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公开(公告)号:CN101957375B
公开(公告)日:2013-03-20
申请号:CN201010295008.7
申请日:2010-10-15
Applicant: 扬州大学
IPC: G01N33/558 , G01N27/02 , G01N27/30
Abstract: 本发明涉及呋喃它酮残留物无标记的阻抗型免疫传感器,及其制备方法和应用,所说的该传感器通过金胶制备、金电极的预处理、1,4-苯二硫醇修饰金电极、单层纳米金胶的自组装和抗体的固定5个步骤而制得。其特征在于是将纳米金通过自组装方法固定于金电极表面,用来固定呋喃它酮残留物的单克隆抗体而构建得到。使用时,先建立阻抗的相对变化率%△Rct与AMOZ浓度的关系,再根据待测样品的阻抗相对变化率%△Rct就可确定其AMOZ浓度。采用本发明的传感器和检测方法具有快速简便的特点,解决当前呋喃它酮残留检测操作费时的缺陷。
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公开(公告)号:CN119639816A
公开(公告)日:2025-03-18
申请号:CN202411879349.7
申请日:2024-12-19
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明公开了具有免疫抑制作用非洲猪瘟病毒蛋白真核表达载体的构建方法及应用,涉及病毒编码蛋白表达及功能研究生物技术领域。本发明以非洲猪瘟病毒基因组作为模板,采用特异性引物进行PCR扩增,回收PCR片段后与pcDNA3.1载体连接,得到阳性的重组质粒,即具有抑制细胞对Poly(dT:dT)、Poly(I:C)、外源IFN‑β刺激免疫反应功能的真核表达载体。本发明构建方法简单、合理,真核表达载体转染细胞表达后,可应用于抑制Poly(dT:dT)、Poly(I:C)、外源IFN‑β刺激细胞免疫反应中,将有助于ASFV检测方法的建立以及作为候选靶点参与疫苗的开发。
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公开(公告)号:CN107365787B
公开(公告)日:2024-02-06
申请号:CN201710763557.4
申请日:2017-08-30
Applicant: 扬州大学
Abstract: 具有免疫抑制作用禽白血病病毒衣壳蛋白真核表达载体的构建方法及应用,涉及病毒编码蛋白表达及功能研究生物技术领域。本发明以pGEX‑6p‑1‑p27/BL21质粒作为模板,采用特异性引物进行PCR扩增,回收PCR片段后与pcDNA3.1载体链接,得到阳性的重组质粒,即具有抑制细胞对LPS和Poly(I:C)刺激免疫反应功能的真核表达载体。本发明构建方法简单、合理,真核表达载体转染细胞表达后,可应用于抑制LPS或Poly(I:C)刺激细胞免疫反应中,为抗禽白血病免疫抑制药物的研究与开发提供靶点。
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公开(公告)号:CN113981137B
公开(公告)日:2023-09-22
申请号:CN202110084845.3
申请日:2021-01-21
Applicant: 扬州大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种检测非洲猪瘟病毒的荧光定量PCR试剂盒及应用。所述荧光定量PCR试剂盒中含有SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的引物,荧光定量PCR反应试剂,以及标准品和和对照品。本发明的荧光定量PCR试剂盒可以对非洲猪瘟病毒进行检测,该试剂盒的特异性强,只与非洲猪瘟病毒特异性结合,与其他猪源病毒没有交叉反应;而且检测的灵敏度高,在标准品为1×101~1×108拷贝范围内都有极好的线性关系,可以高效检测非洲猪瘟病毒病猪棉拭子以及无临床症状的病毒携带猪,提高了检测效率。
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公开(公告)号:CN115927213A
公开(公告)日:2023-04-07
申请号:CN202211207209.6
申请日:2022-09-30
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明本发明属于基因工程疫苗技术领域,具体涉及表达鸡新城疫病毒F基因的重组火鸡疱疹病毒及其构建方法和应用。利用CRISPR/Cas9基因编辑技术,将含优化的新城疫基因VII型株的F基因与SV40融合表达盒插入HVT US2病毒非复制区。本发明获得的重组病毒rHVT‑Fopt株,在体外可以稳定表达NDV F基因。将重组病毒rHVT‑Fopt免疫1日龄SPF鸡,免疫后28天针对新城疫强毒株的攻击可以产生100%的免疫保护。
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公开(公告)号:CN110483637B
公开(公告)日:2022-06-10
申请号:CN201910659588.4
申请日:2019-07-22
