产表柔红霉素的天蓝淡红链霉菌的基因工程菌及其制备方法

    公开(公告)号:CN101892186B

    公开(公告)日:2013-06-05

    申请号:CN200910051620.7

    申请日:2009-05-20

    Abstract: 本发明公开了一种产表柔红霉素的天蓝淡红链霉菌的基因工程菌及其制备方法和所用的重组穿梭载体和转化体。该工程菌是一种在天蓝淡红链霉菌野生菌株的dnmV基因中插入或者置换为外来基因,使dnmV基因被阻断的基因阻断工程菌,所述的外来基因中包含aveBIV基因使该基因阻断工程菌表达aveBIV,其特征在于,所述的外来基因是启动子和aveBIV基因的连锁片段。本发明所构建的工程菌,不含有任何抗性标记,很方便用于进一步的基因工程改造;表柔红霉素产量大于用已有方法,最好可达45mg/L;通过连续传代,表柔红霉素产量非常稳定,重复性好。

    制备纽莫康定B0的方法
    62.
    发明授权

    公开(公告)号:CN101659693B

    公开(公告)日:2012-11-21

    申请号:CN200910133118.0

    申请日:2009-04-01

    Abstract: 本发明公开一种制备纽莫康定B0的方法,该方法包括下列步骤:a)离心纽莫康定B0的发酵液,取菌丝体,用第一种溶剂浸取菌丝体中纽莫康定B0,过滤除去菌丝体;b)将纽莫康定B0第一种溶剂浸取液中的溶剂蒸干,用第二种溶剂浸泡,过滤除去不溶物;c)将纽莫康定B0第二种溶剂浸泡液蒸干后溶于第一种溶剂中,过酸性氧化铝柱,收集流出液;d)将纽莫康定B0收集液蒸干后溶于第一种溶剂中,上吸附树脂,用第一种溶剂进行洗脱,收集纯度较高的部分;e)将纽莫康定B0收集液蒸干溶于第一种溶剂中,上反相树脂,用第一种溶剂进行洗脱,收集纯度较高的部分;f)将纽莫康定B0收集液蒸干后用第一种溶剂溶解,滴加少量水使其过饱和后结晶析出,制得纽莫康定B0。本发明的制备纽莫康定B0的方法不仅能够很好的去除色素,且能将其纯度提高到96%以上。

    一种高纯度丹酚酸B的制备方法

    公开(公告)号:CN101638401B

    公开(公告)日:2012-11-21

    申请号:CN200810041104.1

    申请日:2008-07-29

    Abstract: 本发明公开了一种高纯度丹酚酸B的制备方法,所述的方法包括步骤:(1)将丹参水提物和禾谷镰孢菌(Fusarium graminearum)静息细胞混合,在20-35℃生物转化24-90小时,得到去除迷迭香酸的丹参水提物;和(2)去除迷迭香酸的丹参水提物经反相树脂吸附,通过水或甲醇水溶液洗脱得到高纯度的丹酚酸B。本发明提供的制备方法所得到的丹酚酸B纯度≥99%,回收率>60%,工艺简单、成本低。

    一种隐丹参酮的制备方法
    64.
    发明公开

    公开(公告)号:CN102675407A

    公开(公告)日:2012-09-19

    申请号:CN201110059589.9

    申请日:2011-03-11

    Abstract: 本发明公开了一种隐丹参酮的制备方法,其包含下列步骤:将丹参脂溶性成分用大孔反相吸附树脂进行柱层析分离,即可;其中,所述的大孔反相吸附树脂的参数如下:粒径为50~100μm,孔径为90~110,介质为聚苯乙烯-二乙烯苯。本发明的制备方法不仅产物收率高,且可以达到很高的产物纯度。本发明的方法还可以进行放大生产,具有一定的应用价值。

