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公开(公告)号：CN109988860B
公开(公告)日：2022-08-30
申请号：CN201910194831.X
申请日：2019-03-14
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6844 , C12Q1/04 , C12N15/11 , C12R1/645
Abstract: 本发明公开了一种用于检测冬生疫霉的引物及探针组合物及其试剂盒和检测方法，该引物和探针序列为：RPA‑PSYPT‑F：5'‑TTCCACCCTTCCACCAGACTGCTGAGGAGG‑3'，RPA‑PSYPT‑R：5’‑[Biotin]TGTTAGCTGCGTGTTCGTTGGTCACCCCAGA‑3’，SYPT‑P：5’‑[FAM]CTTCTGTGATTTATCCAGAAAATCCGTACGAT‑THE‑GAGCTGGACGGCAAGA[C3‑spacer]‑3’。本发明所使用的引物探针组RPA扩增效果好，条带特异性强，与其他病菌无交叉反应，在检测区的有阳性反应，增加了检测的灵敏性。
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公开(公告)号：CN112852648B
公开(公告)日：2021-08-31
申请号：CN202110214342.3
申请日：2021-02-26
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了樟疫霉原生质体遗传转化菌株的筛选及其转化体系的建立。本发明筛选一株致病性最强的樟疫霉菌株ATC 15400，通过PEG/CaCl2介导的方法将含有筛选标记的绿色荧光蛋白转到樟疫霉菌株ATC 15400基因组中，在G418选择培养基上筛选转化子。本发明实现了稳定高效的樟疫霉原生质体遗传转化，建立了一套完整的遗传转化方法，获得表达绿色荧光信号且稳定遗传的转化子，转化效率高、稳定性好。
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公开(公告)号：CN112852648A
公开(公告)日：2021-05-28
申请号：CN202110214342.3
申请日：2021-02-26
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了樟疫霉原生质体遗传转化菌株的筛选及其转化体系的建立。本发明筛选一株致病性最强的樟疫霉菌株ATC 15400，通过PEG/CaCl2介导的方法将含有筛选标记的绿色荧光蛋白转到樟疫霉菌株ATC 15400基因组中，在G418选择培养基上筛选转化子。本发明实现了稳定高效的樟疫霉原生质体遗传转化，建立了一套完整的遗传转化方法，获得表达绿色荧光信号且稳定遗传的转化子，转化效率高、稳定性好。
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公开(公告)号：CN109912699B
公开(公告)日：2020-09-29
申请号：CN201910369504.3
申请日：2019-05-05
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种来源于樟疫霉的效应子蛋白Avh87及其编码基因和应用。该蛋白是具有序列表中的SEQ ID No.1的氨基酸序列的蛋白质；表达该蛋白的核苷酸序列如序列表中的SEQ ID No.2所示。实验证明，该基因能够抑制凋亡前体蛋白Bax诱导的植物细胞过敏反应或者致病疫霉菌激发子INF1诱导的植物细胞死亡的功能。本发明对于充实植物病原卵菌与寄主互作的分子机制资料信息，以及建立植物病原卵菌病害的综合防治技术策略都有重要意义。
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公开(公告)号：CN109988823A
公开(公告)日：2019-07-09
申请号：CN201910404137.6
申请日：2019-05-15
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12Q1/6844 , C12Q1/6895 , C12Q1/04 , C12N15/11 , C12R1/645
Abstract: 本发明公开了一种重组酶介导等温扩增‑侧流层析技术检测橡树疫霉的引物和探针组合及其应用方法。采用所述引物及探针组合检测橡树疫霉的具体方法为：1)提取待测样本DNA；2)以DNA为模板，进行RPA扩增；3)应用LFD进行扩增产物检测；当试纸条出现两条棕色条带，一条位于质控区内，一条位于检测区，则结果为阳性，表明样本中含有橡树疫霉；当试纸条只有质控区出现一条棕色条带，检测区没有条带，则结果是阴性，表明样本中不含有橡树疫霉。本发明所使用的引物及探针组合用于RPA‑LFD特异性强，灵敏度高，为橡树疫霉的检测提供了新的技术平台。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN109825627A
公开(公告)日：2019-05-31
申请号：CN201910241234.8
申请日：2019-03-28
