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公开(公告)号：CN107988330A
公开(公告)日：2018-05-04
申请号：CN201711305271.8
申请日：2017-12-11
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/6851 , C12Q1/04 , C12R1/01
Abstract: 本发明公开了同时检测单增李斯特菌和伊氏利斯特菌的双重PCR方法。属于食源性致病菌检测技术领域。本发明针对新发掘的单增李斯特菌特异性基因LMOf2365_0970和伊氏利斯特菌特异性基因AX25_00730设计引物和探针，该检测方法能够有效地检测出食品中的单增李斯特菌和伊氏利斯特菌，对两种目标菌的检测限为N×102CFU/mL，荧光定量PCR检测时间小于40min，具有检测灵敏度高、特异性好、抗干扰能力强的特点，可实现对食品中单增李斯特菌和伊氏利斯特菌快速定性和准确定量检测，达到快速筛查污染食品样本的目的。
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公开(公告)号：CN107723348A
公开(公告)日：2018-02-23
申请号：CN201711229374.0
申请日：2017-11-29
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/6865 , C12Q1/689 , C12Q1/04 , C12N15/11
CPC classification number: C12Q1/6865 , C12Q1/689 , C12Q2531/143 , C12Q2563/107
Abstract: 本发明公开了一种鉴定单增李斯特菌1/2c血清型的NASBA检测引物及方法，属于生物技术领域。正向引物序列为5’-GAAATACATTTTGGTCTAG-3’，反向引物序列为5’-aattctaatacgactcactatagggATTACTGGGAATAACTTGA-3’，单增李斯特菌1/2c血清型检测用分子信标探针序列为5’-JOE-CGATCGAGGAAATGCTTATGCAGATATTACGATCG-DABCYL-3’，检测方法包括下列步骤：单增李斯特菌RNA提取，实时NASBA反应，定性分析。本发明构建的引物和分子信标对单增李斯特菌1/2c血清型菌株的鉴定具有高度的特异性和灵敏度，所述的检测方法操作步骤简单，检测时间短，可进行实时定性分析，并且可对活菌和死菌有效区分。
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公开(公告)号：CN105087422B
公开(公告)日：2018-01-26
申请号：CN201510226616.5
申请日：2015-05-06
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N1/20 , C07K14/195 , C07K1/14 , C12P21/02 , G01N33/68 , A23L3/3463 , A61K35/747 , A61P31/04 , C12R1/25
Abstract: 本发明公开了一种植物乳杆菌、分离培养方法及其生产的新型细菌素的纯化鉴定方法。植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)JLA‑9的菌种保藏编号为(CGMCC NO.10686)，该生产菌株从东北传统发酵食品“酸菜”中分离得到，其能够在MRS培养基里发酵产生一种新型的细菌素，新型细菌素通过四步纯化方式最后经鉴定得到。本发明提供的细菌素可抑制芽孢类细菌以及食品中其他常见的食源性腐败和致病细菌，同时对热及pH稳定，可以被蛋白酶降解，因此安全性较高，不会在人体内残留，可以作为食品防腐剂广泛应用到食品工业中。
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公开(公告)号：CN104561295B
公开(公告)日：2017-11-24
申请号：CN201410835984.5
申请日：2014-12-29
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种检测阪崎克罗诺杆菌目的核苷酸序列及检测试剂盒与检测方法，其中目的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示，试剂盒包括：PCR buffer，MgCl2溶液，dNTP，CS21‑L引物，CS21‑R引物和TaqDNA聚合酶；检测方法为首先提取待测样品的基因组DNA，然后以提取的基因组DNA为模板，以CS21‑L和CS21‑R引物对CS21进行PCR反应，最后检测PCR产物中是否存在大小为152bp的单一扩增产物。该方法具有检测时间短，抗干扰能力强，成本低，特异性好，灵敏度高的优点，对我国的食品安全具有重要意义。
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公开(公告)号：CN104611433B
公开(公告)日：2017-01-18
申请号：CN201510044659.1
申请日：2015-01-28
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明提供一种检测丙型副伤寒沙门氏菌的3个特异性靶基因、相应的PCR引物对、利用以上引物对和靶基因进行检测的方法。PCR引物对是根据3个丙型副伤寒沙门氏菌特异性检测靶点设计而成，该特异性检测靶点稳定高、特异性强，通过合理优化PCR反应体系，凝胶电泳检测手段，可以快速、准确地鉴定出丙型副伤寒沙门氏菌。本发明提供的检测方法包括：(1)提取样品DNA，PCR扩增(2)凝胶电泳检测扩增产物(3)比较电泳后条带，如果在523bp、212bp和169bp位置有条带，则证明样品中含有丙型副伤寒沙门氏菌。通过实验比较分析，本发明方法具有单一性强，检测结果可靠，结果判定简单的特点，可以广泛应用于食品卫生领域。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN105754917A
