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公开(公告)号:CN103374558B
公开(公告)日:2015-12-02
申请号:CN201210109382.2
申请日:2012-04-13
Applicant: 上海医药工业研究院 , 中国医药工业研究总院
Abstract: 本发明公开了一种一步法裂解CPC生产7-ACA的酰化酶及编码它的多核苷酸,含有该核苷酸序列的重组表达载体和重组表达转化体及其制备方法,以及该重组酶在合成7-ACA中的应用。所述CPC酰化酶是如下(a)或(b)的蛋白质:(a)SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列的第180位的缬氨酸经过取代且具有CPC酰化酶活性的蛋白质;(b)在(a)中的氨基酸序列的N端或C端添加一个或几个氨基酸且具有CPC酰化酶活性的由(a)衍生的蛋白质。本发明公开的CPC酰化酶的酶活性和底物耐受性均有提高,从而为CPC酰化酶的人工定向进化改造提供了有力前提。
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公开(公告)号:CN104372036A
公开(公告)日:2015-02-25
申请号:CN201310356435.5
申请日:2013-08-15
Applicant: 上海医药工业研究院 , 中国医药工业研究总院
CPC classification number: C12P7/42
Abstract: 本发明公开了一种以山梨醇作为碳源提高发酵生产莽草酸产量的方法。其公开了一种生产莽草酸的发酵培养基,该培养基包括碳源,所述的碳源为0.1~5%山梨醇,所述的百分比为每100毫升发酵培养基中所含有的山梨醇的克数。本发明的用于生产莽草酸的发酵培养基中以山梨醇作为碳源,其显著提高了菌株发酵生产莽草酸的产量,其产量较传统的以葡萄糖作为碳源提高至750%。本发明的工艺简单有效,原料价格低廉,可应用于生物合成莽草酸的产业化生产中,且对其它的以大肠杆菌发酵生产代谢产物的过程优化具有积极的指导作用。
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公开(公告)号:CN103074395B
公开(公告)日:2015-01-07
申请号:CN201110330304.0
申请日:2011-10-26
Applicant: 上海医药工业研究院 , 中国医药工业研究总院
Abstract: 本发明涉及生产Safracin B的培养基技术领域。本发明所说的用于生产Safracin B的发酵培养基,包括碳源、有机氮源和无机盐,所说的碳源包括葡萄糖、蔗糖、糊精、玉米淀粉、甘露醇和可溶性淀粉,所说的有机氮源包括大豆蛋白胨、鱼粉蛋白胨、黄豆粉、黄豆饼粉、棉籽蛋白粉、豆粕粉、花生粕和小麦胚芽粉。本发明提供的用于生产Safracin B的发酵培养基,采用合适的氮源和碳源,在用量和组分上都进行优化组合使用,培养基粘稠度合适,Safracin B产生菌及其突变株菌体不会生长过旺,发酵产物Safracin B的产率高,效价较文献报道的培养基提高了200%-300%。
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公开(公告)号:CN103374579A
公开(公告)日:2013-10-30
申请号:CN201210109366.3
申请日:2012-04-13
Applicant: 上海医药工业研究院 , 中国医药工业研究总院
IPC: C12N15/31 , C07K19/00 , C12N15/62 , C12N15/70 , C12N1/21 , C07K1/36 , C07K1/22 , C07K1/20 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种菌丝霉素及其基因和制备方法。所述的菌丝霉素的基因的核苷酸序列如序列表中SEQ ID No.1所示。本发明公开了菌丝霉素融合蛋白的基因序列、氨基酸序列、包含该基因的重组表达载体以及包含编码菌丝霉素融合蛋白基因的重组表达转化体;所述融合蛋白基因序列中含His-tag和TEV酶的酶切位点。所述菌丝霉素的制备方法包括以下步骤:培养本发明所述的重组表达转化体;分离纯化所得的菌丝霉素融合蛋白;加入TEV酶进行酶切;分离纯化得到菌丝霉素蛋白即可。本发明使菌丝霉素表达量大大提高,分离纯化也更简单易行。本发明纯化得到的菌丝霉素可以有效抑制革兰氏阳性菌枯草杆菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的生长。
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公开(公告)号:CN103374563A
公开(公告)日:2013-10-30
申请号:CN201210109345.1
申请日:2012-04-13
Applicant: 上海医药工业研究院 , 中国医药工业研究总院