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6844 , C12Q1/04 , C12N15/11 , C12R1/645
Abstract: 本发明公开了一种RPA-侧流层析检测丁香疫霉的引物和探针组合及其应用。本发明所使用的引物探针组RPA扩增效果好，条带特异性强，与其他病菌无交叉反应，在检测区的有阳性反应，增加了检测的灵敏性。本发明系首次采用RPA层析技术建立快速检测丁香疫霉的方法，并通过特异性和灵敏度评价，可用于实际样品检测，同时为检疫性疫霉菌的检测提供了新的技术平台，在病害侵染初期鉴定出病原物，能够对出入境水果中的冬生疫霉进行检测。本发明对丁香疫霉引起的疫病和对减少农药盲目使用，降低生产成本，减少农药的环境污染也具有重要意义。
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公开(公告)号：CN109825627B
公开(公告)日：2019-10-22
申请号：CN201910241234.8
申请日：2019-03-28
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6844 , C12Q1/04 , C12N15/11 , C12R1/645
Abstract: 本发明公开了一种RPA‑侧流层析检测丁香疫霉的引物和探针组合及其应用。本发明所使用的引物探针组RPA扩增效果好，条带特异性强，与其他病菌无交叉反应，在检测区的有阳性反应，增加了检测的灵敏性。本发明系首次采用RPA层析技术建立快速检测丁香疫霉的方法，并通过特异性和灵敏度评价，可用于实际样品检测，同时为检疫性疫霉菌的检测提供了新的技术平台，在病害侵染初期鉴定出病原物，能够对出入境水果中的丁香疫霉进行检测。本发明对丁香疫霉引起的疫病和对减少农药盲目使用，降低生产成本，减少农药的环境污染也具有重要意义。
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公开(公告)号：CN109912699A
公开(公告)日：2019-06-21
申请号：CN201910369504.3
申请日：2019-05-05
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种来源于樟疫霉的效应子蛋白Avh87及其编码基因和应用。该蛋白是具有序列表中的SEQ ID No.1的氨基酸序列的蛋白质；表达该蛋白的核苷酸序列如序列表中的SEQ ID No.2所示。实验证明，该基因能够抑制凋亡前体蛋白Bax诱导的植物细胞过敏反应或者致病疫霉菌激发子INF1诱导的植物细胞死亡的功能。本发明对于充实植物病原卵菌与寄主互作的分子机制资料信息，以及建立植物病原卵菌病害的综合防治技术策略都有重要意义。
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公开(公告)号：CN109439792A
公开(公告)日：2019-03-08
申请号：CN201811547749.2
申请日：2018-12-17
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6844 , C12Q1/04 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种樟疫霉菌的检测靶标Pcin100006及其专用检测引物和快速检测方法，该检测靶标Pcinn100006的DNA序列如SEQ ID NO.1所示。专用检测引物由正向内引物FIP、反向内引物BIP、正向外引物F3、反向外引物B3、正向环引物LF和反向环引物LB组成。本发明的检测方法准确性高、特异性强、操作方便、实用性好、实现了恒温扩增，同时还为樟疫霉菌的检测提供了新的技术平台，可用于樟疫霉菌的高灵敏度快速检测，同时在病害侵染初期鉴定出病原物，能够对田间土壤中的樟疫霉菌进行检测。本发明对樟疫霉菌引起的疫病防治和对减少农药盲目使用，降低生产成本，减少农药的环境污染也具有重要意义。
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公开(公告)号：CN109439792B
公开(公告)日：2019-08-20
申请号：CN201811547749.2
申请日：2018-12-17
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6844 , C12Q1/04 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种樟疫霉菌的检测靶标Pcin100006及其专用检测引物和快速检测方法，该检测靶标Pcinn100006的DNA序列如SEQ ID NO.1所示。专用检测引物由正向内引物FIP、反向内引物BIP、正向外引物F3、反向外引物B3、正向环引物LF和反向环引物LB组成。本发明的检测方法准确性高、特异性强、操作方便、实用性好、实现了恒温扩增，同时还为樟疫霉菌的检测提供了新的技术平台，可用于樟疫霉菌的高灵敏度快速检测，同时在病害侵染初期鉴定出病原物，能够对田间土壤中的樟疫霉菌进行检测。本发明对樟疫霉菌引起的疫病防治和对减少农药盲目使用，降低生产成本，减少农药的环境污染也具有重要意义。
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