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K16/10 , C07K16/40 , C12N15/13 , A61K39/42 , A61P31/16 , G01N33/577 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种抗禽流感病毒神经氨酸酶N2单克隆抗体、编码基因及其应用,属于生物医学技术领域。抗禽流感病毒神经氨酸酶N2单克隆抗体特异性地识别禽流感病毒神经氨酸酶蛋白N2,具有抑制神经氨酸酶活性和中和病毒能力。本发明还克隆了抗禽流感病毒神经氨酸酶N2单克隆抗体的轻、重链可变区基因序列和氨基酸序列,确认了基因序列和氨基酸序列的唯一性。本发明涉及的单克隆抗体、可变区基因及氨基酸序列可用于N2的禽流感病毒的诊断和治疗药物研发等,具有广泛的临床应用价值。
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公开(公告)号:CN114134124A
公开(公告)日:2022-03-04
申请号:CN202111318523.7
申请日:2021-11-09
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N7/01 , C12N15/45 , C12N15/44 , C12N15/40 , C12N15/869 , A61K39/12 , A61K39/145 , A61K39/17 , A61P31/14 , A61P31/16
Abstract: 本发明提供一种重组火鸡疱疹病毒及其制备方法和应用,具体提供了一种重组火鸡疱疹病毒,在火鸡疱疹病毒基因组的HVT005区和HVT006区之间的间隔区中插入外源基因,所述外源基因选自来自鸡新城疫病毒、禽流感病毒或禽传染性囊病病毒的基因;所述火鸡疱疹病毒基因组的HVT005区和HVT006区之间的间隔区为火鸡疱疹基因组的8867nt‑9319nt之间,其核苷酸序列为SEQ ID NO:1。本发明首次发现HVT005‑HVT006间隔区可作HVT外源基因插入的位点。利用CRISPR/Cas9技术在HVT基因组HVT005‑HVT006间隔区插入外源基因,可作为鸡新城疫预防和禽流感预防的疫苗候选株。
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公开(公告)号:CN112048006B
公开(公告)日:2021-04-27
申请号:CN202010937821.3
申请日:2020-09-08
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K14/165 , C07K16/10 , G01N33/68 , G01N33/569 , G01N33/58 , G01N33/543
Abstract: 本发明公开了一种IBV特异性中和表位抗原多肽,所述多肽为环状多肽,所述多肽的氨基酸序列为CSCPYVSYGRFCIQPDGSIKQC。本发明还公开了一种IBV特异性抗体及其制备方法。本发明还公开了一种替代中和效力测定的ELISA方法。本发明还公开了一种ELISA检测试剂盒,本发明应用建立的pELISA方法检测IBV抗体,并发现其与抗IBV中和抗体呈正相关,本发明可以用于IBV疫苗免疫效果的评价,IBV感染鸡的抗体水平测定,从而有益于鸡群健康管理等。
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公开(公告)号:CN108727478A
公开(公告)日:2018-11-02
申请号:CN201810568218.5
申请日:2018-06-05
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K14/165 , C07K7/08 , C07K16/10 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种鸡传染性支气管炎病毒(IBV)特异性多肽抗原,所述IBV特异性多肽抗原具有氨基酸序列如SEQ ID NO:1~9中的任意一条或几条所示,或者具有经过一个或多个氨基酸残基的取代、缺失或添加而形成的氨基酸序列。本发明还公开了一种IBV特异性多肽抗原组合物。本发明还公开了一种IBV抗体及其制备方法。本发明还公开了一种ELISA检测试剂盒及其检测方法和应用。该抗原表位具有很好的抗体反应性,可以用来特异性检测抗IBV的抗体,具有应用价值。
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公开(公告)号:CN106442982B
公开(公告)日:2018-06-08
申请号:CN201610796060.8
申请日:2016-08-31
Applicant: 扬州大学
IPC: G01N33/569
Abstract: 本发明提供一种禽白血病病毒J亚群(ALV‑J)特异抗原多肽及其应用。该抗原多肽氨基酸序列为SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5或者其衍生序列,由病毒的囊膜蛋白基因(env)的gp85部分基因编码;其特异性强、亲水性较好,反应性好、纯度高。此外,将该抗原多肽用于制备特异性检测ALV‑J抗体的间接ELISA检测试剂盒,所述检测试剂盒包括包被由一个或者几个如上所述的ALV‑J特异抗原多肽的酶标板以及相关试剂,该试剂盒检测ALV‑J抗体,特异性高,成本低,有利于推广使用,其效果明显优于常规试剂盒和进口试剂盒。上述ALV‑J特异抗原多肽,和由其制备的间接ELISA检测试剂盒适用于评价ALV‑J感染或者净化结果;上述ALV‑J特异抗原多肽适用于制备特异性抗ALV‑J的抗体。
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