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公开(公告)号：CN107475780A
公开(公告)日：2017-12-15
申请号：CN201710874253.5
申请日：2017-09-25
Applicant: 中国计量大学
CPC classification number: C40B50/06 , C12Q1/6816 , C12Q2525/191 , C12Q2531/113
Abstract: 本发明涉及分子生物学领域，具体公开了一种低温胁迫下福寿螺SSH文库的构建、鉴定方法。方法包括如下步骤：(1)福寿螺低温胁迫处理；(2)福寿螺样品处理；(3)福寿螺组织总RNA提取；(4)反转录合成cDNA；(5)cDNA纯化；(6)cDNA酶切及纯化；(7)接头连接；(8)消减杂交；(9)差减PCR鉴定及纯化；(10)PCR产物与pMD18-T载体连接；(11)连接产物转化大肠杆菌DH5a；(12)文库鉴定；本发明方法所构建的低温胁迫下福寿螺SSH文库，为大量发现和研究入侵生物福寿螺的表达基因奠定基础。同时，本发明的SSH文库对于深入研究入侵生物福寿类的耐逆机制具有重要的理论及实际意义。
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公开(公告)号：CN117866864A
公开(公告)日：2024-04-12
申请号：CN202410002115.8
申请日：2024-01-02
Applicant: 中国计量大学
Abstract: 本发明公开了一种提高四烯菌素B产量的StbA1基因过表达工程菌及其构建方法和应用。该工程菌过量表达淀粉酶产色链霉菌中群体感应信号基因StbA1，具有比淀粉酶产色链霉菌(Streptomyces diastatochromogenes)1628更高的四烯菌素B的合成能力。其构建方法包括以下步骤：1)构建表达载体pIB139‑StbA1；2)将步骤1)中的表达载体通过接合转移的方法导入淀粉酶产色链霉菌1628中，获得StbA1基因过表达工程菌。利用表达载体pIB139中强启动子permE*驱动StbA1基因的表达，利用接合转移方法将表达载体pIB139‑StbA1整合到淀粉酶产色链霉菌的染色体中，获得四烯菌素B高产菌株，与原始菌株相比，工程菌四烯菌素B的产量至少提高56.1％。
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公开(公告)号：CN117660275A
公开(公告)日：2024-03-08
申请号：CN202311510934.5
申请日：2023-11-14
Applicant: 中国计量大学
Abstract: 本发明公开了一种提高淀粉酶产色链霉菌四霉素P产量的方法和工程菌，方法包括以下步骤：1)构建群体响应信号分子合成基因StbA2的表达载体PIB139‑StbA2；2)将步骤1)中的表达载体通过接合转移导入淀粉酶产色链霉菌中，制备StbA2基因过表达工程菌；3)利用StbA2基因过表达工程菌发酵生产四霉素P。本发明通过过表达群体感应信号分子合成基因StbA2，获得StbA2基因过表达工程菌，与原始菌株相比，StbA2基因过表达的淀粉酶产色链霉菌的四霉素P的产量至少提高120.3％。
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公开(公告)号：CN114438092B
公开(公告)日：2023-06-06
申请号：CN202210043810.X
申请日：2022-01-14
Applicant: 中国计量大学
IPC: C12N15/12 , C07K14/435 , A01N57/16 , A01P9/00
Abstract: 本发明公开了一种福寿螺低温耐受性相关的TPR1基因、编码蛋白及其应用，属于生物技术领域。本发明快速、有效、重复性强，是对TPR1基因家族的重要补充。福寿螺为重要的入侵生物，本发明有助于开发新型生物农药，通过阻断福寿螺体内TPR1基因的表达来降低福寿螺的低温耐受性，从而达到控制福寿螺进一步向北入侵的目的。同时通过干扰本发明的TPR1基因的表达，可以显著降低福寿螺卵的孵化率，延长卵的孵化历期，从而降低福寿螺入侵的危害。本发明对福寿螺生物学、生态学、新型杀虫剂的研究与测定及福寿螺对低温耐受性的抗性机制研究均具有重要意义。
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公开(公告)号：CN116004638A
公开(公告)日：2023-04-25
申请号：CN202210832664.9
申请日：2022-07-14
Applicant: 中国计量大学 , 浙江省桐庐汇丰生物科技有限公司
IPC: C12N15/12 , C12N15/113 , A01N57/16 , A01P7/04