公开(公告)日：2016-07-13
申请号：CN201610010187.2
申请日：2016-01-07
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种Plipastatin衍生环五脂肽及其产生菌和应用。产Plipastatin衍生环五脂肽的枯草芽孢杆菌Best2，通过同源重组的方法靶向缺失枯草芽孢杆菌pB2?L基因组中的ppsC和ppsD基因，获得缺失ppsC和ppsD基因的枯草芽孢杆菌Best2。在改良的Landy培养基中对枯草芽孢杆菌Best2进行发酵，获得含Plipastatin衍生环五脂肽的发酵液，对发酵液进行分离纯化，获得含Plipastatin衍生环五脂肽粗提物。该新型的plipastatin衍生环五脂肽不仅对丝状真菌仍然具有一定的抑菌活性，并且对革兰氏阳性菌的抑菌活性有所提高。
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公开(公告)号：CN105695543A
公开(公告)日：2016-06-22
申请号：CN201610046208.6
申请日：2016-01-22
Applicant: 南京农业大学
CPC classification number: C07K7/50
Abstract: 本发明公开了一种生物表面活性素的生产方法，将解淀粉芽孢杆菌fmb50先后接种于PDA斜面培养基进行培养，培养后再接种于BPY种子培养基继续培养，最后再接种于发酵培养基培养后得到含有生物表面活性素的培养液；然后将培养液加水稀释后调节pH，再通过加入壳聚糖、海藻酸钠和硅藻土进行絮凝后过滤；最后将滤饼使用低级醇溶解提取后过滤，将滤液减压蒸馏得到生物表面活性素粗品。本发明提供的生物表面活性素的生产方法能够实现工业化制备生物表面活性素，并且制备得到的生物表面活性素纯度高，有效弥补了目前生物表面活性素不能大规模生产的不足。
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公开(公告)号：CN103667106B
公开(公告)日：2015-10-28
申请号：CN201310470098.2
申请日：2013-10-10
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N1/20 , C12P21/02 , C07K7/06 , C07K14/335 , C07K1/36 , C07K1/30 , C07K1/20 , C07K1/16 , A23L3/3526 , A61K38/08 , A61K38/16 , A61P31/00 , C12R1/25
Abstract: 本发明公开了一种植物乳杆菌、其细菌素以及培养与分离纯化方法，其中植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）163菌种保藏号为CGMCC NO.8224。该植物乳杆菌在MRS液体培养基或者白菜番茄培养基中进行培养，可以发酵产生细菌素，其中所产生的细菌素为由两种氨基酸序列构成一级结构的两种新型细菌素，细菌素通过四次分离纯化以及鉴定得到。经过测定，该细菌素具有较广的抑菌谱以及较好的热稳定性和pH稳定性，可以广泛应用于食品及医药领域中。
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公开(公告)号：CN104450940A
公开(公告)日：2015-03-25
申请号：CN201410833123.3
申请日：2014-12-29
Applicant: 南京农业大学
CPC classification number: C12Q1/689 , C12Q1/6844
Abstract: 本发明公开了一种用于检测单核细胞增生李斯特氏菌的核苷酸序列及检测方法与检测试剂盒，其中核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，检测方法为首先提取待测样品的基因组DNA；然后以该基因组DNA为模板，与特异性引物Lm16、PCR缓冲液、MgCl2溶液、脱氧三磷酸核苷混合物和Taq-DNA聚合酶混合配置PCR反应体系，进行PCR反应；最后检测PCR产物是否为大小为1623bp的单一扩增产物。试剂盒包括特异性引物、PCR缓冲液、MgCl2溶液、脱氧三磷酸核苷混合物和Taq-DNA聚合酶。本发明提供的试剂盒能够有效地检测出食品中的单核细胞增生李斯特菌氏菌，且细菌的检测灵敏度高，特异性好，抗干扰能力强。
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公开(公告)号：CN103478509A
公开(公告)日：2014-01-01
申请号：CN201310505342.4
申请日：2013-10-24
Applicant: 南京农业大学 , 无锡健宏生物科技有限公司 , 无锡恒泽元生物科技有限公司
Abstract: 本发明涉及一种解淀粉芽孢杆菌抗菌脂肽的生产方法及其在对虾饲料中的应用，属于农业领域中的水产养殖技术领域和生物技术领域。以保藏号为CGMCC No.6249的解淀粉芽孢杆菌fmb-50为菌种，依次通过种子培养、扩大培养和发酵生产获得发酵液；发酵液经微滤去除菌体或经膜过滤和纳滤，加入玉米淀粉或多孔淀粉吸附、喷雾干燥得所述的抗菌物质饲料添加剂抗菌效价为40000～50000IU或250000IU/g。本发明利用解淀粉芽孢杆菌fmb-50为原料发酵生产抗菌物质，可大规模工业化生产，生产周期短，生产成本大大降低，用于对虾饲料中，可以降低死亡率,提高对虾的饲料利用率、促进对虾非专一性免疫反应和提高能量代谢水平。
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