    帕曲星A的分离方法
    65.
    发明公开

    公开(公告)号:CN102453062A

    公开(公告)日:2012-05-16

    申请号:CN201010514332.3

    申请日:2010-10-21

    Abstract: 本发明公开帕曲星A的分离方法,包括如下步骤:将含帕曲星发酵液调pH,静置并过滤,将滤饼用极性有机溶剂浸泡,过滤取滤液;将滤液调pH,25℃~35℃下浓缩至含水30%~35%,静置、过滤得帕曲星粗品;将粗品溶于含水25%~30%甲醇溶液,上苯乙烯大孔反相吸附树脂柱,用含水18%~23%甲醇溶液洗脱除杂,再用含水13%~17%甲醇溶液洗脱帕曲星A,收集纯度≥80%的帕曲星A洗脱液;将收集的帕曲星A洗脱液浓缩至为含水25%~30%甲醇溶液,再上柱,用含水17%~19%甲醇溶液洗脱除杂,再用含水10%~14%甲醇溶液洗脱,收集洗脱液即可;百分比为体积百分比。该方法操作简单,成本较低,溶剂少,产品质量稳定,适合大规模工业化生产,分离得到的产品的帕曲星A纯度达93%以上。

    产表柔红霉素的天蓝淡红链霉菌基因工程菌及其制备方法

    公开(公告)号:CN101892185A

    公开(公告)日:2010-11-24

    申请号:CN200910051619.4

    申请日:2009-05-20

    Abstract: 本发明公开了一种高产表柔红霉素的天蓝淡红链霉菌的基因工程菌,其是一种在天蓝淡红链霉菌野生菌株的dnmV基因中插入或者置换为包含aveBIV基因的第一外源基因,使dnmV基因被阻断而表达aveBIV(阿维菌素酮基还原酶)的基因工程菌,其特征在于,该基因工程菌的基因组中还整合着第二外源基因,所述的第一外源基因和第二外源基因都是启动子和aveBIV基因的连锁片段。本发明所构建的基因工程菌,不含有任何抗性标记,很方便用于进一步的基因工程改造;表柔红霉素产量远远大于已有方法,最好可达70mg/L;通过连续传代,表柔红霉素产量非常稳定,重复性好。

    一种博莱霉素的精制方法
    68.
    发明公开

    公开(公告)号:CN101463076A

    公开(公告)日:2009-06-24

    申请号:CN200710172519.8

    申请日:2007-12-18

    Abstract: 本发明公开了一种博莱霉素的精制方法,包括将博莱霉素粗品采用制备型HPLC技术纯化,其中制备柱的固定相为C8或C18的硅胶柱,流动相为pH3.5~5的硫酸盐水溶液与极性有机溶剂的混合液。本发明采用制备HPLC技术提高了博莱霉素活性成分A2和B2的收率(一般在85%)和自动化程度,大大降低了成本,可用于工业化生产。

    去除粉末状头霉素C中色素的方法

    公开(公告)号:CN101134760A

    公开(公告)日:2008-03-05

    申请号:CN200610030715.7

    申请日:2006-08-31

    Abstract: 本发明涉及一种去除粉末状头霉素C中色素的方法,其特征在于,该方法包括在-20℃~10℃的温度下,分别用冷的无水醇溶剂和丙酮水溶液反复冲洗粉末状头霉素C的步骤。本发明的方法操作简单,目的产物损失少,收率高,有机溶剂用量少,成本低,更适于大规模生产。

    供HPLC分析的万古霉素发酵液前处理方法

    公开(公告)号:CN1861629A

    公开(公告)日:2006-11-15

    申请号:CN200510110958.7

    申请日:2005-11-30

    Abstract: 本发明公开了一种供HPLC分析的万古霉素发酵液前处理方法,该方法包括如下步骤:1)用有机弱酸将万古霉素发酵液的pH调节至4.0~4.5,过滤得滤液或离心分离得上清液;2)将上述的滤液或上清液与甲醇以1∶0.5~2的体积比混合均匀,离心。用该方法预处理发酵液后,供HPLC分析的样品中的杂质大大降低,连续进行上百个样品分析,未见柱压升高,分析效果良好,而且分析的万古霉素准确率高。

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