公开(公告)号：CN103374563B

公开(公告)日：2016-07-20

申请号：CN201210109345.1

申请日：2012-04-13

Applicant: 上海医药工业研究院 ,  中国医药工业研究总院

Inventor： 胡又佳 ,  刘艳 ,  谢丽萍 ,  刘春磊 ,  朱宝泉 ,  王颖秋

IPC: C12N15/04 ,  C12N1/15 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明公开了一种改良7?ACA产生菌的方法，包括以下步骤：1)取含有不同抗性筛选标记基因的两个亲本，其中第一亲本是含有外源野生型头孢菌素C酰基转移酶的基因的顶头孢霉(Acremonium chrysogenum)基因工程菌，第二亲本是含有外源头孢菌素C酰基转移酶正向突变体的基因的顶头孢霉基因工程菌，该头孢菌素C酰基转移酶正向突变体的酶活性和头孢菌素C底物耐受性比野生型均有提高，分别用第一亲本和第二亲本的孢子制备原生质体；2)进行原生质体融合；3)将融合子摇瓶发酵，选择7?ACA含量比两亲本高的融合子即为改良的7?ACA产生菌。本发明的方法可以方便、有效、快速的得到7?ACA产量大幅提高的菌株。

公开(公告)号：CN103374563A

公开(公告)日：2013-10-30

申请号：CN201210109345.1

申请日：2012-04-13

Applicant: 上海医药工业研究院 ,  中国医药工业研究总院

Inventor： 胡又佳 ,  刘艳 ,  谢丽萍 ,  刘春磊 ,  朱宝泉 ,  王颖秋

IPC: C12N15/04 ,  C12N1/15 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明公开了一种改良7-ACA产生菌的方法，包括以下步骤：1)取含有不同抗性筛选标记基因的两个亲本，其中第一亲本是含有外源野生型头孢菌素C酰基转移酶的基因的顶头孢霉(Acremonium chrysogenum)基因工程菌，第二亲本是含有外源头孢菌素C酰基转移酶正向突变体的基因的顶头孢霉基因工程菌，该头孢菌素C酰基转移酶正向突变体的酶活性和头孢菌素C底物耐受性比野生型均有提高，分别用第一亲本和第二亲本的孢子制备原生质体；2)进行原生质体融合；3)将融合子摇瓶发酵，选择7-ACA含量比两亲本高的融合子即为改良的7-ACA产生菌。本发明的方法可以方便、有效、快速的得到7-ACA产量大幅提高的菌株。