6所分泌的单克隆抗体；D用步骤B的包被原包被固相载体；E、将待测样品用酸处理，加入苯甲醛超声衍生后，用乙酸乙酯萃取，取乙酸乙酯层氮气吹干、正己烷净化和样品稀释液重新溶解得到待测物；F、对待测物进行酶联免疫检测。试剂盒在动物可食性组织中呋喃西林残留检测中的应用。方法简便、快速、灵敏、准确，可用于开发能检测动物可食性组织中氨基脲残留的酶联免疫试剂盒。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103421892B
公开(公告)日：2014-10-22
申请号：CN201310198811.2
申请日：2013-05-24
Applicant: 华中农业大学
CPC classification number: Y02A50/451
Abstract: 本发明属细菌耐药性分子检测领域。涉及一种鉴别空肠弯曲杆菌及其大环内酯类耐药突变的多重实时荧光PCR方法。设计了特异性的引物和MGB探针及其组合，不仅能够特异性鉴定空肠弯曲杆菌，而且可同时检测空肠弯曲杆菌23SrRNA基因第2074和2075位的核苷酸突变以及核糖体蛋白L4鞭毛基因rplD上第170和221位的核苷酸突变。首次在同一反应体系里，实现了对空肠弯曲杆菌的特异性鉴定和对多种大环内酯类耐药突变点的快速检测。本发明极大地缩短了临床空肠弯曲杆菌鉴定和耐药性检测的时间，为临床感染的治疗用药和空肠弯曲杆菌耐药性监测提供了新的手段。
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公开(公告)号：CN103897046A
公开(公告)日：2014-07-02
申请号：CN201310196144.4
申请日：2013-05-23
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K14/32 , G01N33/68 , G01N33/543
CPC classification number: C07K14/32 , G01N33/566 , G01N33/9446
Abstract: 本发明属于兽药残留分析领域，具体涉及一种β-内酰胺类抗生素残留检测的受体分析方法与试剂盒及应用。本发明的试剂盒含可同时检测15种β-内酰胺类药物残留的受体蛋白。本发明的受体蛋白BlaR-CTD是由大肠杆菌(Escherichia？coli)BlaRC所表达，包含受体蛋白BlaR-CTD的大肠杆菌保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC？NO：M2013173。本发明还公开了受体蛋白、酶标药物的制备方法和受体分析方法。本发明的试剂盒可同时检测青霉素类和头孢菌素类药物，拓宽了现有技术的检测对象，具有简便、快速、灵敏和准确等突出优点。
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公开(公告)号：CN103592167A
公开(公告)日：2014-02-19
申请号：CN201310578673.0
申请日：2013-11-18
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于兽药残留分析领域，具体涉及一种基于荧光素酶标记基因工程菌的氟喹诺酮类药物残留的检测方法和应用。本发明包含一种能同时检测11种氟喹诺酮类药物残留的荧光素酶标记基因工程菌的构建及应用。该工程菌为大肠杆菌(Escherichia coli)pK12，保藏号为CCTCC NO：M2013385，由含有recA启动子和荧光素酶报告基因luxCDABE的质粒pRecAlux3转化大肠杆菌K12所得。与现有技术相比，本发明构建的基因工程菌可以同时识别多种氟喹诺酮类药物，拓宽了现有技术的检测对象，具有简单、快速、灵敏、准确和半定量功能等突出优点。
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公开(公告)号：CN103424481A
公开(公告)日：2013-12-04
申请号：CN201310162769.9
申请日：2013-05-06
Applicant: 华中农业大学
IPC: G01N30/02
Abstract: 本发明属于兽药残留分析领域，具体涉及林可霉素、克林霉素和大观霉素的残留分析方法。林可胺类药物包括林可霉素、克林霉素，将上述药物与硅烷基化试剂进行衍生化反应，所得到的产物更容易气化。奔发明对反应的条件进行优化选择，结果表明，在75～85℃水浴中，林可霉素、克林霉素与硅烷基化试剂衍生化反应0.5～1.5h，室温冷却后，即可直接进行气相色谱质谱分析。最小检出量5μg/L，结果重现性良好，3个浓度，5次单独重复的变异系数小于17％。该方法各项指标均能满足该兽药残留量分析对检测水平的要求，灵敏度有较大的提高。
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公开(公告)号：CN103424478A
公开(公告)日：2013-12-04
申请号：CN201310159490.5
申请日：2013-05-03
Applicant: 华中农业大学
IPC: G01N30/02
Abstract: 本发明属于兽药残留分析领域，具体涉及一种吡利霉素的残留检测方法。采用仲胺基化合物氢取代衍生反应高效液相色谱柱前衍生化反应分析。在室温下，衍生化试剂氯甲酸-9-芴基甲酯的浓度为10-2mol/L，将0.1mol/L的硼酸缓冲液调至pH为9，该反应为即时反应，由于只有一个仲胺作为单一的反应位点，不需加反应终止剂即可达到衍生化的目的，衍生产物稳定。衍生产物经高效液相色谱检测，衍生产物的紫外检测波长为266nm时有最大紫外强度，最小检出量为5μg/L，在20～4000μg/L范围内对峰面积呈线性响应，结果重现性良好，3个浓度、15次重复的变异系数小于8％。
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