Abstract: 本发明公开了褐飞虱锚定蛋白基因NlGPI作为靶点在防治褐飞虱中的应用。本发明基于褐飞虱转录组数据，利用PCR技术克隆NlGPI全长cDNA序列；利用生物信息学手段分析其核酸和蛋白质序列特征；通过qRT‑PCR技术检测其时空表达规律；利用RNAi技术探明NlGPI的生物学功能。本发明发现NlGPI对褐飞虱体内YLS释放至血淋巴这一过程紧密相关，并在褐飞虱的生长发育及繁殖过程中发挥重要作用，能够作为褐飞虱防控的潜在靶标。
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公开(公告)号：CN111206111B
公开(公告)日：2023-04-14
申请号：CN202010087044.8
申请日：2020-02-11
Applicant: 中国计量大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6848 , C12Q1/04 , C12N15/11 , C12R1/645 , C12R1/77
Abstract: 本发明公开了一种快速检测浙贝母中两种真菌的引物组、试剂盒及方法，针对病原菌在浙贝母不同的发育时期和环境条件下所表现的症状可能一样的问题以及现有检测方法耗时久的问题。本发明利用巢氏多重PCR建立了一种对浙贝母上两种主要病原菌的多目标快速检测的引物组和方法，方法的检出限可以达到100pg/μL，且检出率几乎可达100％。该方法可以提高检测的灵敏度还可以实现多种病原菌的多目标快速检测。
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公开(公告)号：CN113801834B
公开(公告)日：2023-04-11
申请号：CN202111055438.6
申请日：2021-09-09
Applicant: 中国计量大学
Abstract: 本发明提供了一种基因工程高产丰加霉素的淀粉酶产色链霉菌及其构建方法和应用。本发明通过基因工程方法构建重组质粒pIB139‑RelA，并转入淀粉酶产色链霉菌(Streptomyces diastatochromogenes 1628)中构建得到，所述丰加霉素高产粉酶产色链霉菌过量表达天蓝色链霉菌ppGpp合成酶RelA基因，RelA基因过量表达产物可以正向调控丰加霉素生物合成，用于丰加霉素生产。本发明所获得的菌株发酵生产丰加霉素产量至少提高到1568mg/L，是原始菌株产量的10倍，为工业生产提高丰加霉素产量提供新的技术支持。
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公开(公告)号：CN114280044A
公开(公告)日：2022-04-05
申请号：CN202111612604.8
申请日：2021-12-27
Applicant: 中国计量大学
Abstract: 本发明公开了一种用于果蔬样品农药残留现场快速检测方法，首先提取工具酶并对工具酶进行固定化、装柱，然后对水果蔬菜中的农药进行检测，检测完先用缓冲溶液处理，再用碱酸碱处理，以实现对使用后的酶柱进行载体回收。本发明采用的检测工具酶成本低廉、易于标准化提取，节约成本，采用的参比柱为同种失活酶，用于食品中农药的实测，排除了色素干扰，提高检测精密度，检测结果的绝对差值不超过算术平均值的，阳性结果的符合率达到，样品处理时间一分钟，检测时间为分钟，适合多次定期使用，为农药残留现场快速检测提供了技术支持。
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公开(公告)号：CN109757609B
公开(公告)日：2022-04-01
申请号：CN201910045177.6
申请日：2019-01-17
Applicant: 中国计量大学
IPC: A23K10/30 , A23K10/20 , A23K10/26 , A23K20/147 , A23K20/174 , A23K50/80 , A01K61/51 , A01K61/17
Abstract: 本发明公开了一种福寿螺人工饲料及其制备方法和应用。它的步骤如下：(1)挑取新鲜的茭白，水葫芦，水稻幼苗，菹草和青萍切碎、杀青、烘干、粉碎，将复合维生素B和维生素C粉碎；(2)将复合维生素B及维生素C放入烧杯中，加入蒸馏水溶解，作为A组分；(3)将称好的茭白粉，水葫芦粉，水稻幼苗粉，菹草粉，青萍粉和贝壳粉混匀，作为B组分；(4)用水将琼脂加热融化，再加入山梨酸，煮沸，冷却，作为C组分备用；(5)将A组分倒入B组分，搅拌均匀，再加入C组分，继续充分搅拌均匀，倒入保鲜盒中，完全冷却凝固后置于4℃冰箱保存。本发明具有价格低廉、经济实用、配制简便等特点，适于标准试虫的大规模、长期、继代饲养。
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