一种抑制侵染水稻PCD途径相关基因上调的方法

    公开(公告)号:CN106754614A

    公开(公告)日:2017-05-31

    申请号:CN201710078834.8

    申请日:2017-02-14

    CPC classification number: C12N1/36 C12N1/14 C12Q1/6895 C12Q2600/158

    Abstract: 本发明公开了一种抑制侵染水稻PCD途径相关基因上调的方法,采用弱酸处理稻瘟菌效应蛋白基因过表达菌株孢子;用悬浮液喷雾接种水稻叶片;于不同时间点取样,提取水稻样品总RNA;反转录成cDNA,real‑time RT‑PCR检测cDNA;分析PCD途径相关的主要基因PR1a和PR5在不同时间点的表达。与现有技术相比,本发明克服了研究非生物环境pH影响寄主‑病原互作机制中,常借助温室设计各种弱酸处理以观察寄主表型变化、以及筛选大量水稻防御相关基因表达等周期长和效率低的弊端,提供了一种更为简便、有效、准确地弱酸处理病原菌孢子、定量检测水稻PCD途径主要相关基因表达的方法,为更快速准确地进行弱酸对水稻与稻瘟病菌互作机制的研究提供重要的实验依据。

    一种烟草多酚类物质诱导植物免疫反应的检测方法

    公开(公告)号:CN105779588A

    公开(公告)日:2016-07-20

    申请号:CN201610057178.9

    申请日:2016-01-28

    Abstract: 本发明公开了一种烟草多酚类物质诱导植物免疫反应的检测方法,利用提取分离到的烟草单宁类物质处理感病水稻叶片6h后再接种强致病菌株,调查水稻抗感反应;real?time RT?PCR分析水稻早期响应的防御相关基因表达以及qPCR检测病斑的真菌相对生长量;烟草单宁类物质按照10~500ppm浓度喷雾水稻叶片6h再接种强致病菌株;调查抗感反应以及real?time RT?PCR分析水稻防御相关基因表达。与现有技术相比,本发明全面准确地明确烟草单宁类物质能诱导感病水稻免疫反应响应。克服了已有单一地通过病原菌弱毒毒系处理感病植株再挑战接种强度菌株诱导免疫反应过程中诸多易受环境影响的弊端,最终达到为今后测定病原菌效应蛋白提高病原菌侵染力的方法提供准确全面的方法的目的。

    一种检测稻瘟病菌效应蛋白在水稻根组织内转运的方法

    公开(公告)号:CN103267727B

    公开(公告)日:2016-03-16

    申请号:CN201310187191.2

    申请日:2013-05-20

    CPC classification number: G01N33/5097 G01N2021/6432 G01N2021/6439

    Abstract: 本发明公开了一种检测稻瘟病菌效应蛋白在水稻根组织内转运的方法,该方法包括以下步骤:稻瘟病菌病原相关分子模式MgNIP53的验证,融合蛋白处理水稻根尖,免疫荧光染色方法处理水稻,观察融合蛋白在水稻根组织内的转运。该方法通过一系列方法鉴定到了一个稻瘟病菌病原相关分子模式MgNIP53,采用融合蛋白处理水稻根尖,最后采用免疫荧光法处理水稻根尖来观察融合蛋白在水稻根组织内的转运,本发明提供的方法简便、准确、快速,为今后开发生物制剂进行有效生物防治稻瘟病提供有力参考。

    检测水稻稻瘟病菌基础抗性的基因型表达分子标记及应用

    公开(公告)号:CN104404152A

    公开(公告)日:2015-03-11

    申请号:CN201410723122.3

    申请日:2014-12-03

    Abstract: 本发明提供了检测水稻稻瘟病菌基础抗性的基因型表达分子标记及应用,可用于水稻对稻瘟病菌基础抗性的鉴定。该分子标记的核苷酸序列为SEQ ID No.1,利用本发明所述引物对,以水稻基因组DNA为模板进行PCR扩增,可以得到与水稻对稻瘟病菌基础抗性基因紧密连锁的基因型分子标记。通过PCR扩增分析可以明确该标记的有无可以判断水稻对稻瘟病菌基础抗性的有无,能够用于水稻对稻瘟病菌基础抗性有无的检测。该基因型分子标记带型简单、分布较密等特点具有SSR不可比拟的优势,能快速精确检测亚种内品种间的多态性,具有广阔的应用前景。

    一种水稻对稻瘟病菌基础抗性的InDel分子标记及其应用

    公开(公告)号:CN104404038A

    公开(公告)日:2015-03-11

    申请号:CN201410722932.7

    申请日:2014-12-03

    Abstract: 一种水稻对稻瘟病菌基础抗性的Indel分子标记及其应用,可用于稻瘟病菌基础抗性的鉴定。该Indel分子标记的核苷酸序列为SEQ ID No.1。利用本发明的引物对,以水稻基因组DNA为模板进行PCR扩增,可以得到与水稻对稻瘟病菌基础抗性基因紧密连锁的InDel分子标记,该标记在本发明中命名为InDelBR1。通过PCR扩增分析可以明确该标记的有无可以判断水稻对稻瘟病菌基础抗性的有无,能够用于水稻对稻瘟病菌基础抗性有无的检测。该InDel分子标记带型简单、分布较密等特点具有SSR不可比拟的优势,能快速精确检测亚种内品种间的多态性,具有广阔的应用前景。

    一种检测稻瘟病菌致病蛋白的方法

    公开(公告)号:CN101418332B

    公开(公告)日:2011-04-20

    申请号:CN200810233643.5

    申请日:2008-11-25

    Abstract: 本发明提供一种检测稻瘟病菌致病蛋白的方法。水稻感病品种丽江新团黑谷生长至第4片叶完全展开时接种。选择在接种水稻叶片的中部最宽处,用致伤设备形成直径1mm的压伤斑1个,将稻瘟病菌氮饥饿培养后或致病基因重组表达后得到的蛋白在致伤处接种,蛋白的接种浓度为1μg/μl,接种体积为3μl。接种后72小时在水稻叶片上形成的病斑为椭圆形,测量向叶尖和叶基方向延伸的最长值作为病斑的长度值,该值是比较不同蛋白致病力大小的依据。其分类标准为:病斑长度为1.5mm至2mm之间为弱致病性;病斑长度在2.1mm至3mm之间为中等致病性;病斑长度大于3.1mm为强致病性。该方法对于研究稻瘟病菌致病相关基因和蛋白的功能具有重要意义。

    马铃薯晚播控制马铃薯晚疫病的方法

    公开(公告)号:CN101433154A

    公开(公告)日:2009-05-20

    申请号:CN200810233504.2

    申请日:2008-10-29

    Abstract: 本发明涉及一种马铃薯晚播控制马铃薯晚疫病的方法,属于植物保护学技术领域。本发明的技术方案是保持目前常规种植马铃薯的施肥及田间管理方法不变,不同的是马铃薯晚播,7月中旬至8月上旬播种,10月下旬至11月上旬收获;起垄梅花塘种植,垄宽50-60cm,垄距60-70cm,垄上梅花型开塘,对角线塘距60~70cm;每亩种植密度为2200~3300株;马铃薯品种可以是会-2、米拉、合作88、威芋3号;该方法可适用于烟地、蔬菜地等田块中种植。该方法减少化学农药的施用量及其对农田生态环境污染的负面影响,为马铃薯晚疫病的生态控制提供了新方法,有着良好的社会经济和生态效益。

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