公开(公告)号：CN104693270A

公开(公告)日：2015-06-10

申请号：CN201310669798.4

申请日：2013-12-10

Applicant: 清华大学

Inventor： 邢新会 ,  黄子亮 ,  张翀

IPC: C07K5/065 ,  C07K5/068 ,  C07K5/087 ,  C07K5/09 ,  C07K5/107 ,  C07K5/11 ,  C12N15/11 ,  C07K19/00

Abstract: 本发明涉及一种用于融合蛋白的连接肽，其组成如下式(1)所示：(F)n(R)m (1)；其中，n和m为0～5的整数，且满足2≤n+m≤5，F表示氨基酸序列为GGGGS的柔性单元，R表示氨基酸序列为EAAAK的刚性单元，上述式(1)中F和R各自独立地以任意顺序排列。

公开(公告)号：CN103103173B

公开(公告)日：2015-02-25

申请号：CN201110358134.7

申请日：2011-11-11

Applicant: 清华大学

Inventor： 吴敬君 ,  李晔 ,  邢新会 ,  张翀

IPC: C12N9/88 ,  C12N15/62 ,  C12N15/63 ,  C12N1/21 ,  C12N1/15 ,  C12N1/19 ,  C12N5/10 ,  C12P19/04

Abstract: 本文公开了一种硫酸软骨素酶B融合蛋白、其编码基因以及其构建方法。本文提供的硫酸软骨素酶B融合蛋白包括麦芽糖结合蛋白。此外本文还提供了一种纯化硫酸软骨素酶B融合蛋白的方法。另外，本文还涉及一种生产低分子量硫酸软骨素B的方法。

公开(公告)号：CN104140478A

公开(公告)日：2014-11-12

申请号：CN201310165701.6

申请日：2013-05-08

Applicant: 清华大学

Inventor： 邢新会 ,  吴敬君 ,  张翀

IPC: C08B37/10

Abstract: 本文涉及一种精品肝素和制备精品肝素的方法。其中制备精品肝素的方法包括：将粗品肝素溶解到水中，制备肝素溶液，向肝素溶液中加入硫酸软骨素酶AC和/或硫酸软骨素酶B，与半乳糖胺杂质进行酶反应；除去肝素溶液中的硫酸软骨素酶AC和/或硫酸软骨素酶B。

公开(公告)号：CN103103174B

公开(公告)日：2014-07-23

申请号：CN201110358185.X

申请日：2011-11-11

Applicant: 清华大学

Inventor： 李晔 ,  吴敬君 ,  邢新会 ,  张翀

IPC: C12N9/88 ,  C12N15/60 ,  C12N15/63 ,  C12N1/15 ,  C12N1/19 ,  C12N1/21 ,  C12N5/10 ,  C12P19/04

Abstract: 本文公开了一种硫酸软骨素酶AC融合蛋白、其编码基因以及其构建方法。本文提供的硫酸软骨素酶AC融合蛋白包括麦芽糖结合蛋白。此外本文还提供了纯化硫酸软骨素酶AC融合蛋白的方法。另外，本文还涉及一种生产低分子量硫酸软骨素A或C的方法。

公开(公告)号：CN103173506A

公开(公告)日：2013-06-26

申请号：CN201210328649.7

申请日：2012-09-06

Applicant: 清华大学

Inventor： 邢新会 ,  李晔 ,  吴敬君 ,  张翀 ,  冯权 ,  毕鲜荣

IPC: C12P19/00 ,  C12N9/88

Abstract: 本文公开一种低分子量肝素或超低分子量肝素的生产方法。该方法利用选自肝素酶I、II和III中两种以上的肝素酶来降解肝素从而生产低分子量肝素或超低分子量肝素。

公开(公告)号：CN101386878B

公开(公告)日：2012-02-15

申请号：CN200810225314.6

申请日：2008-10-29

Applicant: 清华大学

Inventor： 邢新会 ,  张翀 ,  吴希

IPC: C12P19/32 ,  C12P7/24 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明公开了一种利用整细胞生物转化再生氧化型辅酶I的方法。本发明的再生氧化型辅酶I的方法，是在缓冲溶液中，以还原型辅酶I为底物利用产气肠杆菌将还原型辅酶I转化为氧化型辅酶I。所述缓冲溶液的pH为4.0-9.0。所述缓冲溶液中所述还原型辅酶I的浓度为0.02mM-10mM。本发明的再生氧化型辅酶I的方法可将NADH转化为NAD+，转化率达到72％。

