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公开(公告)号：CN107083394A
公开(公告)日：2017-08-22
申请号：CN201710431799.3
申请日：2017-06-09
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N15/815 , C07K14/39 , C12N9/18 , C12N9/50 , C12Y301/01004 , C12Y304/21026
Abstract: 本发明公开了一种共表达核糖体蛋白提高外源蛋白表达量的方法，属于酶工程技术领域。本发明通过在表达外源目的蛋白的同时过表达核糖体蛋白RPL10、RPL38、RPL43，显著提高了外源目的蛋白的表达量。
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公开(公告)号：CN104099356B
公开(公告)日：2016-08-24
申请号：CN201410280742.4
申请日：2014-06-20
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明为一种通过分子改造前肽获得的高表达量脂肪酶基因及其应用，公开了一种高表达量的脂肪酶基因，其DNA序列如以下1)或2)所示；1)DNA序列为SEQ ID NO：2所示核苷酸序列；2)在严格条件下与(1)限定的DNA序列杂交且编码具有脂肪酶活性的蛋白质的DNA分子。本发明具体提供的截短后的脂肪酶基因，在巴斯德毕赤酵母中的表达量较亲本华根霉脂肪酶得到了提高，用于表达后，可显著提高时空产率。
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公开(公告)号：CN104195151A
公开(公告)日：2014-12-10
申请号：CN201410375196.2
申请日：2014-07-31
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种基于全基因组结合生物信息学特异性筛选华根霉脂肪酶基因的方法，属于基因工程领域。本发明针对具有特定催化性能和用途的目标脂肪酶，通过全基因组脂肪酶基因挖掘，分类、催化特性预测得到候选基因；将候选基因分别在大肠杆菌中表达，通过分别检测可溶蛋白和包涵体活性进行筛选，获得具有特定催化性能的华根霉脂肪酶基因，并在重组大肠杆菌中进行活性表达制备。最终获得了编码仅在包涵体状态下表现酯合成活性和甲醇解活性的脂肪酶的基因。本发明方法将显著地提高具有特定特性新型脂肪酶基因获得的效率，对于其他酶的筛选和制备也提供了有价值的参考。
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公开(公告)号：CN103589741A
公开(公告)日：2014-02-19
申请号：CN201310567472.0
申请日：2013-11-14
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种新的脯氨酸特异性内切蛋白酶基因及其应用，其特征在于其核苷酸序列如以下1）或2）所示：1）其核苷酸序列为SEQ ID NO.1所示核苷酸序列；2）在1）限定的核苷酸序列基础上经碱基的缺失、取代、插入或突变而成且具有编码有活性的脯氨酸特异性内切蛋白酶的核苷酸序列。采用本发明提供的基因获得的重组酶具有脯氨酸特异性内切蛋白酶活性以及耐酸性环境等优点，对提高啤酒，葡萄酒，果汁饮品等非生物稳定性具有明显效果，具有重大应用潜力。
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公开(公告)号：CN102653743B
公开(公告)日：2013-09-18
申请号：CN201210145503.9
申请日：2010-08-13
Applicant: 江南大学
Abstract: 通过定向进化构建的热稳定性提高的脂肪酶突变体，属于酶的基因工程技术领域。本发明公开了由华根霉（Rhizopus chinensis）CCTCC M201021脂肪酶作为亲本，经分子生物学技术而获得的热稳定性提高的脂肪酶突变体。在各突变体的氨基酸序列中，涉及到的氨基酸突变为Met101Thr、Glu107Gly、Ala129Ser、Ser151Asn、Cys160Leu、Lys161Arg、Pro168Leu、Pro168His、Leu180His、Asp182Tyr、Thr183Ala、Thr218Ser、Lys219Asp、Ala230Phe、Ser234Phe、Val261Gly、His317Pro、Val329Ala、Glu363Arg、Asn366Asp、Ser373Cys中的一种或几种。以在65℃下半衰期t50来表示，这些突变体的热稳定性较亲本华根霉脂肪酶得到了提高。本发明也公开了编码脂肪酶突变体的DNA序列、表达载体、宿主细胞。
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Patent Agency Ranking
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公开(公告)号：CN102994471A
公开(公告)日：2013-03-27
申请号：CN201210527837.2
申请日：2012-12-10
Applicant: 江南大学
IPC: C12N9/20 , C12N15/55 , C12N15/10 , C12N1/19 , C12N5/10 , C12N15/81 , C12P7/64 , A21D8/04 , C12R1/84
CPC classification number: Y02E50/13
Abstract: 本发明公开了一种最适温度提高的脂肪酶突变体，属于酶的基因工程技术领域。本发明公开了由华根霉（Rhizopus chinensis）CCTCC M201021脂肪酶作为亲本，经分子生物学技术而获得的最适温度提高的脂肪酶突变体，突变体的突变氨基酸为Asp310Val。该突变体的最适温度较亲本华根霉脂肪酶得到了提高，具有重要的工业应用价值。
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公开(公告)号：CN101985415B
公开(公告)日：2013-01-02
申请号：CN201010539291.3
申请日：2010-11-11
Applicant: 江南大学
IPC: C07C49/627 , C07C45/34 , C07C35/28 , C07C29/50
Abstract: 一种常温下空气氧化a-蒎烯制备马鞭烯醇和马鞭烯酮的方法，属于马鞭烯醇和马鞭烯酮制备技术领域。本发明以a-蒎烯为原料，在常温空气条件下，加入催化剂和助催化剂1，助催化剂2，催化氧化得到马鞭烯醇和马鞭烯酮。本发明制备马鞭烯醇和马鞭烯酮的反应条件温和，反应时间短，操作简单，催化剂便宜易得，产率高，有较高的工业化生产价值。
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公开(公告)号：CN102653743A
公开(公告)日：2012-09-05
申请号：CN201210145503.9
申请日：2010-08-13
Applicant: 江南大学
Abstract: 通过定向进化构建的热稳定性提高的脂肪酶突变体，属于酶的基因工程技术领域。本发明公开了由华根霉（Rhizopuschinensis）CCTCCM201021脂肪酶作为亲本，经分子生物学技术而获得的热稳定性提高的脂肪酶突变体。在各突变体的氨基酸序列中，涉及到的氨基酸突变为Met101Thr、Glu107Gly、Ala129Ser、Ser151Asn、Cys160Leu、Lys161Arg、Pro168Leu、Pro168His、Leu180His、Asp182Tyr、Thr183Ala、Thr218Ser、Lys219Asp、Ala230Phe、Ser234Phe、Val261Gly、His317Pro、Val329Ala、Glu363Arg、Asn366Asp、Ser373Cys中的一种或几种。以在65℃下半衰期t50来表示，这些突变体的热稳定性较亲本华根霉脂肪酶得到了提高。本发明也公开了编码脂肪酶突变体的DNA序列、表达载体、宿主细胞。
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公开(公告)号：CN101984053B
公开(公告)日：2012-07-25
申请号：CN201010581033.1
申请日：2010-12-09
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种发酵生产脂肪酶的方法，属于发酵工程领域。本发明以含有华根霉（Rhizopuschinensis）CCTCCNo.M201021脂肪酶基因的重组酵母菌株GS115/pPIC9K-proRCL为生产菌株，通过甲醇诱导的分阶段控制，显著提高了脂肪酶的产量。该方法简单易行，适合产业化生产。
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