Abstract: 本发明公开了一种改良7-ACA产生菌的方法,包括以下步骤:1)取含有不同抗性筛选标记基因的两个亲本,其中第一亲本是含有外源野生型头孢菌素C酰基转移酶的基因的顶头孢霉(Acremonium chrysogenum)基因工程菌,第二亲本是含有外源头孢菌素C酰基转移酶正向突变体的基因的顶头孢霉基因工程菌,该头孢菌素C酰基转移酶正向突变体的酶活性和头孢菌素C底物耐受性比野生型均有提高,分别用第一亲本和第二亲本的孢子制备原生质体;2)进行原生质体融合;3)将融合子摇瓶发酵,选择7-ACA含量比两亲本高的融合子即为改良的7-ACA产生菌。本发明的方法可以方便、有效、快速的得到7-ACA产量大幅提高的菌株。
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公开(公告)号:CN103131745A
公开(公告)日:2013-06-05
申请号:CN201110390608.6
申请日:2011-11-30
Applicant: 上海医药工业研究院 , 中国医药工业研究总院
Abstract: 本发明公开了一种生产WF16616的发酵培养基,其包括1-10%的碳源、1-6%的有机氮源和0.1-1%的无机磷酸盐,其中所述的碳源包括甘露醇和玉米淀粉;所述的氮源为棉籽粉、干酵母和聚蛋白胨,或者为黄豆饼粉、干酵母和聚蛋白胨;百分比为相对于所述发酵培养基的重量百分比。本发明还提供了所述的发酵培养基在以Tolypocladium parasiticum No.16616为产生菌发酵生产WF16616中的用途,以及一种发酵生产WF16616的方法。本发明的发酵培养基能够显著提高WF16616的产量(效价达300-420mg/L),相对于现有技术(3.1mg/L)有非常明显的提高,还能降低杂质的含量。
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公开(公告)号:CN103087937A
公开(公告)日:2013-05-08
申请号:CN201110341823.7
申请日:2011-11-02
Applicant: 上海医药工业研究院 , 中国医药工业研究总院
Abstract: 本发明公开了一种选育生产WF16616的寄生弯颈霉突变菌株的方法,包括:1)将野生型寄生弯颈霉(Tolypocladium parasiticum)单孢子悬浮液紫外诱变,避光涂布平板,挑取高产菌落;2)将步骤1)所得突变株单孢子悬浮液NTG(二硝基胍)诱变,涂布固体平板,从菌落颜色形态变化较大的菌落挑取高产菌落;3)将步骤2)所得突变株的单孢子悬浮液紫外线和NaCl复合筛选,避光涂布含NaCl的平板,从直径中等的菌落中挑取高产菌落;4)将步骤3)所得突变株的单孢子悬浮液紫外线和WF16616复合筛选,避光涂布含WF16616的平板,挑取高产菌落。本发明的方法具有突变和筛选的方向性以及选择的高效性,所得突变株的菌落颜色由野生型的白色变为绿色,发酵产物WF16616产量高,效价高达550-600mg/L,具有工业化价值。
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公开(公告)号:CN101993903B
公开(公告)日:2013-05-08
申请号:CN200910056563.1
申请日:2009-08-18
Applicant: 上海医药工业研究院
Abstract: 本发明提供一种用于生产子囊霉素的发酵培养基及使用该发酵培养基生产子囊霉素的方法。所述的发酵培养基,以所述发酵培养基的总重量计,含有碳源2.0-8.0%,有机氮源1.0-5.0%,和无机盐0.1-0.5%;所述的有机氮源为2种或多于2种的下述物质的组合:酵母提取物、玉米浆干粉、玉米蛋白粉、大豆蛋白胨、黄豆饼粉、棉籽粉、花生粕;
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公开(公告)号:CN101906439B
公开(公告)日:2012-12-19
申请号:CN200910052615.8
申请日:2009-06-05
Applicant: 上海医药工业研究院
Abstract: 一种生物絮凝剂的制备方法及其用途,所述的制备方法包括步骤:(a)将绳状青霉(Penicillium funiculosum)经发酵培养得到发酵液,离心除去菌丝体,得到上清液;和(b)将上清液和乙醇混合、离心,得到生物絮凝剂。所述的生物絮凝剂可用于处理活性污泥、粉煤灰、木炭、墨水、泥水、河底沉积物悬浊液、高岭土悬浊液、粪尿水、印染废水、和/或果汁。
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公开(公告)号:CN102757999A
公开(公告)日:2012-10-31
申请号:CN201110109659.7
申请日:2011-04-29
Applicant: 上海医药工业研究院
Abstract: 本发明提供一种用于生产如式I所示的7-氨基头孢烷酸(7-ACA)的发酵培养基,以所述发酵培养基的总体积计,它含有:4.2-18%(g/100mL)碳源;10-12%(g/100mL)氮源;和微量元素溶液;以所述微量元素溶液的体积计,其中含有ZnSO4·7H2O 0.2-13.2(g/100mL),CuSO4·5H2O 0.2-0(g/100mL);所述金属离子包括钾、镁、钙、铁、和锰,以所述发酵培养基的总体积计,其中CaCO3 0.1-1%(g/100mL);所述发酵培养基pH 5.0-10.0。
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