一种重组枯草芽孢杆菌及其构建方法与应用

    公开(公告)号:CN116622605A

    公开(公告)日:2023-08-22

    申请号:CN202310468440.9

    申请日:2023-04-27

    Abstract: 本发明公开了一种重组枯草芽孢杆菌及其构建方法与应用。本发明利用CRISPR/cas9技术,先构建出了敲除产孢膜丝氨酸蛋白酶htrC和碱性丝氨酸蛋白酶aprX的出发菌株B.S168△2,再以出发菌株B.S168△2为基础,构建出了八种敲除胞外蛋白酶基因的底盘细胞B.S168△3、B.S168△4、B.S168△5、B.S168△6、B.S168△7、B.S168△8、B.S168△9和B.S168△10,并进一步筛选出了无抗性残留,转化效率高、几乎无胞外蛋白酶且不会影响胞外目的蛋白积累的底盘细胞B.S168△8、B.S168△9和B.S168△10,随后在此基础上又筛选出了最适合分泌表达普鲁兰酶的底盘菌株B.S168△9,构建出的重组菌株B.S168△9amyX相比于原始菌株B.S168的酶活有显著提升。

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