一种层出镰孢菌的特异性检测靶标FPRO_09882及其应用

    公开(公告)号:CN114032331A

    公开(公告)日:2022-02-11

    申请号:CN202111517635.5

    申请日:2021-12-13

    Abstract: 本发明公开了一种层出镰孢菌(Fusarium proliferatum)的检测新靶标FPRO_09882及其检测引物、检测试剂盒和检测方法,该检测靶标FPRO_09882的蛋白序列如SEQ ID NO:1所示,编码该蛋白的DNA序列如SEQ ID NO:2所示。同时,本发明还公开了特异性检测靶标FPRO_09882的RPA检测技术的特异性引物及探针组合,其正向引物序列如SEQ ID NO:3所示,反向引物序列如SEQ ID NO:4所示,探针序列如SEQ ID NO:5所示。本发明发现了层出镰孢菌新的检测靶标,为层出镰孢菌的检测提供了新的检测途径,同时基于该靶标开发的RPA‑LFD检测引物和探针,能够实现层出镰孢菌的特异性检测,灵敏度高。

    一种冬生疫霉的特异性检测新靶标Phibe_s00003g00002.1及其应用

    公开(公告)号:CN111118038A

    公开(公告)日:2020-05-08

    申请号:CN202010041623.9

    申请日:2020-01-15

    Abstract: 本发明公开了一种冬生疫霉的检测新靶标Phibe_s00003g00002.1及其专用检测引物和检测方法,该检测靶标Phibe_s00003g00002.1的DNA序列如SEQ ID NO:1所示,蛋白序列如SEQ ID NO:2所示。同时,公开了特异性检测靶标Phibe_s00003g00002.1的RPA检测技术的特异性引物及探针组合,其正向引物序列如SEQ ID NO:3所示,反向引物序列如SEQ ID NO:4所示,探针序列如SEQ ID NO:5所示。本发明发现了新的检测靶标,且基于该靶标的快速检测方法准确性高、特异性强、操作方便、实用性好、实现了恒温扩增,同时本发明设计的引物及探针组合用于RPA-LFD检测技术,其特异性强,灵敏度高,为冬生疫霉(Phytophthora hibernalis)的检测提供了新的技术平台。

    一种基于RPA-侧流层析技术检测茄腐镰孢菌的引物和探针组合及其应用

    公开(公告)号:CN109825628B

    公开(公告)日:2019-10-18

    申请号:CN201910241240.3

    申请日:2019-03-28

    Abstract: 本发明公开了一种基于RPA‑侧流层析技术检测茄腐镰孢菌的引物及探针组合及其应用。所述应用具体为:1)提取待测样本DNA;2)以DNA为模板,进行RPA扩增;3)应用侧流层析试纸条进行扩增产物检测;当试纸条出现两条棕色条带,一条位于质控区内,一条位于检测区,则结果为阳性,表明样本中含有茄腐镰孢菌;当试纸条只有质控区出现一条棕色条带,检测区没有条带,则结果是阴性,表明样本中不含有茄腐镰孢菌。本发明所使用的引物及探针组RPA扩增效果好,条带特异性强,与其他病菌无交叉反应,在质控区有阳性对照,增加了检测的灵敏性,为茄腐镰孢菌的检测提供了新的技术平台,同时在病害侵染初期鉴定出病原物,能够对苗圃地或者发病植株中的茄腐镰孢菌进行检测。

    一种樟疫霉菌的检测靶标Pcin100006及其专用检测引物和快速检测方法

    公开(公告)号:CN109439792B

    公开(公告)日:2019-08-20

    申请号:CN201811547749.2

    申请日:2018-12-17

    Abstract: 本发明公开了一种樟疫霉菌的检测靶标Pcin100006及其专用检测引物和快速检测方法,该检测靶标Pcinn100006的DNA序列如SEQ ID NO.1所示。专用检测引物由正向内引物FIP、反向内引物BIP、正向外引物F3、反向外引物B3、正向环引物LF和反向环引物LB组成。本发明的检测方法准确性高、特异性强、操作方便、实用性好、实现了恒温扩增,同时还为樟疫霉菌的检测提供了新的技术平台,可用于樟疫霉菌的高灵敏度快速检测,同时在病害侵染初期鉴定出病原物,能够对田间土壤中的樟疫霉菌进行检测。本发明对樟疫霉菌引起的疫病防治和对减少农药盲目使用,降低生产成本,减少农药的环境污染也具有重要意义。

    一种基于RPA-侧流层析技术检测栗黑水疫霉的引物和探针组合及其应用

    公开(公告)号:CN110066885A

    公开(公告)日:2019-07-30

    申请号:CN201910361142.3

    申请日:2019-04-30

    Abstract: 本发明公开了一种基于重组酶介导等温扩增-侧流层析技术(RPA-LFD)检测栗黑水疫霉(Phytophthora cambivora)的引物及探针组合及其应用。采用所述引物及探针组合检测栗黑水疫霉(P.cambivora)的具体方法为:1)提取待测样本DNA;2)以DNA为模板,进行RPA扩增;3)应用侧流层析试纸条进行扩增产物检测。本发明所使用的引物及探针组RPA扩增效果好,条带特异性强,与其他病菌无交叉反应,在质控区有阳性对照,增加了检测的灵敏性,为栗黑水疫霉(P.cambivora)的检测提供了新的技术平台,同时适用于栗黑水疫霉病菌寄主苗木、插枝等植物材料及其土壤和介质中的栗黑水疫霉(P.cambivora)进行检测。

    RPA-LFD技术检测雪松疫霉的引物和探针组合及其应用

    公开(公告)号:CN109988864A

    公开(公告)日:2019-07-09

    申请号:CN201910410222.3

    申请日:2019-05-15

    Abstract: 本发明公开了一种RPA‑LFD技术检测雪松疫霉的引物和探针组合及其应用方法。采用所述引物及探针组合检测雪松疫霉的具体方法为:1)提取待测样本DNA;2)以DNA为模板,进行RPA扩增;3)应用LFD进行扩增产物检测;当试纸条出现两条棕色条带,一条位于质控区内,一条位于检测区,则结果为阳性,表明样本中含有雪松疫霉;当试纸条只有质控区出现一条棕色条带,检测区没有条带,则结果是阴性,表明样本中不含有雪松疫霉。本发明所提供的引物及探针组合RPA扩增效果好,条带特异性强、灵敏度高,为雪松疫霉的检测提供了新的技术手段。

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