公开(公告)号：CN101633691B

公开(公告)日：2011-09-14

申请号：CN200810116975.5

申请日：2008-07-22

Applicant: 清华大学

Inventor： 邢新会 ,  赵洪新 ,  卢元 ,  张翀 ,  马堃 ,  蒋培霞 ,  苏涛 ,  杨程 ,  王立言

IPC: C07K14/195 ,  C12N15/31 ,  C12N15/63 ,  C12N5/10 ,  C12N1/15 ,  C12N1/19 ,  C12N1/21 ,  C12P3/00 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明公开了一种产氢相关蛋白及其编码基因与应用。本发明公开的蛋白，是(a)或(b)的蛋白质：(a)由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质；(b)将序列1的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且与产氢相关的由序列1衍生的蛋白质。将本发明提供的产氢相关蛋白命名为LdhD，灭活E.aerogenes IAM1183中所述蛋白的编码基因1dhd得到了一株工程菌。本发明获得的工程菌对环境适应性强、底物范围广、利用底物能力强、产氢效率高，可应用于生物制氢，对利用产气肠杆菌制氢具有巨大的指导意义。

公开(公告)号：CN101608180B

公开(公告)日：2011-08-10

申请号：CN200910090169.X

申请日：2009-07-29

Applicant: 清华大学

Inventor： 邢新会 ,  叶逢春 ,  张翀 ,  蒋培霞

IPC: C12N9/96 ,  C12N15/62 ,  C12N15/63 ,  C12N5/10 ,  C12N1/00 ,  C12N1/21 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种融合肝素酶。该融合肝素酶是如下a)或b)的蛋白：a)序列表中序列1的第8-1016所示的氨基酸序列组成的蛋白质；b)在序列表中序列1的氨基酸序列经过取代和/或缺失和/或添加一个或几个氨基酸且具有肝素酶活性的由a)衍生的蛋白质。上述蛋白的编码基因也属于本发明的保护范围之内。本发明产生的三重融合蛋白的酶活通过摇瓶培养可达660.3IU/L培养基，比酶活可达1.931IU/mg蛋白。本发明可以利用GFP蛋白实现菌体浓度和酶活的快速在线检测。

公开(公告)号：CN101597624B

公开(公告)日：2011-05-18

申请号：CN200910088486.8

申请日：2009-07-02

Applicant: 清华大学

Inventor： 邢新会 ,  卢元 ,  张翀 ,  来奇恒

IPC: C12P3/00 ,  C12R1/145 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明公开了一种细菌发酵生产氢气的方法。本发明的生产氢气的方法是在如下(1)或(2)的条件下，在添加磷酸根离子的基础培养基中培养产氢微生物生产氢气：(1)完全厌氧培养；(2)先在氧气体积百分比浓度为0.1-7.6％培养，然后在完全厌氧条件下培养。所述磷酸根离子为H2PO4-、HPO42-、PO43-、焦磷酸根或聚磷酸根离子。所述磷酸根离子的浓度为0.01-0.15mol/L所述基础培养基。所述产氢微生物为产气肠杆菌。所述产气肠杆菌为产气肠杆菌或过表达聚磷酸激酶的产气肠杆菌。本发明的生产氢气的方法可提高氢气的转化得率，降低生产成本。

公开(公告)号：CN101560507B

公开(公告)日：2011-04-27

申请号：CN200810104087.1

申请日：2008-04-15

Applicant: 清华大学

Inventor： 邢新会 ,  赵洪新 ,  来奇恒 ,  杨程 ,  张翀

IPC: C12N9/10 ,  C12N15/54 ,  C12N15/63 ,  C12N5/10 ,  C12N1/21 ,  C12P19/32 ,  C12R1/01 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种磷酸转移酶及其编码基因以及携带编码基因的表达载体和用该表达载体转化宿主得到的基因工程菌。本发明公开的蛋白为：a)由序列1自氨基末端第11-248位氨基酸序列组成的蛋白质；b)由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质；c)将序列1的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有磷酸转移酶活性的由序列1衍生的蛋白质。将上述蛋白基因与pMKL-C2X相连，可构建融合表达载体，转化不同宿主。本发明提供的磷酸转移酶和工程菌可用于生产5′呈味核苷酸，生产率和转化速率高，水解活性低，且最适pH值近中性。本发明技术具有很高的实际应用价值和广阔的工业应用前景。